ଗ୍ଲୁ ପୁନରୁଦ୍ଧାରରେ ଉନ୍ନତି ପାଇଁ ଟିପ୍ସ |

1. ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ସମୟରେ ନମୁନା ଭାର ବ .ାନ୍ତୁ |

2. ନୂତନ ଭାବରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ବଫର୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ |

3. ଆଲୁ କାଟିବାବେଳେ, ଆଲୁ କଟିଙ୍ଗର ପରିମାଣକୁ ହ୍ରାସ କରିବା ପାଇଁ କେବଳ ଷ୍ଟ୍ରିପ୍ ସହିତ ଆଲୁକୁ କାଟିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରନ୍ତୁ: କିଛି ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ଖଣ୍ଡ ସହିତ ଆଲୁଅର ଆବଶ୍ୟକତା ନାହିଁ, ନଚେତ୍ ଏହା ପୁନରୁଦ୍ଧାର ହାର ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇବ |

4. ଦୁଇ କିମ୍ବା ଅଧିକ ଗ୍ଲୁ ଖଣ୍ଡ ତରଳିବା ପରେ, ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଯେତେ ବଡ଼ ହେଲେ ମଧ୍ୟ ଏକ ଟ୍ୟୁବ୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଏହାକୁ ସମାନ ସ୍ତମ୍ଭକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କରନ୍ତୁ |

5. ସୋଲରେ ଯୋଡି ହୋଇଥିବା ସମାଧାନ ଟିକିଏ ଅଧିକ ହୋଇପାରେ, ଯାହା ଡିଏନ୍ଏକୁ ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ସହିତ ବାନ୍ଧିବା ପାଇଁ ଅଧିକ ଅନୁକୂଳ, କିନ୍ତୁ ସାଧାରଣତ 50 750ul ରୁ ଅଧିକ ହୁଏ ନାହିଁ |

6. ଜେଲ୍ ପୁନରୁଦ୍ଧାରର ଚାବି ହେଉଛି ସ୍ତମ୍ଭରେ ଲୁଣର ଏକାଗ୍ରତା, ଅମ୍ଳତା (ଚାର୍ଜ) ଏବଂ ହାଇଡ୍ରୋଫୋବିସିଟି ମାଧ୍ୟମରେ DNA କୁ ସ୍ତମ୍ଭରେ ବାନ୍ଧିବା |ତେଣୁ, ଯଦି ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ବଫର୍ ର pH ଅତ୍ୟଧିକ ଅଧିକ, 10ul (pH 5.0, 3mol / L NaAC) ସୋଲରେ ଯୋଗ କରାଯାଇପାରେ |ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଉପରେ DNA ଅଣୁକୁ ଭଲ ଭାବରେ ଅଟକାଇବା ପାଇଁ, ଆଲୁକୁ ତରଳାଇବା ପରେ ତରଳ ପଦାର୍ଥରେ 30% ଆଇସୋପ୍ରୋପାନୋଲ୍ ମିଶାଯାଇପାରିବ |

7. ଏଲିଏଣ୍ଟ୍ ଯୋଡିବା ପୂର୍ବରୁ, ଇଥାନଲ୍କୁ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ରୂପେ ବାଷ୍ପୀଭୂତ କରିବା ପାଇଁ ସ୍ତମ୍ଭକୁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ କିଛି ମିନିଟ୍ (ପ୍ରାୟ 10 ମିନିଟ୍) ଛାଡିଦିଅ |

8. ଶେଷରେ, ପୁନରୁଦ୍ଧାର ପରିମାଣକୁ କମ୍ କରିବାକୁ କମ୍ ବ uent ଧତା ଯୋଗ କରନ୍ତୁ |ସାଧାରଣତ ,, 30-50μl ଏଲୁଏଣ୍ଟ୍ ଏଲିଟେସନ୍ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ (ବହୁତ କମ୍ ନୁହେଁ, ନଚେତ୍ ଏହା br ୁଲାକୁ ଓଦା କରିବାକୁ ସମର୍ଥ ହେବ ନାହିଁ, ଯାହା ବିସ୍ତାର ପାଇଁ ଅନୁକୂଳ ନୁହେଁ);ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ସହିତ ବନ୍ଧା ହୋଇଥିବା DNA କୁ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣଭାବେ ବ ute ାଇବା ପାଇଁ ଏଲିଟେସନ୍ ବୁନ୍ଦା ମେମ୍ବ୍ରାନ୍ର ମଧ୍ୟ ଭାଗରେ ଅଛି |

9. ଏଲିଏଣ୍ଟ୍ ଯୋଡିବା ପରେ, ଏହାକୁ 55 ଡିଗ୍ରୀ ଜଳ ସ୍ନାନରେ 5 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ବ uted ାଇ ଦିଆଯାଇପାରେ କିମ୍ବା 10 ମିନିଟରୁ ଅଧିକ ସମୟ ପାଇଁ 50 ଡିଗ୍ରୀର ଜଳ ସ୍ନାନରେ ରଖାଯାଇପାରିବ, କିମ୍ବା ରାତାରାତି 4 ଡିଗ୍ରୀରେ ପାରାଫିଲ୍ମ ସହିତ ସିଲ୍ କରାଯାଇପାରିବ, ଏବଂ ପରଦିନ ପୁନରୁଦ୍ଧାର ପାଇଁ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ କରାଯାଇପାରିବ, ଏହାର ପ୍ରଭାବ ଭଲ |

10. ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗଡ୍ ଏଲୁଏଟ୍କୁ ପୁନର୍ବାର ଆଡସର୍ପସନ୍ ସ୍ତମ୍ଭ ଏବଂ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ ସହିତ ଯୋଡନ୍ତୁ |

PCR ଉତ୍ପାଦ ପୁନରୁଦ୍ଧାର ପାଇଁ ବିସ୍ତୃତ ପଦ୍ଧତି ଏବଂ ପଦ୍ଧତି |

1. ସାଧାରଣ ରବର ରିସାଇକ୍ଲିଂ |

ଯଦି ଆପଣ ଆଲୁକୁ ପୁନରୁଦ୍ଧାର କରିବାକୁ ଚାହୁଁଛନ୍ତି, ତେବେ ଏକ କିଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବା ଭଲ, ଯାହା ସୁବିଧାଜନକ ଏବଂ ସାମାନ୍ୟ ଅଧିକ ପୁନରୁଦ୍ଧାର ହାର ଅଛି |ଯଦି ତୁମେ ପ୍ରକୃତରେ ଏହାକୁ ହସ୍ତକୃତ ଭାବରେ ପୁନରୁଦ୍ଧାର କରିବାକୁ ପଡିବ, ତୁମେ ଆଲୁ କାଟିବା ପରେ TE ର 3 ଗୁଣ ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଯୋଗ କରିପାରିବ |ଏକ ଜଳ ସ୍ନାନରେ ତରଳିବା ପରେ, ଫେନୋଲ, ଫେନୋଲ / କ୍ଲୋରୋଫର୍ମ ସଫା ଭାବରେ ବାହାର କରାଯାଏ ଏବଂ ଇଥାନଲ ନିର୍ଗତ ହୁଏ |ଏହା ଅଟେ।

2. କମ୍ ତରଳିବା ପଏଣ୍ଟ ଜେଲରୁ DNA ପୁନରୁଦ୍ଧାର |

ଡିଏନ୍ଏ ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକର ଶୁଦ୍ଧତା ଟି (10 mmol / l Tris-HCl pH8.0, 0.1 mmol / l EDTA) ଜେଲର ପରିମାଣ ସହିତ ସମାନ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଜେଲକୁ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ତରଳାଇବା ପାଇଁ 65 ° C ଜଳ ସ୍ନାନରେ 5 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ରଖନ୍ତୁ |

ଏହାକୁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ଅଣାଯିବା ପରେ, ସମାନ ପରିମାଣର ଫେନୋଲ (TE ସହିତ ସନ୍ତୁଳିତ, TE ଉପର ସ୍ତରରେ ସିଲ୍ ହୋଇଗଲା, ଏବଂ ଫେନୋଲର ନିମ୍ନ ସ୍ତର ଅପସାରିତ ହେଲା) ଯୋଗ କରାଯାଇଥିଲା, ଏବଂ ଏହି ମିଶ୍ରଣକୁ ଧୀରେ ଧୀରେ ମିଶ୍ରଣ କରାଯାଇଥିଲା (ମିଶ୍ରଣର ଆବଶ୍ୟକତା ନାହିଁ), ଏବଂ 12,000 rpm ରେ 3 ​​ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ କରାଯାଇଥିଲା |1-2 ଥର ପୁନରାବୃତ୍ତି କରନ୍ତୁ |

ଅଲ ern କିକ ପଦାର୍ଥ ନିଅ, ଇଥାନଲ ବୃଷ୍ଟିପାତ କରିବା ପାଇଁ 0.1 ଭଲ୍ୟୁମ 3mol / L ସୋଡିୟମ ଆସେଟେଟ (pH 5.2) ଏବଂ 2.5 ଗୁଣ ଭଲ ଇଥାନଲ ଯୋଗ କର |ଉପଯୁକ୍ତ ପରିମାଣର TE ସହିତ ଶୁଦ୍ଧ ଡିଏନ୍ଏକୁ ବିସର୍ଜନ କରନ୍ତୁ, ବିଷୟବସ୍ତୁ ମାପନ୍ତୁ ଏବଂ ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ପ୍ରସ୍ତୁତ ହୁଅନ୍ତୁ (ଏହା ଲକ୍ଷ୍ୟ ଜିନ୍ ଗଠନ ବିଶ୍ଳେଷଣ, ଅନୁସନ୍ଧାନ ପ୍ରସ୍ତୁତି ଇତ୍ୟାଦି ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ) |

3. ଭଲ ବିସ୍ତାର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ସହିତ PCR ପୁନରୁଦ୍ଧାର |

ଯଦି PCR ବିସ୍ତାରର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଭଲ, ଏହା କେବଳ PCR ଉତ୍ପାଦର ଏକ ସରଳ ଶୁଦ୍ଧତା ଏବଂ ପୁନରୁଦ୍ଧାର ଅଟେ |ଆପଣ PCR ଉତ୍ପାଦରେ 50ug / ml ପ୍ରୋଟିନେସ୍ କେ, 1 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ 37 ଡିଗ୍ରୀ, ଫେନୋଲ୍ / କ୍ଲୋରୋଫର୍ମ ସହିତ ଥରେ ବାହାର କରିପାରିବେ, କ୍ଲୋରୋଫର୍ମ ସହିତ ଥରେ ବାହାର କରିପାରିବେ ଏବଂ ଅଲ ern କିକ ପଦାର୍ଥର 0.1 ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଯୋଗ କରିପାରିବେ |ସୋଡିୟମ୍ ଆସେଟେଟ୍ 2.5। 2.5 ଭଲ୍ୟୁମ୍ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ଇଥାନଲ୍ ସହିତ ବୃଷ୍ଟିପାତ ଦ୍ୱାରା ପୁନରୁଦ୍ଧାର କରାଯାଇଥିଲା |

ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକ:

https://www.foreivd.com/pcr-purification-kit-2-product/

https://www.foreivd.com/blood-superdirecttm-pcr-kit-edta-product/