ସେଲ୍ ସିଧାସଳଖ RT qPCR କିଟ୍ - SYBR GREEN I Direct Cell Lysis Cell Ready One-step qRT-PCR Kits
ବର୍ଣ୍ଣନା
ଏହି କିଟ୍ ଏକ ଅନନ୍ୟ ଲାଇସିସ୍ ବଫର୍ ସିଷ୍ଟମ୍ ବ୍ୟବହାର କରେ ଯାହା RT-qPCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପାଇଁ ସଂସ୍କୃତ କୋଷ ନମୁନାରୁ ଶୀଘ୍ର RNA ମୁକ୍ତ କରିପାରିବ, ଯାହାଦ୍ୱାରା ସମୟ ସାପେକ୍ଷ ଏବଂ ପରିଶ୍ରମୀ RNA ଶୁଦ୍ଧ ପ୍ରକ୍ରିୟା ଦୂର ହେବ |ମାତ୍ର 7 ମିନିଟରେ RNA ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ମିଳିପାରିବ |5×ସିଧାସଳଖ ଆରଟି ମିକ୍ସ ଏବଂ ୨ |×କିଟ୍ ଦ୍ୱାରା ପ୍ରଦତ୍ତ ସିଧାସଳଖ qPCR ମିକ୍ସ- SYBR ରେଜେଣ୍ଟଗୁଡିକ ଶୀଘ୍ର ଏବଂ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଭାବରେ ପ୍ରକୃତ ସମୟର ପରିମାଣିକ PCR ଫଳାଫଳ ହାସଲ କରିପାରିବ |
5×ସିଧାସଳଖ ଆରଟି ମିକ୍ସ ଏବଂ ୨ |×ସିଧାସଳଖ qPCR ମିକ୍ସ- SYBR ର ଦୃ strong ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ସହନଶୀଳତା ଅଛି, ଏବଂ ନମୁନାଗୁଡ଼ିକର ଲାଇସେଟ୍ ସିଧାସଳଖ RT-qPCR ପାଇଁ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ |ଏହି କିଟ୍ ରେ ଅନନ୍ୟ RNA ଉଚ୍ଚ-ଆଫିନିଟି ଫୋରେଜେନ୍ ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍ ଏବଂ ହଟ୍ ଡି-ଟ୍ୟାକ୍ DNA ପଲିମେରେଜ୍, dNTP, MgCl ଧାରଣ କରେ |2, ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବଫର୍, PCR ଅପ୍ଟିମାଇଜର୍ ଏବଂ ଷ୍ଟାବିଲାଇଜର୍ |
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ
200×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns
କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
| ଭାଗ I | ବଫର୍ CL |
| ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ରୋଟେଜ୍ ପ୍ଲସ୍ II | | |
| ବଫର୍ ଏସ | |
| ଭାଗ II | DNA ଏରେଜର | |
| 5 × ସିଧାସଳଖ ଆରଟି ମିକ୍ସ | | |
| 2 × ସିଧାସଳଖ qPCR ମିକ୍ସ- SYBR | | |
| 50 × ROX ସନ୍ଦର୍ଭ ରଙ୍ଗ | | |
| RNase- ମୁକ୍ତ ddH2O | | |
| ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ | |
ବ Features ଶିଷ୍ଟ୍ୟ ଏବଂ ସୁବିଧା
■ସରଳ ଏବଂ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ: ସେଲ୍ ସିଧାସଳଖ ଆରଟିଓ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ସହିତ, RNA ନମୁନାକୁ ମାତ୍ର 7 ମିନିଟରେ ମିଳିପାରିବ |
10 ନମୁନା ଚାହିଦା ଛୋଟ, ଯେହେତୁ 10 ଟି କୋଷ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇପାରିବ |
■ ଉଚ୍ଚ ଥ୍ରୋପପୁଟ: ଏହା 384, 96, 24, 12, 6-କୂଅ ପ୍ଲେଟରେ ସଂସ୍କୃତ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଶୀଘ୍ର RNA ଚିହ୍ନଟ କରିପାରିବ |
■ ଡିଏନ୍ଏ ଇରେଜର ଶୀଘ୍ର ମୁକ୍ତ ହୋଇଥିବା ଜେନୋମଗୁଡ଼ିକୁ ଅପସାରଣ କରିପାରିବ, ପରବର୍ତ୍ତୀ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଫଳାଫଳ ଉପରେ ଏହାର ପ୍ରଭାବକୁ ବହୁ ମାତ୍ରାରେ ହ୍ରାସ କରିପାରିବ |
RT ଅପ୍ଟିମାଇଜଡ୍ RT ଏବଂ qPCR ସିଷ୍ଟମ୍ ଦୁଇ-ଷ୍ଟେପ୍ RT-PCR ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ କୁ ଅଧିକ କ୍ରିୟାଶୀଳ ଏବଂ PCR କୁ ଅଧିକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ କରିଥାଏ ଏବଂ RT-qPCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରତିରୋଧକ ପାଇଁ ଅଧିକ ପ୍ରତିରୋଧୀ କରିଥାଏ |
କିଟ୍ ପ୍ରୟୋଗ |
ପ୍ରୟୋଗର ପରିସର: ସଂସ୍କୃତ କକ୍ଷ |
- ନମୁନା ଲାଇସିସ୍ ଦ୍ୱାରା ପ୍ରକାଶିତ RNA: କେବଳ ଏହି କିଟ୍ ର RT-qPCR ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପାଇଁ ପ୍ରଯୁଜ୍ୟ |
- କିଟ୍ ନିମ୍ନଲିଖିତ ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରିବ: ଜିନ୍ ଏକ୍ସପ୍ରେସନ୍ ଆନାଲିସିସ୍, siRNA- ମଧ୍ୟସ୍ଥ ଜିନ୍ ସିଲିଂ ପ୍ରଭାବର ଯାଞ୍ଚ, ଡ୍ରଗ୍ ସ୍କ୍ରିନିଂ ଇତ୍ୟାଦି |
ଚିତ୍ର
ସଂରକ୍ଷଣ ଏବଂ ସେଲଫ୍ ଲାଇଫ୍ |
ଏହି କିଟ୍ ର ଭାଗ I 4 ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହେବା ଉଚିତ୍;ଭାଗ II -20 at ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହେବା ଉଚିତ |
ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ରୋଟେଜ୍ ପ୍ଲସ୍ II କୁ 4 ରେ ସଂରକ୍ଷଣ କରାଯିବା ଉଚିତ୍ |℃, -20 at ରେ ଫ୍ରିଜ୍ କରନ୍ତୁ ନାହିଁ |
Reagent 2×ସିଧାସଳଖ qPCR ମିକ୍ସ- SYBR -20 ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହେବା ଉଚିତ |℃ଅନ୍ଧକାରରେ;ଯଦି ବାରମ୍ବାର ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ, ଏହା 4 ରେ ମଧ୍ୟ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇପାରେ |Short ସ୍ୱଳ୍ପକାଳୀନ ସଂରକ୍ଷଣ ପାଇଁ (୧୦ ଦିନ ମଧ୍ୟରେ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ) |
ପ୍ରକୃତ ସମୟ PCR ପ୍ରାଥମିକ ଡିଜାଇନ୍ ନୀତି |
ଫରୱାର୍ଡ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ରିଭର୍ସ ପ୍ରାଇମର୍ |
ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପାଇଁ, ପ୍ରାଇମର୍ ଡିଜାଇନ୍ ବହୁତ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ |ପ୍ରାଥମିକଗୁଡିକ PCR ବିସ୍ତାରର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ସହିତ ଜଡିତ, ଏବଂ ନିମ୍ନଲିଖିତ ନୀତିଗୁଡିକ ସହିତ ଡିଜାଇନ୍ କରାଯାଇପାରିବ:
ପ୍ରାଥମିକ ଲମ୍ବ: 18-30bp
GC ବିଷୟବସ୍ତୁ: 40-60% |
Tm ମୂଲ୍ୟ: ପ୍ରାଇମର୍ ଡିଜାଇନ୍ ସଫ୍ଟୱେର୍, ଯେପରିକି ପ୍ରାଇମର୍ 5, ପ୍ରାଇମରର Tm ମୂଲ୍ୟ ଦେଇପାରେ |ଅପଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ଏବଂ ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପ୍ରାଇମର୍ ଗୁଡିକର Tm ମୂଲ୍ୟ ଯଥାସମ୍ଭବ ନିକଟତର ହେବା ଉଚିତ |Tm ଗଣନା ସୂତ୍ର ମଧ୍ୟ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ: Tm = 4 ° C (G + C) + 2 ° C (A + T) |PCR କାର୍ଯ୍ୟ କରିବାବେଳେ, 5 ° C ର ପ୍ରାଥମିକ Tm ମୂଲ୍ୟରୁ ଏକ ତାପମାତ୍ରା ସାଧାରଣତ the ଆନ୍ଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରା ଭାବରେ ମନୋନୀତ ହୁଏ (ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରାର ଅନୁରୂପ ବୃଦ୍ଧି PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ବ increase ାଇପାରେ) |
ପ୍ରାଥମିକ ଏବଂ PCR ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକ:
ଡିଜାଇନ୍ ପ୍ରାଇମର୍ PCR ବିସ୍ତାରଣ ଉତ୍ପାଦର ଦ length ର୍ଘ୍ୟ ବିଶେଷତ 100 100-150bp ଅଟେ |
ଟେମ୍ପଲେଟର ଦ୍ secondary ିତୀୟ ଗଠନମୂଳକ କ୍ଷେତ୍ରରେ ଡିଜାଇନ୍ ପ୍ରାଇମର୍ ଗୁଡିକ ଯଥାସମ୍ଭବ ଏଡାଇବା ଉଚିତ୍ |
ଅପଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ଏବଂ ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପ୍ରାଇମର୍ ଗୁଡିକର 3 ′ ଶେଷ ମଧ୍ୟରେ 2 କିମ୍ବା ଅଧିକ ସଂପୃକ୍ତ ଆଧାର ଗଠନରୁ ଦୂରେଇ ରୁହନ୍ତୁ |
ପ୍ରାଥମିକ 3 ′ ଟର୍ମିନାଲ୍ ବେସ୍ କ୍ରମାଗତ 3 ଅତିରିକ୍ତ G କିମ୍ବା C ସହିତ ଉପସ୍ଥିତ ହୋଇପାରିବ ନାହିଁ |
ପ୍ରାଥମିକମାନେ ନିଜେ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଗଠନ କରିପାରିବେ ନାହିଁ, ନଚେତ୍ ଏକ ହେୟାରପିନ ଗଠନ ହେବ, ଯାହା PCR ଏମ୍ପଲିଫିକେସନ୍ କୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିବ |
ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମରେ ATCG କୁ ଯଥାସମ୍ଭବ ସମାନ ଭାବରେ ବଣ୍ଟନ କରାଯିବା ଉଚିତ ଏବଂ 3 ′ ଟର୍ମିନାଲ୍ ଆଧାରକୁ T ଭାବରେ ଏଡାଇବା ଉଚିତ୍ |
ପରିଶିଷ୍ଠ 1 ： ସେଲ୍ ପ୍ରତ୍ୟକ୍ଷ RT-qPCR କିଟ୍ ଉପାଦାନ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟ ପ୍ୟାକ୍ |
1.ସେଲ୍ ଲାଇସିସ୍ ସମାଧାନ |
|
| |||
| କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | (24-ଭଲ ଲାଇସିସ୍ ସିଷ୍ଟମ୍ / ଭଲ) | DRT-01011-A1 | | DRT-01011-A2 | | |
| 100 ଟି | 500 ଟି | ||
| ଭାଗମୁଁ | ବଫର୍ CL | 20 ମି.ଲି. | 100 ମି.ଲି. |
| ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ରୋଟେଜ୍ ପ୍ଲସ୍ II | | 400 μl | 1 ମିଲି × 2 | |
| ବଫର୍ ଏସ | 1 ମିଲି × 2 | ୧୦ ମି.ଲି. | |
| ଭାଗII | DNA ଏରେଜର | | 400 μl | 1 ମିଲି × 2 |
2.RT ମିଶ୍ରଣ |
|
| |
| କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | (20 μl ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ) | DRT-01011-B1 | |
| 200 ଟି | |
| 5 × ସିଧାସଳଖ ଆରଟି ମିକ୍ସ | | 800 μl |
| RNase-free ddH2O | 1.7 ମିଲି × 2 |
|
| ||
| କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | (20 μl ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ) | DRT-01011-C1 | | DRT-01011-C2 |
| 200 ଟି | 1000 ଟି | |
| 2 × ସିଧାସଳଖ qPCR ମିକ୍ସ- SYBR | | 1 ମିଲି × 2 | 1.7 ମିଲି × 6 |
| 50 × ROX ସନ୍ଦର୍ଭ ରଙ୍ଗ | | 40 μl | 200 μl |
| RNase-free ddH2O | 1.7 ମିଲି | ୧୦ ମି.ଲି. |
ନିର୍ଦ୍ଦେଶନାମା:
