PCR, ଏକାଧିକ PCR, PCR ସ୍ଥିତିରେ |, ଓଲଟା PCR |, RT-PCR |, qPCR （1）-PCR

ଆମେ ବିଭିନ୍ନ PCR ର ଧାରଣା, ପଦାଙ୍କ ଏବଂ ବିବରଣୀଗୁଡିକୁ ସଜାଡ଼ିବା |

Ⅰ. PCR

ପଲିମେରେଜ୍ ଚେନ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା, ଯାହାକୁ PCR କୁହାଯାଏ, ଏକ ମଲିକୁଲାର ଜ bi ବ ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା ଯାହା ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ DNA ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକୁ ବ ge ାଇବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |ଏହାକୁ ଭିଟ୍ରୋରେ ଏକ ସ୍ୱତନ୍ତ୍ର DNA ନକଲ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଇପାରେ |ଡିଏନ୍ଏ ପଲିମେରେଜ୍ (DNA ପଲିମେରେଜ୍ I) 1955 ମସିହାରେ ଆବିଷ୍କୃତ ହୋଇଥିଲା ଏବଂ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ମୂଲ୍ୟ ଏବଂ ବ୍ୟବହାରିକତା ଥିବା ଇ କୋଲିର କ୍ଲେନୋ ଫ୍ରାଗମେଣ୍ଟ 1970 ଦଶକ ପୂର୍ବରୁ ଡକ୍ଟର ଏଚ୍ କ୍ଲେନୋଙ୍କ ଦ୍ discovered ାରା ଆବିଷ୍କୃତ ହୋଇଥିଲା, କିନ୍ତୁ ଏହି ଏନଜାଇମ୍ ତାପମାତ୍ରାକୁ ସହ୍ୟ କରୁ ନ ଥିବାରୁ ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରା ଏହାକୁ ଖରାପ କରିପାରେ, ତେଣୁ ଏହା ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରା ଅବକ୍ଷୟ ସହିତ ପଲିମେରେଜ୍ ଶୃଙ୍ଖଳା ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ପୂରଣ କରେ ନାହିଁ।ଆଜି ବ୍ୟବହୃତ ହେଉଥିବା ଏନଜାଇମଗୁଡିକ (ଟାକ ପଲିମେରେଜ୍ କୁହାଯାଏ), ଥର୍ମସ୍ ଆକ୍ୱାଟିକସ୍, 1976 ରେ ଏକ ଗରମ ବସନ୍ତ ଜୀବାଣୁଠାରୁ ପୃଥକ କରାଯାଇଥିଲା। ଏହାର ଚରିତ୍ରଟି ହେଉଛି ଏହା ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରାକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିପାରିବ ଏବଂ ଏହା ଏକ ଆଦର୍ଶ ଏନଜାଇମ୍, କିନ୍ତୁ 1980 ଦଶକ ପରେ ଏହା ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ |PCR ର ମୂଳ ଆଦିମ ପ୍ରୋଟୋଟାଇପ୍ ର ମୂଳ ଧାରଣା ଜିନ୍ ମରାମତି ଏବଂ କପି ସହିତ ସମାନ, ଯାହା 1971 ମସିହାରେ ଡକ୍ଟର କେଜେଲ କ୍ଲେପେଙ୍କ ଦ୍ proposed ାରା ପ୍ରସ୍ତାବ ଦିଆଯାଇଥିଲା। ସେ ପ୍ରଥମ ସରଳ ଏବଂ କ୍ଷୁଦ୍ର-ଜିନ୍ କପି ପ୍ରକାଶ କରିଥିଲେ (PCR ର ପ୍ରଥମ ଦୁଇଟି ଚକ୍ର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପରି)।ଆଜି ବିକଶିତ ହୋଇଥିବା PCR କୁ 1983 ମସିହାରେ ଡକ୍ଟର କରୀ ବି ମଲ୍ଲିକଙ୍କ ଦ୍ developed ାରା ବିକଶିତ କରାଯାଇଥିଲା।ଡକ୍ଟର ମଲ୍ଲିକ ଆନୁଷ୍ଠାନିକ ଭାବରେ 1985 ରେ ସାଇକି ଏବଂ ଅନ୍ୟମାନଙ୍କ ସହ ପ୍ରଥମ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ କାଗଜ ପ୍ରକାଶ କରିଥିଲେ। ସେହି ଦିନଠାରୁ, PCR ର ବ୍ୟବହାର ଦିନକୁ ହଜାରେ ମାଇଲ ଅଟେ, ଏବଂ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ କାଗଜପତ୍ରର ଗୁଣବତ୍ତା ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଗବେଷଣା ପଦ୍ଧତିକୁ ଅପ୍ରୀତିକର ବୋଲି କୁହାଯାଇପାରେ |ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେ, ଜ ological ବିକ ବ scientific ଜ୍ଞାନିକ ଅନୁସନ୍ଧାନ ଏବଂ କ୍ଲିନିକାଲ୍ ପ୍ରୟୋଗରେ PCR ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ବହୁଳ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ, ଯାହା ମଲିକୁଲାର ଜୀବବିଜ୍ଞାନ ଅନୁସନ୍ଧାନର ସବୁଠାରୁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ପ୍ରଯୁକ୍ତିବିଦ୍ୟା ହୋଇଯାଏ |1993 ମସିହାରେ ରସାୟନ ବିଜ୍ଞାନରେ ନୋବେଲ ପୁରସ୍କାର ମଧ୍ୟ ପାଇଥିଲେ।

PCRନୀତି

PCR ଟେକ୍ନୋଲୋଜିର ମ basic ଳିକ ନୀତି DNA ର ପ୍ରାକୃତିକ ନକଲ ପ୍ରକ୍ରିୟା ସହିତ ସମାନ, ଏବଂ ଏହାର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଅଲିଗ୍ନୁକ୍ଲାଏଟାଇଡ୍ ପ୍ରାଇମର୍ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ ଯାହା ଲକ୍ଷ୍ୟ କ୍ରମର ଉଭୟ ମୁଣ୍ଡରେ ପରିପୂର୍ଣ୍ଣ |PCR ଡିଜେରେସନ୍-ଆନ୍ଲିଙ୍ଗ୍-ବିସ୍ତାରିତ ତିନୋଟି ମ basic ଳିକ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପଦକ୍ଷେପକୁ ନେଇ ଗଠିତ: ଟେମ୍ପଲେଟ୍ DNA ର ଡିଜେରେସନ୍: ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ସମୟ ପାଇଁ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ DNA ପ୍ରାୟ 93 ° C ଗରମ ହେବା ପରେ, ଟେମ୍ପଲେଟ୍ DNA ଛାଡିବା ଦ୍ PCR ାରା ଡୁଆଲ୍ ଚେନ୍ DNA ପାଇଁ ଦ୍ୱ ual ତ DNA ସମାଧାନ, ଏହାକୁ ଏକ ଶୃଙ୍ଖଳ ଭାବରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଇପାରିବ ଯାହା ଦ୍ the ାରା ପରବର୍ତ୍ତୀ ରାଉଣ୍ଡ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପାଇଁ ପ୍ରସ୍ତୁତ ହୋଇପାରିବ |ଟେମ୍ପଲେଟ୍ DNA ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ର ଆନ୍ଲିଙ୍ଗ୍ (ଯ ound ଗିକ): ଟେମ୍ପଲେଟ୍ DNA ଗରମ ହୋଇ ଗୋଟିଏ ଶୃଙ୍ଖଳରେ ଅବକ୍ଷୟ ହେବା ପରେ ତାପମାତ୍ରା ପ୍ରାୟ 55 ° C କୁ ଖସିଯାଏ |ପ୍ରାଇମରର ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ କ୍ରମ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ DNA ସିଙ୍ଗଲ୍ ଚେନ୍ |Prim ପ୍ରାଇମରର ବିସ୍ତାର: DNA ଟେମ୍ପଲେଟ୍-ପ୍ରାଇମର୍ ବାଇଣ୍ଡିଂ TaqDNA ପଲିମେରେଜ୍ ର କାର୍ଯ୍ୟ ଉପରେ ଆଧାରିତ, ପ୍ରତିକ୍ରିୟା କଞ୍ଚାମାଲ ଭାବରେ dNTP ସହିତ |ନକଲର ସିଦ୍ଧାନ୍ତ ରଖ, ଏକ ନୂତନ ଅର୍ଦ୍ଧ-ସଂରକ୍ଷିତ କପି ଶୃଙ୍ଖଳାକୁ ସିନ୍ଥାଇଜ୍ କର, ଯାହା ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଡିଏନ୍ଏ ଶୃଙ୍ଖଳାକୁ ପୂର୍ଣ୍ଣ କରେ, ଏବଂ ପୁନରାବୃତ୍ତି ଚକ୍ର ଡିଜେରେସନ୍-ଆନ୍ଲିଙ୍ଗ୍-ଏକ୍ସଟେନ୍ସନ୍ ତିନୋଟି ପ୍ରକ୍ରିୟା ଅଧିକ “ଅର୍ଦ୍ଧ-ସଂରକ୍ଷିତ କପି ଶୃଙ୍ଖଳା” ପାଇପାରିବ, ଏବଂ ଏହି ନୂତନ ଶୃଙ୍ଖଳା ପୁନର୍ବାର ଉପଲବ୍ଧ ହେବ ପରବର୍ତ୍ତୀ ଚକ୍ର ପାଇଁ ଏକ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ହୁଅ |ଲୁପ୍ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ କରିବାକୁ 2-4 ମିନିଟ୍ ସମୟ ଲାଗେ, 2-3 ଘଣ୍ଟା ମଧ୍ୟରେ ଟାର୍ଗେଟ୍ ଜିନ୍ ଅନେକ ମିଲିୟନ୍ ଥର ବୃଦ୍ଧି କରାଯାଇପାରିବ |

ମାନକPCRପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସିଷ୍ଟମ୍ |

PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ପାଞ୍ଚଟି ଉପାଦାନ |

PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ମୁଖ୍ୟତ five ପାଞ୍ଚ ପ୍ରକାରର ପଦାର୍ଥ ଜଡିତ, ଯଥା ପ୍ରାଇମର୍, ଏନଜାଇମ୍, dNTP, ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଏବଂ ବଫର୍ (Mg2 + ଆବଶ୍ୟକ) |[PCR ପ୍ରଣାଳୀ]

ମାନକ PCR ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ତିନୋଟି ସୋପାନରେ ବିଭକ୍ତ କରାଯାଇଛି |

1. ଡିଏନ୍ଏ ଡିଜେରେସନ୍ (90 ° C-96 ° C): ଥର୍ମାଲ୍ ଆକ୍ସନ୍ ଅନ୍ତର୍ଗତ ଡୁଆଲ୍ ଚେନ୍ ଡିଏନ୍ଏ ଟେମ୍ପଲେଟ୍, ହାଇଡ୍ରୋଜେନ୍ ବଣ୍ଡ ଭାଙ୍ଗି ଏକ ଚେନ୍ DNA ଗଠନ କରେ |

2. ଆନ୍ଲିଙ୍ଗ୍ (25 ℃ -65 ℃): ସିଷ୍ଟମ୍ ତାପମାତ୍ରା ହ୍ରାସ ହୁଏ, ପ୍ରାଇମର୍ DNA ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ସହିତ ମିଳିତ ହୋଇ ଏକ ସ୍ଥାନୀୟ ଡୁଆଲ୍ ଚେନ୍ ଗଠନ କରେ |

3. ବିସ୍ତାର (70 ℃ -75 ℃): ଟ୍ୟାକ୍ ଏନଜାଇମ୍ (ପ୍ରାୟ 72 ° C, ସର୍ବୋତ୍ତମ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ) ଅଧୀନରେ, dNTP କଞ୍ଚାମାଲ ଭାବରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ, ପ୍ରାଇମର 5 ′ ଶେଷରୁ ′ 3 ′ ଶେଷ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ, ସିନ୍ଥେସିସ୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପରସ୍ପରର DNA ଶୃଙ୍ଖଳାକୁ ପରିପୂର୍ଣ୍ଣ କରେ |

ପ୍ରତ୍ୟେକ ଚକ୍ରକୁ ଡିଏନ୍ଏ ବିଷୟବସ୍ତୁକୁ ଦ୍ୱିଗୁଣିତ କରି ସଂଲଗ୍ନ, ସଂଲଗ୍ନ ଏବଂ ବିସ୍ତାର କରାଯାଇଛି |ବର୍ତ୍ତମାନ, କ୍ଷୁଦ୍ର ବିସ୍ତାର କ୍ଷେତ୍ର ହେତୁ, କିଛି PCR ଖୁବ୍ କମ୍ ସମୟ ମଧ୍ୟରେ ନକଲ କରାଯାଇପାରେ ଯଦିଓ ଟ୍ୟାକ୍ ଏନଜାଇମ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ସର୍ବୋତ୍ତମ ନୁହେଁ, ତେଣୁ ଏହାକୁ ଦୁଇଟି ସୋପାନରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରାଯାଇପାରିବ, ଅର୍ଥାତ୍ ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ଏବଂ ବିସ୍ତାର ଏକ ସମୟରେ 60 ° C-65 ° C ରେ କରାଯାଇପାରିବ |ଉଠାଇବା ଏବଂ ଥଣ୍ଡା କରିବା ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ହ୍ରାସ କରିବା ଏବଂ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବେଗକୁ ଉନ୍ନତ କରିବା ପାଇଁ |

PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବ features ଶିଷ୍ଟ୍ୟଗୁଡିକ |

● ଉଚ୍ଚ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା |

PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ନିର୍ଣ୍ଣାୟକ କାରଣଗୁଡ଼ିକ ହେଉଛି: prim ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ DNA ର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ମିଶ୍ରଣ |Base ବେସ୍ ଯୋଡିବାର ନୀତି |TaqDNA ପଲିମେରେଜ୍ ସିନ୍ଥେସିସ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ବିଶ୍ୱସ୍ତତା |ଟାର୍ଗେଟ୍ ଜିନ୍ ର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଏବଂ ରକ୍ଷଣଶୀଳତା |

ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟଗୁଡିକର ସଠିକ୍ ମିଶ୍ରଣ ହେଉଛି ଚାବି |ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ର ବାନ୍ଧିବା ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଚେନର ବିସ୍ତାର କ୍ଷାରୀୟ ବେସ୍ ମେଳକ ନୀତି ଉପରେ ଆଧାରିତ |ପଲିମେରେଜ୍ ସିନ୍ଥେସିସ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ବିଶ୍ୱସ୍ତତା ଏବଂ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ର ବାନ୍ଧିବା (ଯ ound ଗିକ) କରିବା ପାଇଁ Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ ର ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରା ପ୍ରତିରୋଧ ଏକ ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରାରେ କରାଯାଇପାରିବ |ମିଶ୍ରଣର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ବହୁଗୁଣିତ |କ୍ଲିପ୍ ଏକ ଉଚ୍ଚତର ସଠିକତା ବଜାୟ ରଖିପାରେ |ଉଚ୍ଚ ରକ୍ଷଣଶୀଳତା ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ରକ୍ଷଣଶୀଳତା ସହିତ ଏକ ଲକ୍ଷ୍ୟସ୍ଥଳ ଜେନେଟିକ୍ ଅଞ୍ଚଳ ଚୟନ କରି ଏହାର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଅଧିକ |

● ଉଚ୍ଚ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା |

PCR ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକର ଉତ୍ପାଦନ ପରିମାଣ ସୂଚକାଙ୍କ ଦ୍ increased ାରା ବୃଦ୍ଧି ପାଇଥାଏ, ଯାହା ମାଇକ୍ରୋକଣ୍ଟ୍ରୋଲର ସ୍ତରକୁ ମାଇକ୍ରୋଗ୍ରାମ୍ (μg = -6) ସ୍ତରକୁ ବୃଦ୍ଧି କରିବାକୁ ପିକର୍ (PG = 10-12) ର ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ବିସ୍ତାର କରିପାରିବ |1 ଲକ୍ଷ କୋଷରୁ ଏକ ଲକ୍ଷ୍ୟ କୋଷ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଇପାରେ;ଜୀବାଣୁ ଚିହ୍ନଟ କରିବାରେ, PCR ର ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା 3 RFU (ଖାଲି ଦାଗ ଗଠନ ୟୁନିଟ୍) ରେ ପହଞ୍ଚିପାରେ |ଜୀବାଣୁ ବିଜ୍ଞାନରେ ସର୍ବନିମ୍ନ ଚିହ୍ନଟ ହାର ହେଉଛି 3 ଜୀବାଣୁ |

● ସରଳ ଏବଂ ଦ୍ରୁତ

PCR ପ୍ରତିଫଳନ ଏକ ଉଚ୍ଚ-ତାପମାତ୍ରା Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ ବ୍ୟବହାର କରେ, ଯାହା ଏକ ସମୟରେ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସମାଧାନ ଯୋଗ କରିଥାଏ, ଅର୍ଥାତ୍ DNA ବିସ୍ତାର ସମାଧାନ ଏବଂ ଜଳ ସ୍ନାନ ପାତ୍ରରେ ଏକ ଡିଜେରେସନ୍-ଆନ୍ନାଲ୍-ଏକ୍ସଟେନ୍ସନ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା |ସାଧାରଣତ ,, ବର୍ଦ୍ଧିତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା 2 ରୁ 4 ଘଣ୍ଟା ମଧ୍ୟରେ ସମାପ୍ତ ହୁଏ |ବର୍ଦ୍ଧିତ ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକ ସାଧାରଣତ electrical ବ electrical ଦୁତିକ ଖଣ୍ଡା ଦ୍ୱାରା ବିଶ୍ଳେଷଣ କରାଯାଇଥାଏ, ଏବଂ ଆଇସୋଟୋପ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ପଡିବ ନାହିଁ, କ radio ଣସି ରେଡିଓଆକ୍ଟିଭ୍ ପ୍ରଦୂଷଣ ଏବଂ ସହଜ ପଦୋନ୍ନତି |

Spec ନମୁନାର ଶୁଦ୍ଧତା କମ୍ ଅଟେ |

ଜୀବାଣୁ କିମ୍ବା ଜୀବାଣୁ ଏବଂ ସଂସ୍କୃତି କୋଷକୁ ପୃଥକ କରିବାର କ is ଣସି ଆବଶ୍ୟକତା ନାହିଁ |ଡିଏନ୍ଏ ଅଶୋଧିତ ଦ୍ରବ୍ୟ ଏବଂ RNA କୁ ଏମ୍ପ୍ଲାଇଫର୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ |ରକ୍ତ, ଶରୀରର ତରଳ ପଦାର୍ଥ, କାଶ ଧୋଇବା ତରଳ ପଦାର୍ଥ, କେଶ, କୋଷ ଏବଂ ଜୀବନ୍ତ ଟିସୁ ପରି କ୍ଲିନିକାଲ୍ ନମୁନା ବ୍ୟବହାର କରି ଡିଏନ୍ଏ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ଚିହ୍ନଟକୁ ସିଧାସଳଖ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ |

PCRସାଧାରଣ ସମସ୍ୟା |

● ମିଥ୍ୟା ନକାରାତ୍ମକ, କ pl ଣସି ବର୍ଦ୍ଧିତ ବ୍ୟାଣ୍ଡ ନାହିଁ |

PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ମୁଖ୍ୟ ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ: templ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତି, ② ଗୁଣ ଏବଂ ପ୍ରାଥମିକତାର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା, en ଏନଜାଇମର ଗୁଣ ④ PCR ଚକ୍ର ଅବସ୍ଥା |ଏହାର କାରଣ ଖୋଜିବା ମଧ୍ୟ ଉପରୋକ୍ତ ଲିଙ୍କଗୁଡ଼ିକ ପାଇଁ ବିଶ୍ଳେଷଣ ଏବଂ ଅଧ୍ୟୟନ କରାଯିବା ଉଚିତ୍ |

ଟେମ୍ପଲେଟଗୁଡିକ: template ଟେମ୍ପଲେଟରେ ବିଭିନ୍ନ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଥାଏ, template ଟେମ୍ପଲେଟରେ ଏକ ଟ୍ୟାକ୍ ଏନଜାଇମ୍ ଇନହିବିଟର ଥାଏ, the ଟେମ୍ପଲେଟରେ ଥିବା ପ୍ରୋଟିନ୍ ବିଲୋପ ହୁଏ ନାହିଁ, ବିଶେଷତ the କ୍ରୋମୋଜୋମରେ ଥିବା ଗ୍ରୁପ୍ ପ୍ରୋଟିନ୍ |⑤ ଡେମିନର୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଡିଜେରେସନ୍ ପୁଙ୍ଖାନୁପୁଙ୍ଖ ନୁହେଁ |ଯେତେବେଳେ ଏନଜାଇମ୍ ଏବଂ ପ୍ରାଇମରର ଗୁଣ ଭଲ, ସେଠାରେ କ pl ଣସି ବର୍ଦ୍ଧିତ ବ୍ୟାଣ୍ଡ ନାହିଁ, ଯାହା ନମୁନାଗୁଡିକର ହଜମ ପ୍ରକ୍ରିୟା |ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ନିଷ୍କାସନ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ କିଛି ଭୁଲ୍ ଅଛି, ତେଣୁ ଏକ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଏବଂ ସ୍ଥିର ହଜମ ପ୍ରକ୍ରିୟା ପ୍ରସ୍ତୁତ କରିବାକୁ ଏହାର ପ୍ରକ୍ରିୟା ସ୍ଥିର କରାଯିବା ଉଚିତ ଏବଂ ଇଚ୍ଛାଧୀନ ଭାବରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରାଯିବା ଉଚିତ୍ ନୁହେଁ |

ଏନଜାଇମ୍ ନିଷ୍କ୍ରିୟକରଣ: ଏକ ନୂତନ ଏନଜାଇମ୍ କିମ୍ବା ଉଭୟ ପୁରୁଣା ଏବଂ ନୂତନ ଏନଜାଇମ୍ ଏକତ୍ର ବ୍ୟବହୃତ ହେବା ଉଚିତ ଯାହା ବିଶ୍ଳେଷଣ କରିବା ପାଇଁ ଏନଜାଇମ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ହଜିଯାଇଛି କିମ୍ବା ପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ ନୁହେଁ, ଯାହା ମିଥ୍ୟା ନକାରାତ୍ମକ କାରଣ ହୋଇଥାଏ |ଏହା ମନେ ରଖିବା ଉଚିତ୍ ଯେ ଟ୍ୟାକ୍ ଏନଜାଇମ୍ କିମ୍ବା ଇଥିଡିୟମ୍ ବ୍ରୋମାଇଡ୍ ବେଳେବେଳେ ଭୁଲିଯାଏ |

ପ୍ରାଥମିକ: ପ୍ରାଥମିକ ଗୁଣ, ପ୍ରାଥମିକର ଏକାଗ୍ରତା, ଏବଂ ଦୁଇଟି ପ୍ରାଥମିକର ଏକାଗ୍ରତା ସମୃଦ୍ଧ କି ନୁହେଁ |PCR ବିଫଳତା ପାଇଁ ଏହା ଏକ ସାଧାରଣ କାରଣ କିମ୍ବା ବ band ୁଥିବା ବ୍ୟାଣ୍ଡ ଆଦର୍ଶ ନୁହେଁ ଏବଂ ବିସ୍ତାର ହେବାର ପ୍ରବୃତ୍ତି |କିଛି ବ୍ୟାଚ୍ ନମ୍ବରର ପ୍ରାଥମିକ ଗୁଣରେ ସମସ୍ୟା ଅଛି |ଦୁଇଟି ପ୍ରାଇମର୍ରେ ଅଧିକ ଏକାଗ୍ରତା ଏବଂ କମ୍ ଏକାଗ୍ରତା ରହିଥାଏ, ଯାହା ନିମ୍ନ-ଅସୀମତା ଅସୀମେଟ୍ରିକ୍ ବିସ୍ତାର କରିଥାଏ |ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକ ହେଉଛି: units ୟୁନିଟ୍ ସିନ୍ଥାଇଜ୍ କରିବା ପାଇଁ ଏକ ଭଲ ପ୍ରାଇମର୍ ଚୟନ କରନ୍ତୁ |Prim ପ୍ରାଇମରର ଏକାଗ୍ରତା କେବଳ OD ମୂଲ୍ୟ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ ନାହିଁ, ବରଂ ଅଗର ଚିନି ଜେଲ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ତିଆରି କରିବା ପାଇଁ ପ୍ରାଇମରର ମୂଳ ତରଳ ଉପରେ ମଧ୍ୟ ଧ୍ୟାନ ଦେଇଥାଏ |ସେଠାରେ ଏକ ପ୍ରାଇମର୍ ଷ୍ଟ୍ରିପ୍ ଜୋନ୍ ରହିବା ଆବଶ୍ୟକ, ଏବଂ ଦୁଇଟି ପ୍ରାଇମରର ଉଜ୍ଜ୍ୱଳତା ସାଧାରଣତ consist ସ୍ଥିର ହେବା ଉଚିତ |ବେଲ୍ଟ, PCR ଏହି ସମୟରେ ବିଫଳ ହୋଇପାରେ, ଏବଂ ଏହାକୁ ପ୍ରାଥମିକ ସିନ୍ଥେସିସ୍ ୟୁନିଟ୍ ସହିତ ସମାଧାନ କରାଯିବା ଉଚିତ |ଯଦି ଏକ ପ୍ରାଇମର୍ ଅଧିକ, ଉଜ୍ଜ୍ୱଳତା କମ୍, ଏବଂ ମିଶ୍ରିତ ହେଲେ ଏହାର ଏକାଗ୍ରତା ସନ୍ତୁଳିତ ହେବା ଆବଶ୍ୟକ |Multiple ଫ୍ରିଜରର ଏକାଧିକ ଫ୍ରିଜ୍ କିମ୍ବା ଲମ୍ବା-ଟର୍ମ ରେଫ୍ରିଜରେଜେସନ୍ ଅଂଶକୁ ରୋକିବା ପାଇଁ ପ୍ରାଇମର୍ କୁ ଅଧିକ ଏକାଗ୍ରତାରେ ସଂରକ୍ଷଣ କରାଯିବା ଉଚିତ, ଯାହା ପ୍ରାଇମର୍ ଖରାପ ଏବଂ ଅବନତି ଘଟାଇବ |Prim ପ୍ରାଇମରର ଡିଜାଇନ୍ ଅଯ able କ୍ତିକ, ଯେପରିକି ପ୍ରାଇମରର ଦ length ର୍ଘ୍ୟ ପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ ନୁହେଁ, ଏବଂ ପ୍ରାଥମିକତା ମଧ୍ୟରେ ଡି କ୍ଲଷ୍ଟର ସୃଷ୍ଟି ହୁଏ |

Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା: Mg2 + ଆୟନର ଏକାଗ୍ରତା PCR ବିସ୍ତାର ଦକ୍ଷତା ଉପରେ ବହୁତ ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ |ଅତ୍ୟଧିକ ଏକାଗ୍ରତା PCR ବିସ୍ତାରର ବିପରୀତ ଲିଙ୍ଗକୁ ହ୍ରାସ କରିପାରେ |ଯଦି ଏକାଗ୍ରତା ଅତ୍ୟଧିକ କମ୍, PCR ବିସ୍ତାରଣ ଆଉଟପୁଟ୍ ବିସ୍ତାର ବ୍ୟାଣ୍ଡ ବିନା PCR ବିସ୍ତାର ବିଫଳତା ମଧ୍ୟ କରିବ |

ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଭଲ୍ୟୁମର ପରିବର୍ତ୍ତନ: PCR ବିସ୍ତାରରେ ବ୍ୟବହୃତ ଭଲ୍ୟୁମ୍ ହେଉଛି 20ul, 30ul, ଏବଂ 50ul କିମ୍ବା 100uL, PCR ବିସ୍ତାର ପାଇଁ ପ୍ରୟୋଗର ବୃହତ ପରିମାଣ ବ scientific ଜ୍ଞାନିକ ଅନୁସନ୍ଧାନ ଏବଂ କ୍ଲିନିକାଲ୍ ପରୀକ୍ଷଣର ବିଭିନ୍ନ ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ଅନୁଯାୟୀ ସେଟ୍ ହୋଇଛି |20ul ପରି ଛୋଟ ଭଲ୍ୟୁମ୍ ତିଆରି କରିବା ପରେ, ଆକାର ତିଆରି କରିବା ସମୟରେ ଏକ କର୍ଡ କଣ୍ଡିସନ୍ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ, ନଚେତ୍ ଏହା ବିଫଳ ହେବ |

ଶାରୀରିକ କାରଣ: PCR ବିସ୍ତାର ପାଇଁ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଅତ୍ୟନ୍ତ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ |ଯଦି ଅବନତିର ତାପମାତ୍ରା କମ୍, ଅବକ୍ଷୟ ସମୟ ସ୍ୱଳ୍ପ, ଏହା ମିଥ୍ୟା ନକାରାତ୍ମକରେ ଘଟିବାର ସମ୍ଭାବନା ଅଛି;ଅତ୍ୟଧିକ କମ୍ ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରା ଅଣ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବର୍ଦ୍ଧନ ସୃଷ୍ଟି କରିପାରେ ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବର୍ଦ୍ଧନ ଦକ୍ଷତା ହ୍ରାସ କରିପାରେ |PCR ବର୍ଦ୍ଧିତ ଦକ୍ଷତା ହ୍ରାସ କରିବାକୁ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟର ମିଶ୍ରଣକୁ ଅଧିକ ପ୍ରଭାବିତ କରେ |ବେଳେବେଳେ ପରିବର୍ତ୍ତନ କିମ୍ବା ଜଳ-ଦ୍ରବଣୀୟ କୁକରରେ ପରିବର୍ତ୍ତନଶୀଳତା, ଆନ୍ଲିଙ୍ଗ୍ ଏବଂ ବର୍ଦ୍ଧିତ ତାପମାତ୍ରା ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ ମାନକ ଥର୍ମୋମିଟର ବ୍ୟବହାର କରିବା ଆବଶ୍ୟକ, ଯାହା PCR ବିଫଳ ହେବାର ଅନ୍ୟତମ କାରଣ |

ଟାର୍ଗେଟ୍ କ୍ରମର ପ୍ରକାରଗୁଡିକ: ଯଦି ଟାର୍ଗେଟ୍ କ୍ରମ ଘଟେ, ଏକ ପରିବର୍ତ୍ତନ କିମ୍ବା ବିଲୋପ, ପ୍ରୋଟୋଟାଇପ୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟର ମିଶ୍ରଣ ମିଳିତ ହୁଏ, କିମ୍ବା ଟାର୍ଗେଟ୍ କ୍ରମର ଅଭାବ ହେତୁ, ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ସଂପୃକ୍ତ କ୍ରମ ହରାଇବ, ଏବଂ ଏହାର PCR ବିସ୍ତାର ସଫଳ ହେବ ନାହିଁ |

ମିଥ୍ୟା ପଜିଟିଭ୍ |

PCR ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ବ୍ୟାଣ୍ଡ ଟାର୍ଗେଟ୍ କ୍ରମ ବ୍ୟାଣ୍ଡ ସହିତ ସୁସଙ୍ଗତ ଦେଖାଯାଏ, ଏବଂ ବେଳେବେଳେ ଏହାର ବ୍ୟାଣ୍ଡ ଅଧିକ ସଫା ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ହୋଇଥାଏ |

ପ୍ରାଥମିକ ଡିଜାଇନ୍ ଉପଯୁକ୍ତ ନୁହେଁ: ମନୋନୀତ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ କ୍ରମ ଏବଂ ଅଣ-ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ କ୍ରମର ହୋମୋଲୋଜି ଥାଏ, ତେଣୁ ଯେତେବେଳେ PCR ଆମ୍ଲିଫିକେସନ୍, ବର୍ଦ୍ଧିତ PCR ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକ ଅଣ-ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟମୂଳକ କ୍ରମ |ଟାର୍ଗେଟ୍ କ୍ରମ ବହୁତ ଛୋଟ କିମ୍ବା ପ୍ରାଇମର୍ ବହୁତ ଛୋଟ, ଏବଂ ଏହା ମିଥ୍ୟା ପଜିଟିଭ୍ ପ୍ରବଣ |ପୁନ es ଡିଜାଇନ୍ ହେବା ଆବଶ୍ୟକ |

ଲକ୍ଷ୍ୟ କ୍ରମ କିମ୍ବା ବର୍ଦ୍ଧିତ ଦ୍ରବ୍ୟର କ୍ରସ୍ ପ୍ରଦୂଷଣ: ଏହି ପ୍ରଦୂଷଣର ଦୁଇଟି କାରଣ ଅଛି: ପ୍ରଥମ, ସମଗ୍ର ଜିନୋମ କିମ୍ବା ବୃହତ ବିଭାଗର କ୍ରସ୍-ପ୍ରଦୂଷଣ, ଯାହା ମିଥ୍ୟା ପଜିଟିଭ୍ ଆଡକୁ ଗତି କରେ |ନିମ୍ନଲିଖିତ ପଦ୍ଧତି ଦ୍ This ାରା ଏହି ପ୍ରକାରର ମିଥ୍ୟା ପଜିଟିଭ୍ ସମାଧାନ ହୋଇପାରିବ: ଟାର୍ଗେଟ୍ କ୍ରମକୁ ନମୁନା ବନ୍ଧୁକରେ ନିଶ୍ୱାସ ନେବାକୁ କିମ୍ବା ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗୁଲ୍ ଟ୍ୟୁବ୍ ଭିତରୁ ସ୍ପ୍ଲାସ୍ ନହେବା ପାଇଁ କାର୍ଯ୍ୟ ସମୟରେ ସାବଧାନ ଏବଂ ଭଦ୍ର ହୁଅନ୍ତୁ |ଏନଜାଇମ୍ ଏବଂ ପଦାର୍ଥ ବ୍ୟତୀତ ଯାହା ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରାକୁ ସହ୍ୟ କରିପାରିବ ନାହିଁ, ସମସ୍ତ ରେଜେଣ୍ଟ୍ କିମ୍ବା ଯନ୍ତ୍ରପାତି ଉଚ୍ଚ ଚାପରେ ଡିଜେନ୍ସିଫ୍ ହେବା ଉଚିତ୍ |ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗୁଲ୍ ପାଇପ୍ ଏବଂ ନମୁନା ଏକ ସମୟରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯିବା ଉଚିତ୍ |ଯେତେବେଳେ ଆବଶ୍ୟକ ହୁଏ, ନମୁନା ଯୋଡିବା ପୂର୍ବରୁ, ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଶୀଳ ଟ୍ୟୁବ୍ ଏବଂ ରିଜେଣ୍ଟ୍ ଅଲ୍ଟ୍ରା-ବାଇଗଣି ରଶ୍ମିରେ ବିଦ୍ୟମାନ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ନଷ୍ଟ କରିଥାଏ |ଦ୍ୱିତୀୟ, ବାୟୁ ପ୍ରଦୂଷଣରେ ଛୋଟ ଖଣ୍ଡ |ଏହି ଛୋଟ ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକ ଲକ୍ଷ୍ୟ କ୍ରମଠାରୁ ଛୋଟ, କିନ୍ତୁ ସେମାନଙ୍କର କିଛି ହୋମୋଲୋଜି ଅଛି |ଏହାକୁ ପରସ୍ପର ସହିତ ବିଭକ୍ତ କରାଯାଇପାରେ |ପ୍ରାଥମିକଗୁଡିକ ପୂର୍ଣ୍ଣ କରିବା ପରେ, PCR ଉତ୍ପାଦକୁ ବିସ୍ତାର କରାଯାଇପାରିବ, ଯାହା ମିଥ୍ୟା ସକରାତ୍ମକ ଉତ୍ପାଦନ ସୃଷ୍ଟି କରିବ |ଏହା ନାଳ PCR ପଦ୍ଧତିକୁ ହ୍ରାସ କିମ୍ବା ବିଲୋପ କରିବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରେ |

N ଅଜ୍ଞାତ ବର୍ଦ୍ଧନ ବ୍ୟାଣ୍ଡ ଦେଖାନ୍ତୁ |

PCR ବିସ୍ତାର ପରେ ଦେଖାଯାଉଥିବା ବ୍ୟାଣ୍ଡଗୁଡିକ ଆଶା କରାଯାଉଥିବା ଆକାର, କିମ୍ବା ବଡ଼ କିମ୍ବା ଛୋଟ, କିମ୍ବା ସେହି ସମୟରେ, କିମ୍ବା ସେହି ସମୟରେ, ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ବ୍ୟାଣ୍ଡ ଏବଂ ଅଣ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବର୍ଦ୍ଧନ ବ୍ୟାଣ୍ଡ ସହିତ ଅସଙ୍ଗତ |ଅଣ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବ୍ୟାଣ୍ଡର ଆବିର୍ଭାବ ହେଉଛି: ପ୍ରଥମେ, ପ୍ରାଇମର୍ଗୁଡ଼ିକ ଲକ୍ଷ୍ୟ କ୍ରମରେ ଅସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ସଂପନ୍ନ, କିମ୍ବା ଏକ କ୍ଲଷ୍ଟର ଗଠନ ପାଇଁ ପ୍ରାଇମରର ପଲିମେରାଇଜେସନ୍ |ଦ୍ୱିତୀୟଟି ହେଉଛି MG2 + ଆୟନର ଏକାଗ୍ରତା ଅତ୍ୟଧିକ ଅଧିକ, ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରା ବହୁତ କମ୍, ଏବଂ PCR ଚକ୍ର ସଂଖ୍ୟା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ |ଦ୍ୱିତୀୟତ ,, ଏନଜାଇମର ଗୁଣ ଏବଂ ପରିମାଣ |ପ୍ରାୟତ ,, କେତେକ ଉତ୍ସର ଏନଜାଇମ୍ ଅଣ-ସ୍ୱତନ୍ତ୍ର ବ୍ୟାଣ୍ଡରେ ପ୍ରବୃତ୍ତ ହୁଏ ଏବଂ ଅନ୍ୟ ଉତ୍ସର ଏନଜାଇମ୍ ହୁଏ ନାହିଁ |ବେଳେବେଳେ ଏନଜାଇମର ଅଣ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବିସ୍ତାର ମଧ୍ୟ ହୁଏ |ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକ ହେଉଛି: ଆବଶ୍ୟକ ହେଲେ ପୁନ-ଡିଜାଇନ୍ ଆକର୍ଷଣୀୟ |ଏନଜାଇମର ପରିମାଣ ହ୍ରାସ କରନ୍ତୁ କିମ୍ବା ଅନ୍ୟ ଉତ୍ସର ଏନଜାଇମକୁ ବଦଳାନ୍ତୁ |ପ୍ରାଥମିକ ପରିମାଣ ହ୍ରାସ କର, ଟେମ୍ପଲେଟର ପରିମାଣକୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ବୃଦ୍ଧି କର ଏବଂ ଚକ୍ର ସଂଖ୍ୟା ହ୍ରାସ କର |ସଠିକ୍ ଭାବରେ ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରା ବ increase ାନ୍ତୁ କିମ୍ବା ଦୁଇଟି ତାପମାତ୍ରା ପଏଣ୍ଟ୍ ପଦ୍ଧତି ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ (93 ° C ଡିଜେରେସନ୍, ଆନ୍ଲିଙ୍ଗ୍ ଏବଂ ପ୍ରାୟ 65 ° C ରେ ବିସ୍ତାର) |

Fl ଫ୍ଲେକି ଟା କିମ୍ବା ସ୍ମାର୍ ଟେପ୍ ଦେଖ |

PCR ବିସ୍ତାରଣ ବେଳେବେଳେ ପ୍ରୟୋଗ କିମ୍ବା ଶେଲ୍ଡ କିମ୍ବା କାର୍ପେଟ୍ ପରି ବେଲ୍ଟ ପରି ଦେଖାଯାଏ |ଏହି କାରଣରୁ, ଅତ୍ୟଧିକ ପରିମାଣର ଏନଜାଇମ୍ କିମ୍ବା ଏନଜାଇମର ଖରାପ ଗୁଣ ହେତୁ, DNTP ଏକାଗ୍ରତା ଅତ୍ୟଧିକ, Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ଅତ୍ୟଧିକ, ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରା ଅତ୍ୟଧିକ କମ୍ ଏବଂ ଚକ୍ର ସଂଖ୍ୟା ବହୁତ ଅଧିକ |ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକ ହେଉଛି: en ଏନଜାଇମର ପରିମାଣ ହ୍ରାସ କରନ୍ତୁ, କିମ୍ବା ଅନ୍ୟ ଉତ୍ସର ଏନଜାଇମକୁ ପରିବର୍ତ୍ତନ କରନ୍ତୁ |DNTP ର ଏକାଗ୍ରତା ହ୍ରାସ କରନ୍ତୁ - Mg2 + ଏକାଗ୍ରତାକୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ହ୍ରାସ କରନ୍ତୁ |ଟେମ୍ପଲେଟର ପରିମାଣ ବ and ାନ୍ତୁ ଏବଂ ଚକ୍ର ସଂଖ୍ୟା ହ୍ରାସ କରନ୍ତୁ |

ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକ |

PCR ହିରୋ (ରଙ୍ଗ ସହିତ)

◮ ଉଚ୍ଚ ବିଶ୍ୱସ୍ତତା: ସାଧାରଣ ଟାକ ଏନଜାଇମର times ଗୁଣ;

Aster ତୀବ୍ର ବୃଦ୍ଧି

◮ ଅଧିକ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଆଡାପ୍ଟାବିଲିଟି |

◮ ଉଚ୍ଚ ସଶକ୍ତିକରଣ ଦକ୍ଷତା |

◮ ପରିବେଶ ସହନଶୀଳତା ଅଧିକ ଶକ୍ତିଶାଳୀ: ଏକ ସପ୍ତାହ ପାଇଁ 37 ° C ରେ ରଖାଯାଏ, 90% ରୁ ଅଧିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ବଜାୟ ରଖେ;

◮ ଏଥିରେ 5 '→ 3' DNA ପଲିମେରେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏବଂ 3 '→ 5' ଏକ୍ସୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ବିନା 5 '→ 3' ଏକ୍ସୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଅଛି |

PCR Easyᵀᴹ (ରଙ୍ଗ ସହିତ)

ଅନନ୍ୟ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ଏବଂ ଉଚ୍ଚ-ଦକ୍ଷତା Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ଅଧିକ ବିସ୍ତାର କ୍ଷମତା, ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଏବଂ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା ସୃଷ୍ଟି କରେ |

RT-qPCR Easyᵀᴹ (ଗୋଟିଏ ଷ୍ଟେପ୍) -SYBR ସବୁଜ I |

◮ ଗୋଟିଏ ଷ୍ଟେପ୍ କିଟ୍ ସମାନ ଟ୍ୟୁବରେ ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ଏବଂ qPCR ଦୁଇଟି ପ୍ରତିକ୍ରିୟା କରିଥାଏ, କେବଳ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ RNA, ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ PCR ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ RNase-Free ddH ଯୋଡିବା ଆବଶ୍ୟକ |₂O.

◮ କିଟ୍ ଶୀଘ୍ର ଏବଂ ଦକ୍ଷତାର ସହିତ ପରିମାଣିକ ଭାବରେ ଭାଇରାଲ୍ RNA ବିଶ୍ଳେଷଣ କରିପାରିବ କିମ୍ବା RNA ଟ୍ରାକ୍ କରିପାରିବ |

Kit କିଟ୍ ଏକ ଅନନ୍ୟ ଫରେଜେନ୍ ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ରିଜେଣ୍ଟ୍ ଏବଂ ଫୋରେଗେନ୍ ହଟଷ୍ଟାର୍ ଟ୍ୟାକ୍ ଡିଏନ୍ଏ ପଲିମେରେଜ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଏକ ନିଆରା ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ସହିତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ବର୍ଦ୍ଧନ ଦକ୍ଷତା ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତାକୁ ଉନ୍ନତ କରିଥାଏ |

Opt ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ଅଧିକ ଚିହ୍ନଟ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା, ଶକ୍ତିଶାଳୀ ତାପଜ ସ୍ଥିରତା ଏବଂ ଉତ୍ତମ ସହନଶୀଳତା କରିଥାଏ |

◮ RT-qPCR ସହଜ |^TM)

RT ସହଜ |^TMII (ପାଇଁ ମାଷ୍ଟର ପ୍ରେମିକ୍ସ | ପ୍ରଥମ-ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ cDNA ସିନ୍ଥେସିସ୍ ପାଇଁ |ପ୍ରକୃତ ସମୟ PCR)

- gDNA ଅପସାରଣ କରିବାର ଯଥେଷ୍ଟ କ୍ଷମତା, ଯାହା ଟେମ୍ପଲେଟରେ gDNA କୁ 2 ମିନିଟ୍ ମଧ୍ୟରେ ଅପସାରଣ କରିପାରିବ |

-ପ୍ରକାର ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ସିଷ୍ଟମ୍, ପ୍ରଥମ ଷ୍ଟ୍ରାଣ୍ଡ୍ cDNA ର ସିନ୍ଥେସିସ୍ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ କରିବାକୁ ମାତ୍ର 15 ମିନିଟ୍ ସମୟ ଲାଗେ |

-କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ ଟେମ୍ପଲେଟଗୁଡିକ: ଉଚ୍ଚ ଜିସି ବିଷୟବସ୍ତୁ ଏବଂ ଜଟିଳ ଦଳୀୟ ସଂରଚନା ସହିତ ଟେମ୍ପଲେଟଗୁଡିକ ମଧ୍ୟ ଉଚ୍ଚ ଦକ୍ଷତା ସହିତ ଓଲଟା ହୋଇପାରେ |

ଉଚ୍ଚ-ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ସିଷ୍ଟମ୍, pg- ସ୍ତରୀୟ ଟେମ୍ପଲେଟଗୁଡିକ ମଧ୍ୟ ଉଚ୍ଚମାନର cDNA ପାଇପାରିବେ |

- ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ସିଷ୍ଟମରେ ଉଚ୍ଚ ତାପଜ ସ୍ଥିରତା ଅଛି, ସର୍ବୋତ୍କୃଷ୍ଟ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ତାପମାତ୍ରା 42 and, ଏବଂ ଏଥିରେ 50 at ରେ ଭଲ ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ଅଛି |