ପରିଚୟ:
RNA, ବ scientific ଜ୍ଞାନିକ ନାମ ରିବନୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍, ଏହାର ସଂକ୍ଷିପ୍ତକରଣ ରିବୋ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ରୁ ଆସିଥାଏ, ଫସଫୋଡିଏଷ୍ଟର୍ ବଣ୍ଡ ମାଧ୍ୟମରେ ଅତି କମରେ ଦଶହରା ରିବନୁକ୍ଲାଏଟାଇଡ୍ ସଂଯୋଗ କରି ଗଠିତ ଏକ ପ୍ରକାର ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ |
RNA ଅନୁସନ୍ଧାନର ମୂଳ ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ହେଉଛି ପ୍ରଦୂଷଣମୁକ୍ତ ମୋଟ RNA ବାହାର କରିବା, ଏବଂ RNA ଉତ୍ତୋଳନର ମ basic ଳିକ ନୀତିକୁ ନିମ୍ନଲିଖିତ ଭାବରେ ସଂକ୍ଷିପ୍ତ କରାଯାଇପାରେ:
1. ପ୍ରଥମେ କକ୍ଷଗୁଡ଼ିକୁ ବ୍ୟାଘାତ କରନ୍ତୁ |
2. ତା’ପରେ ମାକ୍ରୋମୋଲ୍ୟୁକୁଲାର ଅପରିଷ୍କାରତା (ପ୍ରୋଟିନ୍, ଲିପିଡସ୍, ଡିଏନ୍ଏ ଇତ୍ୟାଦି) ଅପସାରଣ କରନ୍ତୁ |
3. ଶେଷରେ, ଲୁଣ ଏବଂ ଜ organic ବ ଦ୍ରବଣଗୁଡିକ ଅପସାରଣ କରିବା ଏବଂ RNA କୁ ଅଧିକ ଶୁଦ୍ଧ କରିବା ସମୟରେ RNA ନିର୍ଗତ ହୁଏ |
ନିଷ୍କାସନ ପଦ୍ଧତିର ଅତୀତ ଏବଂ ବର୍ତ୍ତମାନ |
ପ୍ରଥମ ପି generation ଼ିର RNA ନିଷ୍କାସନ ପଦ୍ଧତି ହେଉଛି ଟ୍ରାଇଜୋଲ୍ ବୃଷ୍ଟିପାତ ପ୍ରଣାଳୀ (ବ୍ୟବହୃତ ରେଜେଣ୍ଟଗୁଡିକରେ ଗୁଆନାଡାଇନ୍ ଆଇସୋଥାଇଓସିୟାନେଟ୍, ଫେନୋଲ୍, କ୍ଲୋରୋଫର୍ମ ଇତ୍ୟାଦି ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ) ପିଆଟ୍ର ଚୋମଜିନସ୍କି ଏବଂ ଜେଜେମା ନିକୋଲେଟା ସାଚି ନାମକ ଜଣେ ଜେଜେବାପାଙ୍କ ଦ୍ ted ାରା ଉଦ୍ଭାବିତ, କାରଣ ଏହି ଉଦ୍ଭାବନ RNA ଅନୁସନ୍ଧାନକୁ ଶୀଘ୍ର ଏବଂ ସହଜ କରିଥାଏ, ଯେହେତୁ ଏହା ପରେ RNA ଅନୁସନ୍ଧାନ ଆରମ୍ଭ ହୋଇଥିଲା |
ପରେ, ଜେଜେବାପା ଏହି ପେଟେଣ୍ଟକୁ ଇନଭାଇଟ୍ରୋଜେନକୁ ବିକ୍ରି କଲେ ଏବଂ ଇନଭାଇଟ୍ରୋଜେନ ଏହି ପଦ୍ଧତିକୁ ବିଶ୍ to କୁ ପ୍ରୋତ୍ସାହିତ କଲେ ଏବଂ ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ପଦ୍ଧତିରେ ପରିଣତ ହେଲେ |
ପରେ, ଥର୍ମୋ ଦ୍ୱାରା ଇନଭାଇଟ୍ରୋଜେନ୍ ଅଧିଗ୍ରହଣ ହେଲା!
ପ୍ରତିନିଧୀ ଉତ୍ପାଦ: ଇନଭାଇଟ୍ରୋଜେନର TRIzol reagent |
ଅବଶ୍ୟ, TRIzol ବୃଷ୍ଟିପାତ ପ୍ରଣାଳୀରେ ଏକାଧିକ ବୃଷ୍ଟିପାତ ଏବଂ RNA ର ଉତ୍ତୋଳନ ଆବଶ୍ୟକ ହୁଏ, ଏବଂ ବ୍ୟବହୃତ ରେଜେଣ୍ଟଗୁଡିକ ବିଷାକ୍ତ ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟ କରିବାକୁ ବହୁ ସମୟ ନେଇଥାଏ |
ତେଣୁ, ଦ୍ generation ିତୀୟ ପି generation ଼ିର ସ୍ତମ୍ଭ-ଏନଜାଇମ୍ ବିଶୋଧନ ପଦ୍ଧତି ସୃଷ୍ଟି ହେଲା, ସିଲିକା ଜେଲ୍ ମେମ୍ବ୍ରାନକୁ ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଆଡସର୍ପସନ୍ ସାମଗ୍ରୀ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରି ନମୁନାରେ RNA ର ପୁନରୁଦ୍ଧାରକୁ ବ imize ାଇବା ପାଇଁ |
ଦ୍ୱିତୀୟ ପି generation ଼ିର ପଦ୍ଧତି ସ୍ଥିର କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ଆଧାରରେ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ସରଳ କରିଥାଏ, ବିପଦ କାରକକୁ ହ୍ରାସ କରିଥାଏ ଏବଂ RNA ଉତ୍ତୋଳନର କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତାକୁ ଉନ୍ନତ କରିଥାଏ |
ପ୍ରତିନିଧୀ ଦ୍ରବ୍ୟ: QIAGEN RNeasy ଏବଂ ଅଧିକାଂଶ ଘରୋଇ ଉତ୍ପାଦ |
ଅବଶ୍ୟ, ଉଭୟ ପ୍ରଥମ ଏବଂ ଦ୍ୱିତୀୟ ପି generation ଼ିର ପଦ୍ଧତିଗୁଡ଼ିକ DNA ପ୍ରଦୂଷଣକୁ ହଟାଇବା ପାଇଁ DNase ର ବ୍ୟବହାର ଆବଶ୍ୟକ କରନ୍ତି, ଯାହା ପରବର୍ତ୍ତୀ ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପରୀକ୍ଷଣରେ କିଛି ଅସୁବିଧା ଆଣିଥାଏ |ଅବଶିଷ୍ଟ DNase ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ର କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ହ୍ରାସ କରିବ ଏବଂ ପ୍ରଥମ-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ cDNA ସିନ୍ଥେସିସ୍ ହ୍ରାସ କରିବ, ଯାହାଦ୍ୱାରା ଫଳାଫଳର ସଠିକତା ପ୍ରଭାବିତ ହେବ |
ତେଣୁ, ଦ୍ୱିତୀୟ ପି generation ଼ିର ଆଧାରରେ ତୃତୀୟ ପି generation ଼ିର ନିଷ୍କାସନ ପଦ୍ଧତିକୁ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ କରାଯାଏ |ପରୀକ୍ଷଣରେ କ en ଣସି ଏନଜାଇମ୍ ଯୋଡିବା ଆବଶ୍ୟକ ନାହିଁ, ଏବଂ RNA କେବଳ ଦୁଇଟି ସ୍ତମ୍ଭ ସହିତ ସହଜରେ ମିଳିପାରିବ |
ସ୍ତମ୍ଭ :: ଡିଏନ୍ଏ ସଫା କରିବାକୁ ସ୍ତମ୍ଭ |
ସ୍ତମ୍ଭ :: କେବଳ RNA- ସ୍ତମ୍ଭ ବିଶେଷ ଭାବରେ ବିଜ୍ ads ାପନ କରେ ଏବଂ RNA ପୁନରୁଦ୍ଧାର କରେ |
ଏହିପରି ଏକ ସରଳ ଅପରେସନ୍ କେବଳ ସମୟ ସଞ୍ଚୟ କରେ ନାହିଁ, ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପରୀକ୍ଷଣଗୁଡିକର କାର୍ଯ୍ୟକୁ ମଧ୍ୟ ସହଜ କରିଥାଏ!
ପ୍ରତିନିଧୀ ଦ୍ରବ୍ୟ: QIAGEN RNeasy Plus ଏବଂଫରେଗେନ୍ |RNA ଶୁଦ୍ଧକରଣ ସିରିଜ୍ ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକ |
(RNeasy Plus)
(ଫୋରେଗେନସ୍ଉଦ୍ଭିଦ ସମୁଦାୟ RNA ବିଚ୍ଛିନ୍ନ କିଟ୍)
ତୁମକୁ ଚୁପଚାପ୍ କୁହ!ଫୋରେଗେନର ଆରଏନଏ କିଟ୍ ମଧ୍ୟ ଏକ ଅତି ସହଜ-ବ୍ୟବହାର ଯୋଗ୍ୟ RNase Eraser କୁ ଉପସ୍ଥାପିତ କରେ, ଯାହା ମନୁଷ୍ୟ ଶରୀରରେ କ tox ଣସି ବିଷାକ୍ତ ପଦାର୍ଥ ଯୋଗ ନକରି 1 ମିନିଟରେ 400μg ର RNase କୁ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ରୂପେ ବାହାର କରିପାରେ!
ପିକ୍1: ଅପରେସନ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟା ତୁଳନା ଚାର୍ଟ |
ଫୋରେଜେନର ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକ କେବଳ ଦୁଇଟି ଗୀତରେ RNA ନିଷ୍କାସନ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ କରିପାରିବ, ଅନ୍ୟମାନଙ୍କୁ ତୁମର ପରୀକ୍ଷଣ ପ୍ରଗତି ପାଇଁ ealous ର୍ଷା କର ନାହିଁ!
ପିକ୍୨:Eପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଫଳାଫଳ | ତୁଳନା ଚାର୍ଟ
ପ୍ରଥମ ପି generation ଼ି (୧: TRIzol)
ଦ୍ୱିତୀୟ ପି generation ଼ି (୨: QIAGEN ର RNeasy)
ତୃତୀୟ ପି generation ଼ି (:: QIAGEN ର RNeasy plus, 4: Foregene)
ପିକ୍3: qPCR ଗ୍ରାଫ୍ (ବିସ୍ତାରଣ ବକ୍ର ଗ୍ରାଫ୍)
ପ୍ରଥମ ପି generation ଼ି (ସବୁଜ ଅର୍ଥ TRIzol -, ନାଲି ଅର୍ଥ TRIzol +)
ଦ୍ୱିତୀୟ ପି generation ଼ି (ଆକାଶ ନୀଳ ଅର୍ଥ QIAGEN RNeasy-, ନାଲି ଅର୍ଥ QIAGEN RNeasy +)
ତୃତୀୟ ପି generation ଼ି (ନୀଳ ଅର୍ଥ QIAGEN RNeasy plus, ସବୁଜ ଅର୍ଥ Foregene)
(ଟିପନ୍ତୁ: qPCR ଗ୍ରାଫ୍ “-” ସୂଚାଇଥାଏ ଯେ DNase ଯୋଗ କରାଯାଇ ନାହିଁ ଏବଂ DNA ପ୍ରଦୂଷଣ ଅପସାରଣ କରାଯାଇ ନାହିଁ | ତେଣୁ, CT ଅଧିକ ଏବଂ ଫଳାଫଳ ସଠିକ୍ ନୁହେଁ;
ପ୍ରତ୍ୟେକ ବ technical ଷୟିକ ଉନ୍ନୟନର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ପରୀକ୍ଷଣର କାର୍ଯ୍ୟ ଏକ ସରଳ ଏବଂ ଅଧିକ ଉପଭୋକ୍ତା-ଅନୁକୂଳ ଦିଗରେ ବିକାଶ କରୁଛି |
ଅଧିକ ବ scientific ଜ୍ଞାନିକ ଅନୁସନ୍ଧାନକାରୀଙ୍କୁ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ସମୟ ଏବଂ ମୂଲ୍ୟ ସଞ୍ଚୟ କରିବାକୁ, ଉଚ୍ଚ-ଗୁଣାତ୍ମକ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଫଳାଫଳ ହାସଲ କରିବାକୁ ଏବଂ ମିଳିତ ଭାବରେ ଅଧିକ ମୂଲ୍ୟବାନ ବ scientific ଜ୍ଞାନିକ ଅନୁସନ୍ଧାନ ସଫଳତା ସୃଷ୍ଟି କରିବାକୁ ଫୋରେଗେନ ଲକ୍ଷ୍ୟ ରଖିଛି |
ପୋଷ୍ଟ ସମୟ: ଜୁଲାଇ -09-2021 |