RNase ଏକ ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ଶବ୍ଦ ଯାହା ଅନେକ ଛାତ୍ର ଯେଉଁମାନେ ପ୍ରାୟତ R RNA ନିଷ୍କାସନ ପରୀକ୍ଷଣ କରନ୍ତି ସେମାନେ ଶୁଣିବାକୁ ଚାହାଁନ୍ତି ନାହିଁ |ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ସଶସ୍ତ୍ର, ଶେଷରେ ଅତ୍ୟଧିକ ବିଷାକ୍ତ ରିଜେଣ୍ଟସ୍ ଫେନୋଲ୍ ଏବଂ କ୍ଲୋରୋଫର୍ମ ସହିତ ବାହାର କରାଯାଇଥିବା RNA ଖରାପ ହୋଇଗଲା |ମୁଁ ପୁନ iled ସମନ୍ୱିତ ନୁହେଁ!!!ଆଜି, ଆସନ୍ତୁ ଦେଖିବା ପ୍ରସିଦ୍ଧ Rnase ର ଉତ୍ପତ୍ତି |

ରିବନୁକ୍ଲାଇଜ୍ (RNase), କିମ୍ବା RNase, ଏକ ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ ଯାହା RNA କୁ ଛୋଟ ଅଣୁରେ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇଜ୍ କରିପାରେ |RNase, ଏକ ଛୋଟ ଅଣୁ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଭାବରେ, ଅସାଧାରଣ ଭାବରେ ସ୍ଥିର | ।ପାରମ୍ପରିକ ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରା ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ଚାପର ବାଷ୍ପ ନିରୂପଣ ଏବଂ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଇନହିବିଟର ଏହାକୁ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ନିଷ୍କ୍ରିୟ କରିପାରିବ ନାହିଁ |RNase ର ସ୍ଥିରତା ମୁଖ୍ୟତ the ସଂରଚନାରେ ଥିବା ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡରୁ ଆସିଥାଏ |ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ବୋଭାଇନ୍ ଅଗ୍ନାଶୟର ସାଧାରଣତ used ବ୍ୟବହୃତ RNase ରେ ମାତ୍ର 124 ଆମିନୋ ଏସିଡ୍ ଥାଏ, କିନ୍ତୁ ଏଥିରେ 4 ଟି ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ଥାଏ |ସଲଫର୍ ବଣ୍ଡ୍ ଏବଂ ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ୍ ଉତ୍କୃଷ୍ଟ ତାପଜ ସ୍ଥିରତା ସହିତ RNase କୁ ପ୍ରଦାନ କରେ |ଏହା ସହିତ, rnase ର ଅପେକ୍ଷାକୃତ ଛୋଟ ମଲିକୁଲାର୍ ଓଜନ ଅଛି ଏବଂ ଅନେକ କ୍ଷେତ୍ରରେ ଶୀଘ୍ର ଏହାର ମୂଳ ରୂପକୁ ପୁନ restore ସ୍ଥାପନ କରିପାରିବ |

ଅତ୍ୟଧିକ ସ୍ଥିର ହେବା ସହିତ,ଲାବୋରେଟୋରୀରେ RNases ସର୍ବବ୍ୟାପୀ | ।RNase ହେଉଛି ଏକ ଜ ological ବିକ ପ୍ରତିରକ୍ଷା ପ୍ରଣାଳୀ |ଏକ କୋଷ ପାଇଁ, ଏକ୍ସୋଜେନସ୍ RNA ପ୍ରାୟତ fat ସାଂଘାତିକ |ଏକ୍ସୋଜେନସ୍ ଡିଏନ୍ଏ ତୁଳନାରେ, ଏକ୍ସୋଜେନୋସ୍ RNA ପ୍ରାୟତ more ଅଧିକ ବିପଜ୍ଜନକ ଅଟେ |RNA ଖୁସିରେ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପ୍ସିତ ଏବଂ ଅନୁବାଦ ହୋଇଛି, ତେଣୁ ପ୍ରାୟ ସମସ୍ତ ଜୀବଜନ୍ତୁ ଆରଏନଏସକୁ ବିକଶିତ RNA ର ଆକ୍ରମଣରୁ ରକ୍ଷା କରିବା ପାଇଁ ବିକଶିତ କରିଛନ୍ତି |ତେଣୁ, ଲାବୋରେଟୋରୀରେ ଚାଷ କରାଯାଉଥିବା ଜୀବାଣୁ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ଏବଂ ଆପଣ RNA ବାହାର କରୁଥିବା RNase ର ସୁଗନ୍ଧରୁ ବଞ୍ଚିତ ହୁଅନ୍ତି |ମାନବ ଶରୀରର ତରଳ ପଦାର୍ଥ (ଲାଳ, ଲୁହ, ଇତ୍ୟାଦି) ରେ ବହୁ ପରିମାଣର RNase ଥାଏ, ତେଣୁ RNA ଖରାପ ହେଲେ କାନ୍ଦ ନାହିଁ |ଆପଣ ଯେତେ କାନ୍ଦିବେ, RNA ଅବନତି ସେତିକି ଖରାପ ହେବ!!ଭଉଣୀ ଡାଏୟୁ RNA ଉତ୍ତୋଳନ ପାଇଁ ଉପଯୁକ୍ତ ନୁହେଁ!

ଏହା ସହିତ, ଆପଣଙ୍କର ସୂକ୍ଷ୍ମ ଚର୍ମରେ ଅନେକ RNase ମଧ୍ୟ ରହିଥାଏ, ଏବଂ ମାର୍କର, ପାଇପେଟ୍, ରେଫ୍ରିଜରେଟର କବାଟ, ଏବଂ କବାଟ ହ୍ୟାଣ୍ଡଲ୍ ଯାହା ଚର୍ମ ଦ୍ୱାରା ସ୍ପର୍ଶ କରାଯାଇଥାଏ |

ଏତେ ରାମ୍ବିଂ ସହିତ, ଆସନ୍ତୁ ଦେଖିବା RNases ସହିତ କିପରି ମୁକାବିଲା କରାଯିବ |

RNA ଅପସାରଣ କରିବା ସମୟରେ ସମସ୍ତେ ପ୍ରଥମେ ଭାବନ୍ତି |DEPC(ଡାଏଥାଇଲ୍ ପାଇରୋକାର୍ବୋନେଟ୍) |DEPC ମୁଖ୍ୟତ the RNase ସକ୍ରିୟ ଗୋଷ୍ଠୀ ହିଷ୍ଟିଡାଇନ୍ ର ଇମିଡାଜୋଲ୍ ରିଙ୍ଗ ସହିତ ମିଶି ପ୍ରୋଟିନକୁ ଅସ୍ୱୀକାର କରେ, ଯାହା ଦ୍ the ାରା ଏନଜାଇମର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ପ୍ରତିବନ୍ଧିତ କରେ |%। %% DEPC Rnase ଉପରେ ଏକ ଉତ୍ତମ ଅପସାରଣ ପ୍ରଭାବ ପକାଇପାରେ, କିନ୍ତୁ ଆମକୁ ଧ୍ୟାନ ଦେବା ଆବଶ୍ୟକ ଯେ DEPC ଏକ ଜଣାଶୁଣା କର୍କିନୋଜେନ, ତେଣୁ ଏହାକୁ ବ୍ୟବହାର କରିବା ସମୟରେ ବିଶେଷ ଧ୍ୟାନ ଦେବା ଉଚିତ |

RNase ପାଇଁ, ଆମେ ଦୁଇଟି ଦିଗରୁ ଆରମ୍ଭ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ,ପ୍ରଥମଟି ହେଉଛି ଏଣ୍ଡୋଜେନସ୍ RNase ର କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିବା |

ଟ୍ରାଇଜୋଲରେ ଥିବା ଗୁଆନାଡାଇନ୍ ଆଇସୋଥାଇଓସିୟାନେଟ୍ ଏବଂ ଡିଟିଟି ପରି ପାରମ୍ପାରିକ RNA ନିଷ୍କାସନ ରେଜେଣ୍ଟସ୍ RNase ର ଡିସଲଫାଇଡ୍ ବଣ୍ଡ ଖୋଲିପାରେ, କିନ୍ତୁ ତଥାପି କିଛି RNases ଅଛି, ବିଶେଷତ tiss ଟିସୁ ନମୁନାରେ, ତେଣୁ ନିମ୍ନ ତାପମାତ୍ରା ପ୍ରତି ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ |

୧।ଟିସୁ ନମୁନାକୁ ବାହାର କରିବା ପରେ ତୁରନ୍ତ ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନରେ କିମ୍ବା ଏକ ବ୍ୟବସାୟିକ RNA ସଂରକ୍ଷଣ ସମାଧାନରେ ବୁଡ଼ାନ୍ତୁ |

୨।କୋଷ ନମୁନାର RNA ବାହାର କରିବା ପରେ ଏହାକୁ ଲାଇସିସ୍ ସଲ୍ୟୁସନରେ ମିଶାନ୍ତୁ ଏବଂ ଏହାକୁ ବରଫ ବାକ୍ସରେ ଲାଇସ୍ କରନ୍ତୁ |

3. ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ପାଇଁ ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନ ବ୍ୟବହାର କରିବା ଭଲ | ଯେତେବେଳେ ଟିସୁ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକ ହୋମୋଜେନାଇଜ୍ ହୁଏ |ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନ ବିନା ଏକ ବ electric ଦ୍ୟୁତିକ ହୋମୋଜେନାଇଜର ବ୍ୟବହାର କରିବାବେଳେ, ହୋମୋଜେନେଟ ଆଡାପ୍ଟରକୁ ପୂର୍ଣ୍ଣ-ଥଣ୍ଡା କରିବାକୁ ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ |

ଦ୍ୱିତୀୟଟି ହେଉଛି ଏକ୍ସୋଜେନସ୍ DNase |

୧।ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ସଶସ୍ତ୍ର ହୁଅନ୍ତୁ, ଏକ ଲ୍ୟାବ କୋଟ୍ ପିନ୍ଧନ୍ତୁ, ମାସ୍କ ପିନ୍ଧନ୍ତୁ ଏବଂ ଏକ ନୂତନ ଗ୍ଲୋଭସ୍ ପିନ୍ଧିବାକୁ ନିଶ୍ଚିତ ହୁଅନ୍ତୁ (ଏତେ ଥ୍ରୀଟି ହୁଅନ୍ତୁ ନାହିଁ !! ଏହା ମନେ ରଖିବା ଉଚିତ୍ ଯେ ଟ୍ରାଇଜୋଲ୍ ସୁପର କ୍ଷତିକାରକ, ଏବଂ ଏହା ଗ୍ଲୋଭସ୍ ମାଧ୍ୟମରେ ମଧ୍ୟ ବହୁତ ଶକ୍ତିଶାଳୀ, ତେଣୁ ଆପଣଙ୍କ ହାତରେ ଡ୍ରପ୍ କରନ୍ତୁ ନାହିଁ) |

୨।ସମସ୍ତ ବ୍ୟବହୃତ ପାଇପେଟ୍ ଟିପ୍ସ, ଇପି ଟ୍ୟୁବ୍, PCR ଟ୍ୟୁବ୍ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଯନ୍ତ୍ରପାତିଗୁଡିକ ଡି-ଆରଏନ୍ଏସ୍ ଚିକିତ୍ସା କରାଯିବା ଆବଶ୍ୟକ |ଏହାକୁ 0.1% DEPC ରେ ଭିଜାଇ ଦିଆଯାଇପାରେ ଏବଂ ତାପରେ ଉଚ୍ଚ ଚାପରେ ଚାପିତ |ଏକ ଫ୍ୟୁମ୍ ହୁଡରେ ଅପରେସନ୍ ପ୍ରତି ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ |ଏନଜାଇମ୍ ଅପସାରଣ ପାଇଁ ସ୍ଥାନୀୟ ଅତ୍ୟାଚାରୀମାନେ ସିଧାସଳଖ ସାମଗ୍ରୀ କିଣି ପାରିବେ |

PS: ମୋତେ ଏକ ଅଳସୁଆ ପଦ୍ଧତି କହିବାକୁ ଦିଅ |ଯଦିଓ ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରା ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ଚାପ RNase କୁ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ରୂପେ ଅପସାରଣ କରିପାରିବ ନାହିଁ, ଏହା ଏହାର ଏକ ବଡ଼ ଅଂଶକୁ ଅପସାରଣ କରିବ |2 ଗୁଣ ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରା ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ଚାପର ଭଲ ପ୍ରଭାବ ଅଛି, ଏବଂ RNA ର ନିଷ୍କାସନ କମ୍ ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ |

3ମଦ୍ୟପାନ ପ୍ରୋଟିନକୁ ଅଲଗା କରିପାରେ,ତେଣୁ RNA ନିଷ୍କାସନ ଟେବୁଲକୁ 75% ମଦ୍ୟପାନ ସହିତ ପୋଛି ଦିଆଯାଇପାରେ | , ଏବଂ ଗ୍ଲୋଭସ୍ ମଧ୍ୟ ମଦ୍ୟପାନ ସହିତ ସ୍ପ୍ରେ କରାଯାଇପାରେ |

4ଅନ୍ତିମ RNA ଦ୍ରବଣକାରୀ ସମାଧାନ ଏବଂ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ ଟ୍ୟୁବ୍ ମଧ୍ୟ ଡି-ଆରଏନ୍ଏସ୍ ଚିକିତ୍ସା କରାଯିବା ଉଚିତ |DEPC ଜଳ ହେଉଛି ସାଧାରଣତ used ବ୍ୟବହୃତ RNA ଦ୍ରବଣ ସମାଧାନ |ଆସନ୍ତୁ DEPC ଜଳର ସଠିକ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତି ପଦ୍ଧତି ବିଷୟରେ ଆଲୋଚନା କରିବା (ଯେତେବେଳେ ଆପଣ ଏହାକୁ କିଣିବେ ବ୍ୟବସାୟିକ DEPC କୁ ପୁନ ack ପ୍ୟାକେଜ୍ କରିବାକୁ ମନେରଖନ୍ତୁ) |

1: 1000 ରେ ଅଲ୍ଟ୍ରାପ୍ୟୁର ପାଣିରେ DEPC ଯୋଡନ୍ତୁ, ଭଲ ଭାବରେ ହଲାନ୍ତୁ, 37 ° C ରେ ରାତାରାତି ଛିଡା ହୁଅନ୍ତୁ ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ତାପମାତ୍ରା ଏବଂ 15 ମିନିଟ ପାଇଁ ଉଚ୍ଚ ଚାପରେ 121 ° C ରେ ସ୍ଥିର କରନ୍ତୁ |DEPC ଜଳ -20 ° C ରେ 1ml ଆଲିକୋଟରେ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇପାରିବ |

ଶେଷରେ, ସଂକ୍ଷେପରେ କହିବାକୁ ଗଲେ: ନିମ୍ନ ତାପମାତ୍ରା ହେଉଛି ଚାବି, ଉପଯୋଗୀ ସାମଗ୍ରୀଗୁଡିକ ଭଲ ଭାବରେ ପରିଚାଳିତ ହୁଏ, ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ସଶସ୍ତ୍ର ଏବଂ କମ୍ କଥାବାର୍ତ୍ତା!

ଠିକ୍, ତାହା ଆଜିର ରଣନୀତି ପାଇଁ |ମୁଁ ତୁମକୁ ସମସ୍ତ RNA ଏକାଗ୍ରତା ଏବଂ ଶୁଦ୍ଧତା କାମନା କରୁଛି |ଉଭୟ A260 / A280 ହେଉଛି 2.0!!!

ଅବଶ୍ୟ, ଯଦି ଆପଣ ଏକ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତି |କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରା ଅପରେସନ୍ RNA ନିଷ୍କାସନ କିଟ୍ |, ଆପଣ ଉପରୋକ୍ତ ଅସୁବିଧାଗୁଡ଼ିକର ସମ୍ମୁଖୀନ ହୋଇପାରନ୍ତି ନାହିଁ |

DNase ଯୋଗ ନକରି କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ କାର୍ଯ୍ୟ, 11 ମିନିଟରେ କୋଷରୁ ମୋଟ RNA ବାହାର କରିଥାଏ ଏବଂ 30 ମିନିଟରେ ପଶୁ ଟିସୁ କିମ୍ବା ଉଦ୍ଭିଦରୁ ମୋଟ RNA ବାହାର କରିଥାଏ |

ପରୀକ୍ଷା ନମୁନା ପାଇଁ, ଦୟାକରି ଯୋଗାଯୋଗ କରନ୍ତୁ:overseas@foregene.com

ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଉତ୍ପାଦ:

https://www.foreivd.com/cell-total-rna-isolation-kit-product/

https://www.foreivd.com/animal-total-rna-isolation-kit-product/

https://www.foreivd.com/plant-total-rna/