PCR ହେଉଛି ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଏମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ଏବଂ ଏହାର ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ହେତୁ ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |ତଥାପି, PCR ବାରମ୍ବାର ଥର୍ମାଲ୍ ଡେନାଟରେସନ୍ ଆବଶ୍ୟକ କରେ ଏବଂ ଯନ୍ତ୍ର ଏବଂ ଯନ୍ତ୍ରପାତି ଉପରେ ନିର୍ଭର କରିବାର ସୀମାବଦ୍ଧତାରୁ ମୁକ୍ତି ପାଇପାରିବ ନାହିଁ, ଯାହା କ୍ଲିନିକାଲ୍ ଫିଲ୍ଡ ପରୀକ୍ଷଣରେ ଏହାର ପ୍ରୟୋଗକୁ ସୀମିତ କରେ |

1990 ଦଶକ ଆରମ୍ଭରୁ, ଅନେକ ଲାବୋରେଟୋରୀ କ୍ରମାଗତ ତାପମାତ୍ରା ବୃଦ୍ଧି ବ technology ଷୟିକ ଜ୍ଞାନକ develop ଶଳ ବିକାଶ କରିବାକୁ ଆରମ୍ଭ କରିଛି ଯାହା ତାପଜ ଡେନାଟରେସନ୍ ଆବଶ୍ୟକ କରେନାହିଁ |ବର୍ତ୍ତମାନ ସେମାନେ ଲୁପ୍-ମଧ୍ୟସ୍ଥ ଆଇସୋଥର୍ମାଲ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି, ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ରିପ୍ଲେସମେଣ୍ଟ ଆଇସୋଥର୍ମାଲ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି, ରୋଲିଂ ସର୍କଲ୍ ଆଇସୋଥର୍ମାଲ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ଏବଂ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ କ୍ରମ ନିର୍ଭରଶୀଳତା ବିକାଶ କରିଛନ୍ତି |ଆଇସୋଥର୍ମାଲ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା | 

Loop-mediated isothermal amplification |

ବର୍ଦ୍ଧିତ ନୀତି ଏହା ଉପରେ ଆଧାରିତ ଯେ DNA ପ୍ରାୟ 65 ° C ରେ ଗତିଶୀଳ ସନ୍ତୁଳନ ଅବସ୍ଥାରେ ଅଛି |ଯେତେବେଳେ କ any ଣସି ପ୍ରାଇମର୍ ବେସ୍-ଯୋଡି ହୋଇ ଡବଲ୍-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ DNA ର ସଂପୃକ୍ତ ଅଂଶକୁ ବିସ୍ତାର ହୁଏ, ଅନ୍ୟ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ବିଚ୍ଛିନ୍ନ ହୋଇ ଏକକ-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ହୋଇଯିବ |

ଏହି ତାପମାତ୍ରାରେ, DNA 4 ଟି ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରାଇମର୍ ବ୍ୟବହାର କରେ ଯାହାକି ଏକ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍-ଡିସପ୍ଲେମେଣ୍ଟ୍ DNA ପଲିମେରେଜ୍ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ |

ପ୍ରଥମେ ଟାର୍ଗେଟ ଜିନ୍ ଉପରେ 6 ଟି ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଅଞ୍ଚଳ F3, F2, F1, B1, B2, B3 ନିର୍ଣ୍ଣୟ କର, ଏବଂ ତାପରେ ଏହି specific ଟି ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଅଞ୍ଚଳ ଉପରେ ଆଧାର କରି 4 ଟି ପ୍ରାଇମର୍ ଡିଜାଇନ୍ କର (ନିମ୍ନ ଚିତ୍ରରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି):

ଫରୱାର୍ଡ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ପ୍ରାଇମର୍ (FIP) F1c ଏବଂ F2 କୁ ନେଇ ଗଠିତ |

ପଛୁଆ ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ପ୍ରାଇମର୍ (BIP) B1c ଏବଂ B2 କୁ ନେଇ ଗଠିତ, ଏବଂ TTTT ମ a ିରେ ସ୍ପେସର୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |

ବାହ୍ୟ ପ୍ରାଇମର୍ F3 ଏବଂ B3 ଯଥାକ୍ରମେ ଲକ୍ଷ୍ୟ ଜିନ୍ ଉପରେ F3 ଏବଂ B3 ଅଞ୍ଚଳକୁ ନେଇ ଗଠିତ |

LAMP ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀରେ, ଭିତର ପ୍ରାଇମରର ଏକାଗ୍ରତା ବାହ୍ୟ ପ୍ରାଥମିକ ତୁଳନାରେ ଅନେକ ଗୁଣ |ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ପ୍ରାଇମର୍ ପ୍ରଥମେ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ସହିତ ମିଳିତ ହୋଇ ଏକ ଡିଏନ୍ଏ ଡବଲ୍ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ଗଠନ ପାଇଁ ଏକ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ସିନ୍ଥାଇଜ୍ କରେ |ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ, ବାହ୍ୟ ପ୍ରାଇମର୍ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ସହିତ ମିଳିତ ହୋଇ ଏକ DNA ଡବଲ୍ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ଗଠନ କରେ |BstDNA ପଲିମେରେଜ୍ ର କ୍ରିୟା ଅଧୀନରେ, ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ପ୍ରାଇମର୍ ଦ୍ୱାରା ସିନ୍ଥାଇଜ୍ ହୋଇଥିବା ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ମୁକ୍ତ ହୁଏ |ଅନେକ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପରେ, ସଂପୃକ୍ତ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ଶେଷରେ ଏକ ଡମ୍ବୁଲ୍ ଗଠନ ସହିତ ଏକକ DNA ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ଗଠନ କରେ |

ଡମ୍ବୁଲ୍ structure ାଞ୍ଚା DNA ସିଙ୍ଗଲ୍ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ନିଜେ ଏକ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ ଯାହାକି ଏକ ଖୋଲା ଶେଷରେ ଏକ କ୍ରାନ୍ତିକାରୀ ଷ୍ଟେମ୍-ଲୁପ୍ ଗଠନ DNA ଗଠନ କରେ |ଆଭ୍ୟନ୍ତରୀଣ ଏବଂ ବାହ୍ୟ ପ୍ରାଥମିକଗୁଡିକ କ୍ରାନ୍ତିକାରୀ ଷ୍ଟେମ୍-ଲୁପ୍ ସଂରଚନା DNA କୁ କ୍ରମାଗତ ଭାବରେ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ବିସ୍ଥାପନ ଏବଂ ବିସ୍ତାର ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ଗତି କରିବାକୁ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଦିଅନ୍ତି ଏବଂ ଶେଷରେ ବିଭିନ୍ନ ଲମ୍ବ ସହିତ ଏକାଧିକ ଷ୍ଟେମ୍-ଲୁପ୍ ଗଠନ ଗଠନ କରନ୍ତି |DNA ମିଶ୍ରଣ |

ଲୁପ୍-ମଧ୍ୟସ୍ଥ ମଧ୍ୟସ୍ଥ ଆଇସୋଥର୍ମାଲ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ର ସୁବିଧା ଏବଂ ଅସୁବିଧା |

LAMP ର ଉପକାରିତା:

)

(୨) ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟ ସ୍ୱଳ୍ପ, ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଶକ୍ତିଶାଳୀ, ଏବଂ କ special ଣସି ବିଶେଷ ଉପକରଣ ଆବଶ୍ୟକ ନାହିଁ |

LAMP ର ଅଭାବ:

(1) ପ୍ରାଥମିକତା ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକତା ବିଶେଷ ଭାବରେ ଅଧିକ |

(୨) ବର୍ଦ୍ଧିତ ଉତ୍ପାଦ କ୍ଲୋନିଂ ଏବଂ କ୍ରମ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରିବ ନାହିଁ, କିନ୍ତୁ କେବଳ ବିଚାର ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ |

()) ଏହାର ଦୃ strong ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ହେତୁ ଏରୋସୋଲ୍ ଗଠନ କରିବା ସହଜ, ମିଥ୍ୟା ପଜିଟିଭ୍ ସୃଷ୍ଟି କରେ ଏବଂ ପରୀକ୍ଷା ଫଳାଫଳକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରେ |

Sଟ୍ରେଣ୍ଡ ବିସ୍ଥାପନ ବୃଦ୍ଧି

1992 ମସିହାରେ ଆମେରିକୀୟ ପଣ୍ଡିତ ୱାକରଙ୍କ ଦ୍ proposed ାରା ପ୍ରସ୍ତାବିତ ଏନଜାଇମାଟିକ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଉପରେ ଆଧାର କରି ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ଡିସପ୍ଲେସମେଣ୍ଟ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ (SDA) ହେଉଛି ଏକ ଭିଟ୍ରୋ ଆଇସୋଥର୍ମାଲ୍ DNA ବିସ୍ତାର କ techni ଶଳ |

SDA ର ମ basic ଳିକ ପ୍ରଣାଳୀରେ ଏକ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଏଣ୍ଡୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍, ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ବିସ୍ଥାପନ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ସହିତ ଏକ DNA ପଲିମେରେଜ୍, ଦୁଇ ଯୁଗଳ ପ୍ରାଇମର୍, dNTP, ଏବଂ କ୍ୟାଲସିୟମ୍ ଏବଂ ମ୍ୟାଗ୍ନେସିୟମ୍ ଆୟନ ଏବଂ ବଫର୍ ସିଷ୍ଟମ୍ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ |

ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ ଡିସପ୍ଲେସମେଣ୍ଟ ଏମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ର ସିଦ୍ଧାନ୍ତ, ଲକ୍ଷ୍ୟସ୍ଥଳର DNA ର ଉଭୟ ମୁଣ୍ଡରେ ରାସାୟନିକ ରୂପାନ୍ତରିତ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଏଣ୍ଡୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ସ୍ୱୀକୃତି କ୍ରମ ଉପରେ ଆଧାରିତ |ଏଣ୍ଡୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ଏହାର ଚିହ୍ନିବା ସ୍ଥାନରେ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ DNA ର ବ୍ୟବଧାନକୁ ଖୋଲିଥାଏ, ଏବଂ DNA ପଲିମେରେଜ୍ ଫାଙ୍କା ′ ′ କୁ ବ ends ାଇଥାଏ ଏବଂ ପରବର୍ତ୍ତୀ DNA ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡକୁ ବଦଳାଇଥାଏ |

ଡିଏନ୍ଏର ବଦଳାଯାଇଥିବା ଏକକ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ପ୍ରାଇମର୍ ସହିତ ମିଳିତ ହୋଇ DNA ପଲିମେରେଜ୍ ଦ୍ double ାରା ଡବଲ୍ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡରେ ବିସ୍ତାର ହୋଇପାରେ |ଏହି ପ୍ରକ୍ରିୟା କ୍ରମାଗତ ଭାବରେ ପୁନରାବୃତ୍ତି ହୁଏ, ଯାହା ଦ୍ target ାରା ଲକ୍ଷ୍ୟ କ୍ରମ ଦକ୍ଷତାର ସହିତ ବୃଦ୍ଧି ପାଇଥାଏ |

ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ ଡିସପ୍ଲେସମେଣ୍ଟ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜିର ସୁବିଧା ଏବଂ ଅସୁବିଧା |

SDA ର ଲାଭ:

ବିସ୍ତାରଣ ଦକ୍ଷତା ଅଧିକ, ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟ ସ୍ୱଳ୍ପ, ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଶକ୍ତିଶାଳୀ, ଏବଂ କ special ଣସି ବିଶେଷ ଉପକରଣ ଆବଶ୍ୟକ ନାହିଁ |

SDA ର ତ୍ରୁଟି:

ଉତ୍ପାଦଗୁଡ଼ିକ ସମାନ ନୁହେଁ, ଏବଂ କେତେକ ଏକକ-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ ଏବଂ ଡବଲ୍-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ ଉତ୍ପାଦ ସବୁବେଳେ SDA ଚକ୍ରରେ ଉତ୍ପାଦିତ ହୁଏ, ଏବଂ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ଦ୍ୱାରା ଚିହ୍ନଟ ହେଲେ ଟେଲିଙ୍ଗ୍ ଅବଶ୍ୟ ଘଟିବ |

Rଓଲିଙ୍ଗ୍ ସର୍କଲ୍ ବିସ୍ତାର

ରୋଲିଂ ସର୍କଲ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ (RCA) ରୋଲ୍ ସର୍କଲ୍ ଦ୍ pat ାରା ପାଥୋଜେନିକ୍ ଜୀବମାନଙ୍କଠାରୁ DNA କପି କରିବାର ପଦ୍ଧତି ଉପରେ ଅଙ୍କନ କରି ପ୍ରସ୍ତାବ ଦିଆଯାଇଛି |ଏହା ସ୍ଥିର ତାପମାତ୍ରାରେ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ଏକକ-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ ସର୍କୁଲାର୍ DNA ର ବ୍ୟବହାର ଏବଂ ଏକ ସ୍ୱତନ୍ତ୍ର DNA ପଲିମେରେଜ୍ (ଯେପରିକି Phi29) ଲକ୍ଷ୍ୟ ଜିନ୍ ର ବିସ୍ତାର ପାଇଁ ରୋଲ୍ ସର୍କଲ୍ DNA ସିନ୍ଥେସିସ୍ କ୍ରିୟା ଅଧୀନରେ |

RCA କୁ ର ar ଖ୍ୟ ବିସ୍ତାର ଏବଂ ସୂକ୍ଷ୍ମ ବିସ୍ତାରରେ ବିଭକ୍ତ କରାଯାଇପାରେ |ର line ଖ୍ୟ RCA ର ଦକ୍ଷତା 10 ରେ ପହଞ୍ଚିପାରେ |⁵ସମୟ, ଏବଂ ସୂକ୍ଷ୍ମ RCA ର କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା 10 ରେ ପହଞ୍ଚିପାରେ |⁹ସମୟ

ସରଳ ପାର୍ଥକ୍ୟ, ନିମ୍ନରେ ଥିବା ଚିତ୍ରରେ ଦେଖାଯାଇଥିବା ପରି, ର line ଖ୍ୟ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ କେବଳ 1 ପ୍ରାଇମର୍ ବ୍ୟବହାର କରେ, ଏକ୍ସପେନ୍ସିନାଲ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ b ରେ 2 ଟି ପ୍ରାଇମର୍ ଅଛି |

ର Line ଖ୍ୟ RCA କୁ ଏକକ ପ୍ରାଇମର୍ RCA ମଧ୍ୟ କୁହାଯାଏ |ଏକ ପ୍ରାଇମର୍ ବୃତ୍ତାକାର DNA ସହିତ ବାନ୍ଧେ ଏବଂ DNA ପଲିମେରେଜ୍ ର କାର୍ଯ୍ୟ ଦ୍ୱାରା ବିସ୍ତାର ହୁଏ |ଉତ୍ପାଦଟି ହେଉଛି ଏକ ର ar ଖ୍ୟ ସିଙ୍ଗଲ୍ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍, ବହୁ ସଂଖ୍ୟକ ପୁନରାବୃତ୍ତି କ୍ରମ ସହିତ ଗୋଟିଏ ଲୁପ୍ ର ଲମ୍ବ ହଜାରେ ଗୁଣ |

ଯେହେତୁ ର line ଖ୍ୟ RCA ର ଉତ୍ପାଦ ସର୍ବଦା ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ପ୍ରାଇମର୍ ସହିତ ସଂଯୁକ୍ତ, ତେଣୁ ସଙ୍କେତର ସହଜ ଫିକ୍ସିଂ ଏକ ପ୍ରମୁଖ ସୁବିଧା |

ଏକ୍ସପେନ୍ସିନାଲ୍ RCA, ଯାହା ହାଇପର ବ୍ରାଞ୍ଚେଡ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ HRCA (Hyper branched RCA) ଭାବରେ ମଧ୍ୟ ଜଣାଶୁଣା, ଏକ ପ୍ରାଇମର୍ RCA ଉତ୍ପାଦକୁ ବ ifies ାଇଥାଏ, ଦ୍ୱିତୀୟ ପ୍ରାଇମର୍ RCA ଉତ୍ପାଦ ସହିତ ହାଇବ୍ରିଡାଇଜ୍ ହୁଏ ଏବଂ ବିସ୍ତାର ହୁଏ, ଏବଂ ପ୍ରତିସ୍ଥାପନ ପୂର୍ବରୁ RCA ଉତ୍ପାଦ ସହିତ ବନ୍ଧା ହୋଇ ରହିଥାଏ, ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପ୍ରାଇମର୍ଗୁଡ଼ିକ ଏକ ଡେଣ୍ଡ୍ରାଇଟିସ୍ RCA ଉତ୍ପାଦନ ଉତ୍ପାଦନ ପାଇଁ ବିସ୍ତାର ଏବଂ ବଦଳକୁ ପୁନରାବୃତ୍ତି କରେ |

ରୋଲ୍ ସର୍କଲ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ବିସ୍ତାରର ସୁବିଧା ଏବଂ ଅସୁବିଧା |

RCA ର ଲାଭ:

ଉଚ୍ଚ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା, ଉତ୍ତମ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଏବଂ ସହଜ କାର୍ଯ୍ୟ |

RCA ର ତ୍ରୁଟି:

ସଙ୍କେତ ଚିହ୍ନଟ ସମୟରେ ପୃଷ୍ଠଭୂମି ସମସ୍ୟା |ଆରସିଏ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟରେ, ଅଣସଂରକ୍ଷିତ ପ୍ୟାଡ୍ ଲକ୍ ପ୍ରୋବ ଏବଂ ଅନ୍-ବାଉଣ୍ଡ ପ୍ରୋବ୍ର ଟେମ୍ପଲେଟ୍ DNA କିମ୍ବା RNA କିଛି ପୃଷ୍ଠଭୂମି ସଙ୍କେତ ସୃଷ୍ଟି କରିପାରେ | 

Nucleicacid କ୍ରମ-ଆଧାରିତ ବିସ୍ତାର |

ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ କ୍ରମ-ଆଧାରିତ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ (NASBA) ହେଉଛି PCR ଆଧାରରେ ବିକଶିତ ଏକ ନୂତନ ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା |ଏହା ଏକ ନିରନ୍ତର ଏବଂ ଆଇସୋଥର୍ମାଲ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଏମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ଏକ T7 ପ୍ରୋମୋଟର୍ କ୍ରମ ସହିତ ଏକ ଯୁଗଳ ପ୍ରାଇମର୍ ଦ୍ୱାରା ପରିଚାଳିତ |ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ପ୍ରାୟ 2 ଘଣ୍ଟା ମଧ୍ୟରେ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ RNA କୁ ପ୍ରାୟ 109 ଥର ବୃଦ୍ଧି କରିପାରିବ, ଯାହା ପାରମ୍ପାରିକ PCR ପଦ୍ଧତିଠାରୁ 1000 ଗୁଣ ଅଧିକ ଏବଂ ବିଶେଷ ଉପକରଣ ଆବଶ୍ୟକ କରେ ନାହିଁ |

ରୋଗ ଦେଖାଯିବା ମାତ୍ରେ ରୋଗର ଶୀଘ୍ର ନିରାକରଣ ପାଇଁ ଏହି ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଛି ଏବଂ ଅନେକ କମ୍ପାନୀ ବର୍ତ୍ତମାନ RNA ଚିହ୍ନଟ କିଟରେ ଏହି ପଦ୍ଧତି ବ୍ୟବହାର କରୁଛନ୍ତି |

ଯଦିଓ RNA ଆମ୍ଲିଫିକେସନ୍ ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ PCR ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ମଧ୍ୟ ବ୍ୟବହାର କରିପାରିବ, NASBA ର ନିଜସ୍ୱ ସୁବିଧା ଅଛି: ଏହା ଅପେକ୍ଷାକୃତ କ୍ରମାଗତ ତାପମାତ୍ରା ଅବସ୍ଥାରେ କରାଯାଇପାରିବ ଏବଂ ଏହା ପାରମ୍ପାରିକ PCR ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ଅପେକ୍ଷା ଅଧିକ ସ୍ଥିର ଏବଂ ସଠିକ୍ |

ପ୍ରତିକ୍ରିୟା 41 ଡିଗ୍ରୀ ସେଲସିୟସରେ ଅଛି ଏବଂ ଏମଭି (ଆଭିଆନ୍ ମାଇଲୋବ୍ଲାଷ୍ଟୋସିସ୍ ଜୀବାଣୁ) ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍, RNase H, T7 RNA ପଲିମେରେଜ୍ ଏବଂ ଏକ ଯୁଗଳ ପ୍ରାଇମର୍ ଆବଶ୍ୟକ କରେ |

ପ୍ରକ୍ରିୟା ମୁଖ୍ୟତ includes ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରେ:

ଫରୱାର୍ଡ ପ୍ରାଇମର୍ T7 ପ୍ରୋମୋଟର୍ ର ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ କ୍ରମ ଧାରଣ କରେ |ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମୟରେ, ଫରୱାର୍ଡ ପ୍ରାଇମର୍ RNA ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡରେ ବାନ୍ଧେ ଏବଂ AMV ଏନଜାଇମ୍ ଦ୍ a ାରା ଏକ DNA-RNA ଡବଲ୍ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ସୃଷ୍ଟି ହୁଏ |

RNase H ହାଇବ୍ରିଡ୍ ଡବଲ୍-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡରେ RNA ହଜମ କରେ ଏବଂ ଏକକ-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ DNA ରଖେ |

ଓଲଟା ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଏମ୍ଭି ଏନଜାଇମର କାର୍ଯ୍ୟ ଅଧୀନରେ, T7 ପ୍ରୋମୋଟର୍ କ୍ରମ ଧାରଣ କରିଥିବା ଏକ DNA ଡବଲ୍ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ ଗଠନ ହୁଏ |

T7 RNA ପଲିମେରେଜ୍ ର କାର୍ଯ୍ୟ ଅଧୀନରେ, ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟା ସମାପ୍ତ ହୁଏ ଏବଂ ବହୁ ପରିମାଣର ଟାର୍ଗେଟ୍ RNA ଉତ୍ପନ୍ନ ହୁଏ |

NASBA ର ଲାଭ:

(1) ଏହାର ପ୍ରାଇମର୍ ରେ T7 ପ୍ରୋମୋଟର୍ କ୍ରମ ଅଛି, କିନ୍ତୁ ବିଦେଶୀ ଡବଲ୍ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡେଡ୍ DNA ର T7 ପ୍ରୋମୋଟର୍ କ୍ରମ ନାହିଁ ଏବଂ ଏହାକୁ ବୃଦ୍ଧି କରାଯାଇପାରିବ ନାହିଁ, ତେଣୁ ଏହି ଟେକ୍ନୋଲୋଜିର ଉଚ୍ଚତା ଏବଂ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ଅଛି |

()) ନାସବା ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ସମୟକୁ ଛୋଟ କରି ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ସିଧାସଳଖ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରେ |

NASBA ର ଅସୁବିଧା:

(1) ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ ଅଧିକ ଜଟିଳ |

()) ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ମୂଲ୍ୟ ଅଧିକ କରିବା ପାଇଁ ତିନି ପ୍ରକାରର ଏନଜାଇମ୍ ଆବଶ୍ୟକ |