ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ନିଷ୍କାସନ ହେଉଛି ମଲିକୁଲାର ଜୀବବିଜ୍ଞାନ ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ଏକ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ କ ill ଶଳ |ଏହା ଏହି ଦକ୍ଷତାକୁ ଦକ୍ଷତାର ସହିତ ବ୍ୟବହାର କରିପାରିବ କି ନାହିଁ ତାହା ପରବର୍ତ୍ତୀ ପରୀକ୍ଷାର୍ଥୀମାନଙ୍କ ପାଇଁ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ମାଷ୍ଟରମାନଙ୍କୁ ନବୀକରଣ କରିବା ପାଇଁ ଏକ ପୂର୍ବ ସର୍ତ୍ତ ହୋଇପାରିଛି |
ବିଭିନ୍ନ ଗବେଷଣା ସାମଗ୍ରୀ ଅନୁଯାୟୀ, ପରୀକ୍ଷକମାନେ ମୁଖ୍ୟତ the ନିମ୍ନଲିଖିତ ତିନି ପ୍ରକାରରେ ବିଭକ୍ତ:
ପଶୁ ପ୍ରମୁଖ, ଉଦ୍ଭିଦ ପ୍ରମୁଖ, ମାଇକ୍ରୋବିଓଲୋଜି ପ୍ରମୁଖ |
ପ୍ରତ୍ୟେକ ପ୍ରକାରର ପରୀକ୍ଷକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ନମୁନା ପାଇଁ ସ୍ୱତନ୍ତ୍ର କ skills ଶଳର ଏକ ସେଟ୍ ଚାଷ କରିବା ପାଇଁ କପି କପି ଜାରି ରଖିବେ |
ଆଜି, ସଂପାଦକ କିଛି ଯନ୍ତ୍ରପାତି ଏବଂ ପ୍ରପ୍ସ ଆଣିବାକୁ ଚାହୁଁଛନ୍ତି ଯାହା ପରୀକ୍ଷକମାନଙ୍କ ନିକଟରେ ଡର୍ଜନ୍ ମାଧ୍ୟମରେ ଉପଲବ୍ଧ ନୁହେଁ |ସେମାନଙ୍କ ସହିତ, ଆପଣ ଶୀଘ୍ର ସମସ୍ତ ଦିଗରେ ଅପଗ୍ରେଡ୍ କରିପାରିବେ |ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ god ଶ୍ୱର ହେବା ସ୍ୱପ୍ନ ନୁହେଁ |
ଏହି ସମସ୍ୟା ଉଦ୍ଭିଦ ବୃତ୍ତିଗତ ପରୀକ୍ଷକମାନଙ୍କ ପାଇଁ (ଅନ୍ୟ ବୃତ୍ତିର ପରୀକ୍ଷକମାନେ ମଧ୍ୟ ଏଥିରୁ ଶିଖିପାରିବେ ~) |
ମୁଁ ବିଶ୍ୱାସ କରେ ଯେ ପ୍ରତ୍ୟେକ ପି generation ଼ିର ପରୀକ୍ଷକମାନେ କ୍ଲାସିକ୍ ପ୍ଲାଣ୍ଟ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ନିଷ୍କାସନ ପଦ୍ଧତିଗୁଡ଼ିକ ସେମାନଙ୍କ ପୂର୍ବପୁରୁଷମାନଙ୍କଠାରୁ ପି generation ଼ି ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ବଂଶାନୁକ୍ରମେ ଶୁଣିଥିବେ |ଉଦ୍ଭିଦ ନିଷ୍କାସନ ଶିଳ୍ପରେ ତିନୋଟି ବଡ ନାମ |
ଯଦିଓ ବଡ ପିଲାମାନେ ଉତ୍କୃଷ୍ଟ, ତଥାପି ସେମାନଙ୍କର କିଛି ଅନାବଶ୍ୟକ ଅଭାବ ରହିଛି |
TRIzol ପଦ୍ଧତି |
ପ୍ରାୟତ extract ବାହାର କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |
RNA
ବିଷାକ୍ତ ଏବଂ କଷ୍ଟଦାୟକ |
Gen ଜେନୋମ ପ୍ରଦୂଷଣ ଧାରଣ କରିଥାଏ |
CTAB ପଦ୍ଧତି |
ପ୍ରାୟତ extract ବାହାର କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |
ଜିନୋମ |DNA |
● ସମୟ ସାପେକ୍ଷ |
Salt ଲୁଣ ଅପେକ୍ଷା ଧୋଇ CTAB ଅପସାରଣ କରିବା ଅଧିକ କଷ୍ଟକର, ଅଳ୍ପ ପରିମାଣର ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ ଏନଜାଇମ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଉପରେ ବହୁତ ପ୍ରଭାବ ପକାଇବ |
SDS ପଦ୍ଧତି |
ପ୍ରାୟତ extract ବାହାର କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |
ପ୍ଲାଜାମିଡ୍
High ଉଚ୍ଚ ପଲିସାକାରାଇଡ୍ ସାମଗ୍ରୀ ଥିବା ଉଦ୍ଭିଦମାନଙ୍କ ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ ନୁହେଁ |
ପ୍ରୋଟିନ୍ ପ୍ରଦୂଷଣ
ଡବଲ୍-ସ୍ପିଡ୍ ଅପଡେଟ୍ ପୁନରାବୃତ୍ତି ସହିତ ଏହି ଆଧୁନିକ ସମାଜରେ, ପାରମ୍ପାରିକ କାର୍ଯ୍ୟ ପ୍ରଣାଳୀ ପରୀକ୍ଷକଙ୍କ ଆବଶ୍ୟକତା ପୂରଣ କରିବାରେ ସକ୍ଷମ ନୁହେଁ, ଏବଂ ଯନ୍ତ୍ରପାତି ଅପଗ୍ରେଡ୍ ଆସୁଛି |
ଫୋରେଜେନ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ଏକ୍ସଟ୍ରାକସନ୍ କିଟ୍ ଦଶଥର ପରୀକ୍ଷକଙ୍କ ଦ୍ N ାରା N ଥର ପରୀକ୍ଷଣ କରାଯାଇଛି |ଏହା ଚଳାଇବା ସରଳ, କ tox ଣସି ବିଷାକ୍ତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବ୍ୟବହାର କରେ ନାହିଁ ଏବଂ କ any ଣସି ଏନଜାଇମ୍ ଯୋଗ କରେ ନାହିଁ |ପ୍ରାପ୍ତ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଉଚ୍ଚ ଶୁଦ୍ଧତା ଅଟେ, ଯାହା ଉତ୍କୃଷ୍ଟ ପରୀକ୍ଷକଙ୍କ ଦ daily ନିକ ନିଷ୍କାସନ କାର୍ଯ୍ୟ ପାଇଁ ଜରୁରୀ |
ଫୋରେଜେନ୍ RNA ଆଇସୋଲେସନ୍ କିଟ୍ |
ଏଠାରେ, ମୁଁ ପରୀକ୍ଷକମାନଙ୍କୁ ଏକ ଲୁକ୍କାୟିତ ଅପରେସନ୍ କ que ଶଳ ମଧ୍ୟ ପ୍ରକାଶ କରିବି, ଯାହା ଉଦ୍ଭିଦ ପ୍ରକାର ଅନୁଯାୟୀ ଉପଯୁକ୍ତ ନିଷ୍କାସନ ପଦ୍ଧତି ବାଛିବା (ଉଦ୍ଭିଦ ପ୍ରକାର ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରିବାର ପଦ୍ଧତି ପ୍ରବନ୍ଧର ଶେଷରେ!), କାରଣ କେତେକ ଉଦ୍ଭିଦ ପଲିସାକାରାଇଡ୍ ଏବଂ ପଲିଫେନୋଲ୍ ବିଷୟବସ୍ତୁରେ ଅଧିକ, ଏବଂ ପାରମ୍ପାରିକ ପଦ୍ଧତି ସାଂଘାତିକ |ନିୟନ୍ତ୍ରଣ କରିବାକୁ ଯଥେଷ୍ଟ ନୁହେଁ |
ହଉ, ଏହା ଏହିପରି ...
ଟ୍ରାଇଜୋଲ୍ ପଦ୍ଧତି ସିଧାସଳଖ ପଲିସାକାରାଇଡ୍ ଏବଂ ପଲିଫେନୋଲ୍ ସହିତ କଦଳୀ ପତ୍ର, ଜିଙ୍କଗୋ ପତ୍ର ଏବଂ ସୂତା ପତ୍ର ସହିତ ନମୁନା ତଳେ ଆଣ୍ଠୁଏ |
ଏହି ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ପାଇଁ, ଫୋରେଗେନ ପରୀକ୍ଷକମାନଙ୍କ ପାଇଁ ଦୁଇଟି ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଉପକରଣ ବିକଶିତ କରିଛନ୍ତି |କମ୍ ପଲିସାକାରାଇଡ୍ ଏବଂ ପଲିଫେନୋଲ୍ ବିଷୟବସ୍ତୁ ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ପଲିସାକାରାଇଡ୍ ଏବଂ ପଲିଫେନୋଲ୍ ବିଷୟବସ୍ତୁ ସହିତ ଉଦ୍ଭିଦ RNA ନିଷ୍କାସନ କିଟ୍ ଏକ ଲକ୍ଷ୍ୟରେ ଶତ୍ରୁମାନଙ୍କୁ ହତ୍ୟା କରିପାରିବ, ଯାହାଫଳରେ ପରୀକ୍ଷକମାନେ ଆଉ ବିଭିନ୍ନ ଉଦ୍ଭିଦକୁ ଭୟ କରିବେ ନାହିଁ |ସର equipment ୍ଜାମକୁ ସିଧାସଳଖ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରନ୍ତୁ!
ନିଷ୍କାସନ ପଦ୍ଧତିକୁ ନବୀକରଣ କରିବାର ଆବଶ୍ୟକତା ସହିତ, ନମୁନା ପ୍ରି-ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ମଧ୍ୟ ନବୀକରଣ କରାଯିବା ଆବଶ୍ୟକ |
ଉଦ୍ଭିଦ ନମୁନାଗୁଡିକର ସ୍ structure ତନ୍ତ୍ର ଗଠନ ହେତୁ, କେତେକ ଉଦ୍ଭିଦର ଚେର ଏବଂ କଠିନ ଡାଳଗୁଡିକ ସମାନ ଭାବରେ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡ୍ ଏବଂ ଚୂର୍ଣ୍ଣ କରିବା କଷ୍ଟକର |
ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ଇଣ୍ଡଷ୍ଟ୍ରିରେ ପ୍ରାୟ 80% ଲୋକ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ପାଇଁ ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନ ବ୍ୟବହାର କରୁଥିବାବେଳେ 20% ରୁ କମ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରିକ୍ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ଏବଂ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡ୍ ବିଡ୍ ଦୋହରିବା ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତି |
ଯଦିଓ ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନ୍ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ଶସ୍ତା ଏବଂ ବ୍ୟବହାର କରିବା ସହଜ, ପ୍ରତ୍ୟେକ ଥର ଏବଂ ପ୍ରୟାସରେ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡ୍ କରିବା ପାଇଁ ଏକ ବଡ଼ ନମୁନା ଚାହିଦା ଥିବା ପରୀକ୍ଷକମାନଙ୍କ ପାଇଁ ଏହା ଏକ ଦୁ night ସ୍ୱପ୍ନ!ଯଦି ମୋର୍ଟାର ସଫା ନହୁଏ, ତେବେ ଏହା ନମୁନା ମଧ୍ୟରେ କ୍ରସ୍-ପ୍ରଦୂଷଣ ସୃଷ୍ଟି କରିବ |
ଇଲେକ୍ଟ୍ରିକ୍ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂର ପ୍ରଭାବ ବ୍ୟକ୍ତିଙ୍କ ଠାରୁ ଭିନ୍ନ ହୋଇଥାଏ, ଏବଂ ପରୀକ୍ଷକଙ୍କ କାର୍ଯ୍ୟ ଅଭ୍ୟାସ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଅମ୍ଳର ଅଖଣ୍ଡତା ଉପରେ ଅଧିକ ପ୍ରଭାବ ପକାଇବ ଏବଂ ଆବଶ୍ୟକ ହେଲେ ନିମ୍ନ ତାପମାତ୍ରା କାର୍ଯ୍ୟ ଆବଶ୍ୟକ |
ତେଣୁ, ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ବିଡ୍ ଦର୍ପଣକୁ ସାମ୍ପ୍ରତିକ ସରଳ ଏବଂ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ଉପକରଣ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଇପାରେ |
ସାଧାରଣ ଦୋହରିବା ମୋଡରେ ଭୂଲମ୍ବ ଦୋହରିବା, ଭୂସମାନ୍ତର ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଶୀଳ ଦୋହରିବା ଏବଂ ତିନି-ଡାଇମେନ୍ସନାଲ୍ (ଭୂସମାନ୍ତର ଦୋହରିବା) ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ |ଅବଶ୍ୟ, ଫରେଗେନର ଟିସୁ କ୍ରସର୍ ବିଦ୍ୟମାନ ମଡେଲ୍କୁ ଭାଙ୍ଗି ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂକୁ ଅଧିକ ସମାନ କରିବା ପାଇଁ ଏକ ନୂତନ 4D ଦୋହରିବା ପଦ୍ଧତି ଗ୍ରହଣ କରେ |
ବିଭିନ୍ନ ନମୁନା ଆବଶ୍ୟକତା ପୂରଣ କରନ୍ତୁ, କାର୍ଯ୍ୟ କରିବା ସହଜ |
ଅନନ୍ୟ 4D କ୍ରସ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି, କ୍ରସ୍ ଦକ୍ଷତା 20% ବୃଦ୍ଧି କରାଯାଇଛି |
ନମୁନାଟି ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ଆବଦ୍ଧ, କ cross ଣସି କ୍ରସ୍-ପ୍ରଦୂଷଣ ନାହିଁ |
ଶାନ୍ତ, ≤56 ଡେସିବଲ୍ |
ପରୀକ୍ଷଣର ଫଳାଫଳକୁ ଏକ ତରଙ୍ଗ ସହିତ ତୁଳନା କରନ୍ତୁ |
ପରୀକ୍ଷା ନମୁନା: 50mg ଗହମ ପତ୍ର (ପଲିସାକାରାଇଡ୍ ଏବଂ ପଲିଫେନୋଲର କମ୍ ପରିମାଣ)
ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ପ୍ରକାର ବାହାର କରନ୍ତୁ: RNA |
ଦାଗ ପରିମାଣ: 5μl
ବ୍ୟବହୃତ ନିଷ୍କାସନ କିଟ୍ ହେଉଛି ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ଲାଣ୍ଟ ଟୋଟାଲ୍ RNA ଏକ୍ସଟ୍ରାକସନ୍ କିଟ୍ (RE-05011)
ତଥ୍ୟ ଏବଂ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ଗ୍ରାଫ୍ ତୁଳନା କଲେ ଏହା ଦେଖାଯାଇପାରେ ଯେ ମେସିନ୍ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ପରେ ବାହାର କରାଯାଇଥିବା RNA ର ଏକାଗ୍ରତା ଏବଂ ଶୁଦ୍ଧତା ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନ୍ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ଠାରୁ ଅଧିକ |ସେହି ସମୟରେ, କାରଣ ମେସିନ୍ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ନମୁନାକୁ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ରୂପେ ଭାଙ୍ଗିପାରେ, ଛୋଟ RNA ଭଲ ଭାବରେ ବାହାର କରାଯାଇପାରିବ ଏବଂ RNA ର ଅଖଣ୍ଡତା ବଜାୟ ରହିପାରିବ |
ପରୀକ୍ଷା ନମୁନା: 50mg ginkgo ପତ୍ର (ଉଚ୍ଚ ପଲିସାକାରାଇଡ୍ ଏବଂ ପଲିଫେନୋଲ୍ ସାମଗ୍ରୀ)
ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ପ୍ରକାର ବାହାର କରନ୍ତୁ: RNA |
ଦାଗ ପରିମାଣ: 5μl
ଫୋରେଜେନ୍ ପଲିସାକାରାଇଡ୍ ପଲିଫେନୋଲ୍ ପ୍ଲାଣ୍ଟ ସମୁଦାୟ RNA ନିଷ୍କାସନ କିଟ୍ (RE-05021) ବ୍ୟବହାର କରି |
ପଲିସାକାରାଇଡ୍ ଏବଂ ପଲିଫେନୋଲର ଅଧିକ ବିଷୟବସ୍ତୁ ସହିତ ଏହି ନମୁନା ଗୋଷ୍ଠୀକୁ ଦେଖନ୍ତୁ |ଏହାର ପ୍ରଭାବ ଆହୁରି ସ୍ପଷ୍ଟ ହୋଇଛି |ସମାନ ଶୁଦ୍ଧତା ସହିତ, ମେସିନ୍ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ RNA ର ଏକାଗ୍ରତା ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନ୍ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂର ପ୍ରାୟ 5 ଗୁଣ, ଏବଂ ଛୋଟ RNA ତଥାପି ଦୁର୍ବଳ ଦେଖାଯାଏ ~
ଯଦି ଆପଣ ଅନୁଭବ କରୁଛନ୍ତି ଯେ ଉପରୋକ୍ତ ଯନ୍ତ୍ରଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରୁ କ enough ଣସିଟି ଯଥେଷ୍ଟ ଦ୍ରୁତ ନୁହେଁ, ତେବେ ସମ୍ପାଦକଙ୍କୁ ଚରମ ଯନ୍ତ୍ରପାତି ଆଣିବାକୁ ପଡିବ!
ପ୍ଲାଣ୍ଟ ସିଧାସଳଖ PCR ସିରିଜ୍ |
ଏହି ଯନ୍ତ୍ରର ଅନନ୍ୟ ବ feature ଶିଷ୍ଟ୍ୟ ହେଉଛି ଉଦ୍ଭିଦ ପତ୍ର କିମ୍ବା ମଞ୍ଜିଗୁଡିକ ଭୂମି ଏବଂ ଭାଙ୍ଗିବା ଆବଶ୍ୟକ ନାହିଁ, ଏବଂ ଲାଇସିସ୍ ପାଇଁ ସିଧାସଳଖ ଇପି ଟ୍ୟୁବରେ ଫୋପାଡି ଦିଆଯାଏ, ଏବଂ ଫଳସ୍ୱରୂପ ଲାଇସିସ୍ ମିଶ୍ରଣ PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପାଇଁ ଏକ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରେ |ଗୋଟିଏ ପାଦ ଶୀଘ୍ର ଏହା ସରଳ!ଏଥି ସହିତ, ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ଲାଣ୍ଟଗୁଡିକର ସିଧାସଳଖ PCR ସିରିଜ୍ UNG ପ୍ରଦୂଷଣ ବିରୋଧୀ ପ୍ରଣାଳୀ ସହିତ ସଜ୍ଜିତ ହୋଇଛି, ଯାହା ଦ୍ the ାରା ପରୀକ୍ଷକମାନେ ଆଉ ଲାବୋରେଟୋରୀରେ ଏରୋସୋଲ୍ ପ୍ରଦୂଷଣ ବିଷୟରେ ଚିନ୍ତା କରିବେ ନାହିଁ ଏବଂ ସହଜରେ ଏହି ପରୀକ୍ଷା କରିପାରିବେ।
ବିଚାର ଟିପ୍ସ:
ଏହା ଏକ ପଲିସାକାରାଇଡ୍ ପଲିଫେନୋଲ୍ ଉଦ୍ଭିଦ କି ନୁହେଁ ତାହା କିପରି ବିଚାର କରାଯିବ |
ପ୍ରାୟ 20mg ଟିସୁ ବ୍ଲକ୍ ନିଅନ୍ତୁ ଏବଂ ଏହାକୁ ଏକ ସଫା 1.5ml ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ ଟ୍ୟୁବରେ ରଖନ୍ତୁ, 200ul 200mM NaOH ସମାଧାନ ମିଶାନ୍ତୁ, ଏହାକୁ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ 95 at ରେ ରଖନ୍ତୁ, ଲାଇସିସ୍ ପରେ ରଙ୍ଗ ପରିବର୍ତ୍ତନକୁ ଦେଖନ୍ତୁ |
1. ଯଦି ଲାଇସେଟର ରଙ୍ଗ ସବୁଜ କିମ୍ବା ହାଲୁକା ହଳଦିଆ, ଏହାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ଟିସୁ ପଲିଫେନୋଲର ମାତ୍ରା କମ୍, ଏବଂ ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ଲାଣ୍ଟ ସିରିଜ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |
2. ଯଦି ଲାଇସେଟ୍ ବାଦାମୀ-ହଳଦିଆ କିମ୍ବା ବାଦାମୀ-ନାଲି, ଏହାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ଟିସୁ ପଲିଫେନୋଲ୍ ପରିମାଣ ଅଧିକ, ଏବଂ ଫୋରେଜେନ୍ ପଲିସାକାରାଇଡ୍ ପଲିଫେନୋଲ୍ ପ୍ଲାଣ୍ଟ ପ୍ଲସ୍ ସିରିଜ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |
ପୋଷ୍ଟ ସମୟ: ଅଗଷ୍ଟ -20-2021 |
