କ No ଣସି ବିସ୍ତାର ସଙ୍କେତ ନାହିଁ |

1. କିଟ୍ ରେ ଥିବା Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ ଅନୁପଯୁକ୍ତ ଷ୍ଟୋରେଜ୍ କିମ୍ବା କିଟ୍ ଅବଧି ସମାପ୍ତ ହେତୁ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ହରାଇଥାଏ |
ସୁପାରିଶ: କିଟ୍ ର ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ;PCR ସିଷ୍ଟମରେ ଉପଯୁକ୍ତ ପରିମାଣର Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ ଯୋଡନ୍ତୁ କିମ୍ବା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ଏକ ନୂତନ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR କିଟ୍ କ୍ରୟ କରନ୍ତୁ |

2. ଡିଏନ୍ଏ ଟେମ୍ପଲେଟରେ ଟ୍ୟାକ୍ ଡିଏନ୍ଏ ପଲିମେରେଜ୍ ର ଅନେକ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଅଛି |
ପରାମର୍ଶ: ଟେମ୍ପଲେଟକୁ ପୁନ ur ନିର୍ମାଣ କରନ୍ତୁ କିମ୍ବା ବ୍ୟବହୃତ ଟେମ୍ପଲେଟର ପରିମାଣକୁ ହ୍ରାସ କରନ୍ତୁ |

3. Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ଉପଯୁକ୍ତ ନୁହେଁ |
ସୁପାରିଶ: ଆମେ ପ୍ରଦାନ କରୁଥିବା 2 × ପ୍ରକୃତ PCR ମିଶ୍ରଣର Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ହେଉଛି 3.5 ମି।ତଥାପି, କିଛି ବିଶେଷ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପାଇଁ, Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ଅଧିକ ହୋଇପାରେ |ତେଣୁ, ଆପଣ Mg2 + ଏକାଗ୍ରତାକୁ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ କରିବାକୁ ସିଧାସଳଖ MgCl2 ଯୋଗ କରିପାରିବେ |ଅପ୍ଟିମାଇଜେସନ୍ ପାଇଁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଥର Mg2 + 0.5mM ବୃଦ୍ଧି କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |

4. PCR ବିସ୍ତାର ଅବସ୍ଥା ଉପଯୁକ୍ତ ନୁହେଁ, ଏବଂ ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମ କିମ୍ବା ଏକାଗ୍ରତା ଅନୁପଯୁକ୍ତ |
ପରାମର୍ଶ: ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମର ସଠିକତାକୁ ନିଶ୍ଚିତ କର ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଖରାପ ହୋଇନାହିଁ;ଯଦି ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ସିଗ୍ନାଲ୍ ଭଲ ନୁହେଁ, ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରାକୁ ହ୍ରାସ କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରନ୍ତୁ ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଏକାଗ୍ରତାକୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ସଜାଡନ୍ତୁ |

5. ଟେମ୍ପଲେଟର ପରିମାଣ ବହୁତ କମ୍ କିମ୍ବା ଅଧିକ |
ସୁପାରିଶ: ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ର line ଖିକୀକରଣ ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ ଦିଲ୍ୟୁସନ୍ କାର୍ଯ୍ୟ କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ସର୍ବୋତ୍ତମ PCR ପ୍ରଭାବ ସହିତ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଏକାଗ୍ରତା ଚୟନ କରନ୍ତୁ |

NTC ର ଅତ୍ୟଧିକ ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ମୂଲ୍ୟ ଅଛି |

ଅପରେସନ୍ ସମୟରେ ଘଟିଥିବା ରେଜେଣ୍ଟ୍ ପ୍ରଦୂଷଣ |
ସୁପାରିଶ: ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ନୂତନ ରେଜେଣ୍ଟସ୍ ସହିତ ବଦଳାନ୍ତୁ |

2. PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ପ୍ରସ୍ତୁତି ସମୟରେ ପ୍ରଦୂଷଣ ଘଟିଥିଲା ​​|
ସୁପାରିଶ: ଅପରେସନ୍ ସମୟରେ ଆବଶ୍ୟକ ପ୍ରତିରକ୍ଷା ପଦକ୍ଷେପ ନିଅନ୍ତୁ, ଯେପରିକି: ଲାଟେକ୍ସ ଗ୍ଲୋଭସ୍ ପିନ୍ଧିବା, ଏକ ଫିଲ୍ଟର୍ ସହିତ ପାଇପେଟ୍ ଟିପ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବା ଇତ୍ୟାଦି |

3. ପ୍ରାଇମର୍ଗୁଡ଼ିକ ଅବକ୍ଷୟ ହୋଇଛି, ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ଗୁଡ଼ିକର ଅବକ୍ଷୟ ଅଣ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବୃଦ୍ଧି ଘଟାଇବ |
ପରାମର୍ଶ: ପ୍ରାଥମିକଗୁଡିକ ଖରାପ ହୋଇଛି କି ନାହିଁ ତାହା ଜାଣିବା ପାଇଁ SDS-PAGE ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ ଏବଂ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ସେମାନଙ୍କୁ ନୂତନ ପ୍ରାଇମର୍ ସହିତ ବଦଳାନ୍ତୁ |

ପ୍ରାଇମର୍ ଡାଇମର୍ କିମ୍ବା ଅଣ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବିସ୍ତାର |

1. Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ଉପଯୁକ୍ତ ନୁହେଁ |
ସୁପାରିଶ: ଆମେ ପ୍ରଦାନ କରୁଥିବା 2 × ପ୍ରକୃତ PCR EasyTM ମିଶ୍ରଣର Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ହେଉଛି 3.5 ମି।ତଥାପି, କିଛି ବିଶେଷ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପାଇଁ, Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ଅଧିକ ହୋଇପାରେ |ତେଣୁ, ଆପଣ Mg2 + ଏକାଗ୍ରତାକୁ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ କରିବାକୁ ସିଧାସଳଖ MgCl2 ଯୋଗ କରିପାରିବେ |ଅପ୍ଟିମାଇଜେସନ୍ ପାଇଁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଥର Mg2 + 0.5mM ବୃଦ୍ଧି କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |

2. PCR ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରା ବହୁତ କମ୍ ଅଟେ |
ପରାମର୍ଶ: PCR ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରାକୁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଥର 1 ℃ କିମ୍ବା 2 by ବୃଦ୍ଧି କରନ୍ତୁ |

3. PCR ଉତ୍ପାଦ ବହୁତ ଲମ୍ବା ଅଟେ |
ସୁପାରିଶ: ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ଉତ୍ପାଦର ଦ length ର୍ଘ୍ୟ 100-150bp ମଧ୍ୟରେ ହେବା ଉଚିତ, 500bp ରୁ ଅଧିକ ନୁହେଁ |

4. ପ୍ରାଇମର୍ଗୁଡ଼ିକ ଅବକ୍ଷୟ ହୋଇଛି, ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ଗୁଡ଼ିକର ଅବକ୍ଷୟ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବିସ୍ତାରର ରୂପ ଧାରଣ କରିବ |
ପରାମର୍ଶ: ପ୍ରାଥମିକଗୁଡିକ ଖରାପ ହୋଇଛି କି ନାହିଁ ତାହା ଜାଣିବା ପାଇଁ SDS-PAGE ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ ଏବଂ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ସେମାନଙ୍କୁ ନୂତନ ପ୍ରାଇମର୍ ସହିତ ବଦଳାନ୍ତୁ |

5. PCR ସିଷ୍ଟମ୍ ଅନୁପଯୁକ୍ତ, କିମ୍ବା ସିଷ୍ଟମ୍ ବହୁତ ଛୋଟ |
ପରାମର୍ଶ: PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ବହୁତ ଛୋଟ, ଚିହ୍ନଟ ସଠିକତା ହ୍ରାସ କରିବ |ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପରୀକ୍ଷଣକୁ ପୁନ run ଚଲାଇବା ପାଇଁ ପରିମାଣିକ PCR ଯନ୍ତ୍ର ଦ୍ୱାରା ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଥିବା ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ବ୍ୟବହାର କରିବା ସର୍ବୋତ୍ତମ |

ପରିମାଣିକ ମୂଲ୍ୟଗୁଡ଼ିକର ଖରାପ ପୁନରାବୃତ୍ତି |

1. ଯନ୍ତ୍ରଟି ତ୍ରୁଟିପୂର୍ଣ୍ଣ ଅଟେ |
ପରାମର୍ଶ: ଯନ୍ତ୍ରର ପ୍ରତ୍ୟେକ PCR ଛିଦ୍ର ମଧ୍ୟରେ ତ୍ରୁଟି ହୋଇପାରେ, ଫଳସ୍ୱରୂପ ତାପମାତ୍ରା ପରିଚାଳନା କିମ୍ବା ଚିହ୍ନଟ ସମୟରେ ଖରାପ ପୁନ oduc ପ୍ରବୃତ୍ତି |ଦୟାକରି ସଂପୃକ୍ତ ଯନ୍ତ୍ରର ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ ଯାଞ୍ଚ କରନ୍ତୁ |

2. ନମୁନା ଶୁଦ୍ଧତା ଭଲ ନୁହେଁ |
ସୁପାରିଶ: ଅଶୁଦ୍ଧ ନମୁନାଗୁଡିକ ପରୀକ୍ଷଣର ଖରାପ ପୁନ oduc ପ୍ରବୃତ୍ତି ଆଣିବ, ଯେଉଁଥିରେ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଗୁଡିକର ଶୁଦ୍ଧତା ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ |ଟେମ୍ପଲେଟକୁ ପୁନ ur ନିର୍ମାଣ କରିବା ସର୍ବୋତ୍ତମ, ଏବଂ ପ୍ରାଥମିକଗୁଡିକ SDS-PAGE ଦ୍ୱାରା ସର୍ବୋତ୍ତମ ଭାବରେ ଶୁଦ୍ଧ ହୋଇଛି |

3. PCR ସିଷ୍ଟମ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତି ଏବଂ ସଂରକ୍ଷଣ ସମୟ ବହୁତ ଲମ୍ବା ଅଟେ |
ପରାମର୍ଶ: ପ୍ରସ୍ତୁତି ପରେ ତୁରନ୍ତ PCR ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ସିଷ୍ଟମ୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ଏହାକୁ ଅଧିକ ସମୟ ପାଇଁ ଛାଡି ଦିଅନ୍ତୁ ନାହିଁ |

4. PCR ବିସ୍ତାର ଅବସ୍ଥା ଉପଯୁକ୍ତ ନୁହେଁ, ଏବଂ ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମ କିମ୍ବା ଏକାଗ୍ରତା ଅନୁପଯୁକ୍ତ |
ପରାମର୍ଶ: ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମର ସଠିକତାକୁ ନିଶ୍ଚିତ କର ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଖରାପ ହୋଇନାହିଁ;ଯଦି ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ସିଗ୍ନାଲ୍ ଭଲ ନୁହେଁ, ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରାକୁ ହ୍ରାସ କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରନ୍ତୁ ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଏକାଗ୍ରତାକୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ସଜାଡନ୍ତୁ |

5. PCR ସିଷ୍ଟମ୍ ଅନୁପଯୁକ୍ତ, କିମ୍ବା ସିଷ୍ଟମ୍ ବହୁତ ଛୋଟ |
ପରାମର୍ଶ: PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ବହୁତ ଛୋଟ, ଚିହ୍ନଟ ସଠିକତା ହ୍ରାସ କରିବ |ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପରୀକ୍ଷଣକୁ ପୁନ run ଚଲାଇବା ପାଇଁ ପରିମାଣିକ PCR ଯନ୍ତ୍ର ଦ୍ୱାରା ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଥିବା ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ବ୍ୟବହାର କରିବା ସର୍ବୋତ୍ତମ |