ସମସ୍ୟା ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ଗାଇଡ୍ |

The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。

କ R ଣସି RNA ବାହାର କରାଯାଇପାରିବ ନାହିଁ କିମ୍ବା ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ଅମଳ କମ୍ |

ସାଧାରଣତ many ଅନେକ କାରଣ ଅଛି ଯାହା ପୁନରୁଦ୍ଧାର ଦକ୍ଷତାକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିଥାଏ, ଯେପରିକି: ନମୁନା RNA ବିଷୟବସ୍ତୁ, କାର୍ଯ୍ୟ ପ୍ରଣାଳୀ, ବିଲୋପ ପରିମାଣ, ଇତ୍ୟାଦି |

ସାଧାରଣ କାରଣଗୁଡ଼ିକର ବିଶ୍ଳେଷଣ ：

1. ଅପରେସନ୍ ସମୟରେ ସ୍ନାନ କିମ୍ବା ନିମ୍ନ ତାପମାତ୍ରା (4 ° C) ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ |

ପରାମର୍ଶ: କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରା (15-25 ° C) କାର୍ଯ୍ୟ, ବରଫ ସ୍ନାନ ଏବଂ ନିମ୍ନ ତାପମାତ୍ରା ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ |

2. ଅତ୍ୟଧିକ ନମୁନା ଷ୍ଟୋରେଜ୍ କିମ୍ବା ନମୁନା ଷ୍ଟୋରେଜ୍ |

ପରାମର୍ଶ: -80 ° C ରେ ନମୁନା ଗଚ୍ଛିତ କରନ୍ତୁ କିମ୍ବା ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନରେ ଫ୍ରିଜ୍ କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ବାରମ୍ବାର ଫ୍ରିଜ୍-ଥ ବ୍ୟବହାରରୁ ଦୂରେଇ ରୁହନ୍ତୁ;RNA ନିଷ୍କାସନ ପାଇଁ ନୂତନ ଭାବରେ ସଂଗୃହିତ ନମୁନା ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରନ୍ତୁ |

3. ପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ ନମୁନା ଲାଇସିସ୍ |

ସୁପାରିଶ: ଦୟାକରି ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ ଯେ ନମୁନା ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟ ସମାଧାନ (ର ar ଖ୍ୟ ଆକ୍ରିଲାମାଇଡ୍) ଭଲ ଭାବରେ ମିଶ୍ରିତ ହୋଇଛି ଏବଂ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ 10 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଇନ୍କ୍ୟୁବେଡ୍ କରାଯାଇଛି (15-25 ° C)

4. ଏଲିଏଣ୍ଟ୍ ଭୁଲ୍ ଭାବରେ ଯୋଡା ଯାଇଛି |

ସୁପାରିଶ: ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ ଯେ RNase-Free ddH2O ଶୁଦ୍ଧ ସ୍ତମ୍ଭର ମ rane ିରେ ମ added ିରେ ଯୋଡା ଯାଇଛି |

5. ବଫର୍ viRW2 ରେ ଆନ୍ହାଇଡ୍ରସ୍ ଇଥାନଲ୍ର ଅନୁପଯୁକ୍ତ ପରିମାଣ |

ପରାମର୍ଶ: ଦୟାକରି ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ ଅନୁସରଣ କରନ୍ତୁ, ବଫର୍ viRW2 ରେ ସଠିକ୍ ପରିମାଣର ଆନ୍ହାଇଡ୍ରସ୍ ଇଥାନଲ୍ ଯୋଗ କରନ୍ତୁ ଏବଂ କିଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବା ପୂର୍ବରୁ ସେଗୁଡିକୁ ଭଲ ଭାବରେ ମିଶାନ୍ତୁ。

6. ଅନୁପଯୁକ୍ତ ନମୁନା ବ୍ୟବହାର |

ପରାମର୍ଶ: ବଫର୍ viRL ର 500μl ପ୍ରତି 200µl ନମୁନା |ଅତ୍ୟଧିକ ନମୁନା ପରିମାଣ RNA ନିଷ୍କାସନ ହାର ହ୍ରାସ କରିବ |

7. ଅନୁପଯୁକ୍ତ ଏଲିଟେସନ୍ ଭଲ୍ୟୁମ୍ କିମ୍ବା ଅସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଏଲିଟେସନ୍ |

ପରାମର୍ଶ: ଶୁଦ୍ଧ ସ୍ତମ୍ଭର ଉତ୍ତମ ପରିମାଣ ହେଉଛି 30-50μl;ଯଦି ଏଲିଟେସନ୍ ପ୍ରଭାବ ସନ୍ତୋଷଜନକ ନୁହେଁ, ତେବେ ପୂର୍ବ-ଉତ୍ତାପିତ RNase-Free ddH ଯୋଗ କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |₂O ଏବଂ ରୁମ ତାପମାତ୍ରାରେ ରଖିବା ସମୟକୁ ବ extend ାନ୍ତୁ, ଯେପରିକି 5-10 ମିନିଟ୍ |

8. ବଫର୍ viRW2 ରେ ଧୋଇବା ପରେ ଶୁଦ୍ଧ ସ୍ତମ୍ଭରେ ଇଥାନଲ୍ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ ଅଛି |

ପରାମର୍ଶ: ବଫର୍ viRW2 ରେ ଧୋଇବା ପରେ ଏବଂ 2 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଖାଲି-ଟ୍ୟୁବ୍ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ ପରେ ଯଦି ଇଥାନଲ୍ ରହିଥାଏ, ତେବେ ଅବଶିଷ୍ଟ ଇଥାନଲ୍କୁ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣରୂପେ ହଟାଇବା ପାଇଁ ଶୁଦ୍ଧ ସ୍ତମ୍ଭ 5 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ଛାଡି ଦିଆଯାଇପାରେ |

ଶୁଦ୍ଧ RNA ଅଣୁଗୁଡ଼ିକର ଅବକ୍ଷୟ |

ଶୁଦ୍ଧ RNA ର ଗୁଣ ନମୁନା ସଂରକ୍ଷଣ, RNase ପ୍ରଦୂଷଣ ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟ ପରି କାରକ ସହିତ ଜଡିତ |

ସାଧାରଣ କାରଣଗୁଡ଼ିକର ବିଶ୍ଳେଷଣ ：

ସଂଗୃହିତ ନମୁନାଗୁଡିକ ସମୟ ସମୟରେ ସଞ୍ଚୟ ହୋଇନଥିଲା |

ପରାମର୍ଶ: ଯଦି ନମୁନା ସଂଗ୍ରହ ପରେ ସମୟ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ ନାହିଁ, ଦୟାକରି ଏହାକୁ -80 at କିମ୍ବା ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନରେ ତୁରନ୍ତ ସଂରକ୍ଷଣ କରନ୍ତୁ |RNA ଅଣୁଗୁଡ଼ିକର ଉତ୍ତୋଳନ ପାଇଁ, ଯେତେବେଳେ ସମ୍ଭବ ନୂତନ ଭାବରେ ସଂଗୃହିତ ନମୁନା ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରନ୍ତୁ |

2. ସଂଗୃହିତ ନମୁନାଗୁଡିକ ବାରମ୍ବାର ଫ୍ରିଜ୍ ଏବଂ ଥୋଇବା |

ପରାମର୍ଶ: ନମୁନା ସଂଗ୍ରହ ଏବଂ ସଂରକ୍ଷଣ ସମୟରେ ବାରମ୍ବାର ଫ୍ରିଜ୍ ଏବଂ ଥୋଇବା ଠାରୁ ଦୂରେଇ ରୁହନ୍ତୁ, ନଚେତ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ର ଅମଳ କମିଯିବ |

3. ଅପରେଟିଂ ରୁମରେ ଆରଏନ୍ଏସ୍ ପ୍ରବର୍ତ୍ତିତ ହୋଇଥିଲା କିମ୍ବା କ disp ଣସି ବ୍ୟବହାର ଯୋଗ୍ୟ ଗ୍ଲୋଭସ୍, ମାସ୍କ ଇତ୍ୟାଦି ପିନ୍ଧାଯାଇ ନଥିଲା |

ପରାମର୍ଶ: RNA ଅଣୁଗୁଡ଼ିକର ପରୀକ୍ଷଣ ଏକ ପୃଥକ RNA ଅପରେସନ୍ ରୁମ୍ରେ ସର୍ବୋତ୍ତମ କାର୍ଯ୍ୟ କରାଯାଏ ଏବଂ ପରୀକ୍ଷଣ ପୂର୍ବରୁ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଟେବୁଲ୍ ସଫା କରାଯାଏ |RNase ପରିଚୟ ଦ୍ caused ାରା ସୃଷ୍ଟି ହୋଇଥିବା RNA ଅବକ୍ଷୟକୁ ଏଡାଇବା ପାଇଁ ପରୀକ୍ଷଣ ସମୟରେ ଏକ ଥର ବ୍ୟବହାର କରାଯାଉଥିବା ଗ୍ଲୋଭସ୍ ଏବଂ ମାସ୍କ ପିନ୍ଧନ୍ତୁ |

4. ବ୍ୟବହାର ସମୟରେ RNase ଦ୍ୱାରା ରିଜେଣ୍ଟ ପ୍ରଦୂଷିତ |

ପରାମର୍ଶ: ସମ୍ପୃକ୍ତ ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ନୂତନ ଭାଇରାଲ୍ RNA ବିଚ୍ଛିନ୍ନତା କିଟ୍ ସହିତ ବଦଳାନ୍ତୁ |

5. ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ ଟ୍ୟୁବ୍, ପାଇପେଟ୍ ଟିପ୍ସ ଇତ୍ୟାଦିର RNase ପ୍ରଦୂଷଣ ପରାମର୍ଶ: ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ ଯେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ ଟ୍ୟୁବ୍, ପାଇପେଟ୍ ଟିପ୍ସ ଏବଂ ପାଇପେଟ୍ ସବୁ RNase ମୁକ୍ତ |

ଶୁଦ୍ଧ RNA ଅଣୁଗୁଡ଼ିକ ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପରୀକ୍ଷଣକୁ ପ୍ରଭାବିତ କଲେ |

ଶୁଦ୍ଧ ସ୍ତମ୍ଭ ଦ୍ pur ାରା ଶୁଦ୍ଧ ହୋଇଥିବା RNA ଅଣୁଗୁଡ଼ିକ ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପରୀକ୍ଷଣକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିବ ଯଦି ସେଠାରେ ଅଧିକ ଲୁଣ ଆୟନ କିମ୍ବା ପ୍ରୋଟିନ୍ ଥାଏ, ଯେପରିକି: ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍, ଉତ୍ତର ବ୍ଲଟ୍ ଇତ୍ୟାଦି |

1. ବର୍ଦ୍ଧିତ RNA ଅଣୁଗୁଡ଼ିକରେ ଅବଶିଷ୍ଟ ଲୁଣ ଆୟନ ଅଛି |

ସୁପାରିଶ: ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ ଯେ ବଫର୍ viRW2 ରେ ସଠିକ୍ ପରିମାଣର ଆନ୍ହାଇଡ୍ରସ୍ ଇଥାନଲ୍ ଯୋଡି ହୋଇଛି, ଏବଂ ଅପରେଟିଂ ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀରେ ସଠିକ୍ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ ସ୍ପିଡ୍ ଅନୁଯାୟୀ ଶୁଦ୍ଧତା ସ୍ତମ୍ଭକୁ ଦୁଇଥର ଧୋଇ ଦିଅନ୍ତୁ ； ଯଦି ଲୁଣ ଆୟନ ବାକି ଅଛି, ତେବେ ଆପଣ ବଫର୍ viRW2 କୁ ଶୁଦ୍ଧ ସ୍ତମ୍ଭରେ ଛାଡି ପାରିବେ ଏବଂ ଏହାକୁ 5 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ରୁମ୍ ତାପମାତ୍ରାରେ ଛାଡି ପାରିବେ |ତା’ପରେ ଲୁଣ ଆୟନ ପ୍ରଦୂଷଣକୁ ସର୍ବାଧିକ ପରିମାଣରେ ହଟାଇବା ପାଇଁ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ କର |

2. ବର୍ଦ୍ଧିତ RNA ଅଣୁଗୁଡ଼ିକରେ ଅବଶିଷ୍ଟ ଇଥାନଲ ଅଛି |

ପରାମର୍ଶ: ବଫର୍ viRW2 ଦ୍ pur ାରା ଶୁଦ୍ଧକରଣ ସ୍ତମ୍ଭଗୁଡିକ ଧୋଇ ହୋଇଥିବାର ଥରେ ନିଶ୍ଚିତ କର, ଅପରେଟିଂ ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗୁଲ୍ ସ୍ପିଡ୍ ଅନୁଯାୟୀ ଖାଲି ଟ୍ୟୁବ୍ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ କର |ଯଦି ଏପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଇଥାନଲ ବାକି ଅଛି, ତେବେ ଅବଶିଷ୍ଟ ଇଥାନଲକୁ ସର୍ବାଧିକ ପରିମାଣରେ ହଟାଇବା ପାଇଁ ଏହାକୁ ଏକ ଖାଲି ଟ୍ୟୁବ୍ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ ପରେ ରୁମ୍ ତାପମାତ୍ରାରେ 5 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଛାଡି ଦିଆଯାଇପାରେ |

ନିର୍ଦ୍ଦେଶନାମା:

ଭାଇରାଲ୍ RNA ବିଚ୍ଛିନ୍ନତା କିଟ୍ ନିର୍ଦ୍ଦେଶନାମା |