(96-କୂଅ) କୁଇକ୍ ସହଜ ସେଲ୍ ପ୍ରତ୍ୟକ୍ଷ RT-qPCR କିଟ୍ - ଟକମାନ୍ |
ବର୍ଣ୍ଣନା
The(96-କୂଅ) କୁଇକ୍ ସହଜ |TM ସେଲ୍ ସିଧାସଳଖ RT-qPCR କିଟ୍ |-ତକମାନ |ପ୍ରଦାନ କରେ |ଏକ ଅନନ୍ୟ ଲାଇସିସ୍ ବଫର୍ ସିଷ୍ଟମ୍ |to ଶୀଘ୍ର RNA ମୁକ୍ତ କରନ୍ତୁ |ସଂସ୍କୃତ କକ୍ଷରୁRT-qPCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପାଇଁ ନମୁନା, ସମୟ ସାପେକ୍ଷ ଏବଂ ପରିଶ୍ରମୀକୁ ଦୂର କରିଥାଏ |RNA ଶୁଦ୍ଧକରଣ ପ୍ରକ୍ରିୟା, ଏବଂ ଆବଶ୍ୟକ RNA ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପାଇବାକୁ କେବଳ 7 ମିନିଟ୍ ସମୟ ନେଇଥାଏ |The5 × ସିଧାସଳଖ ଆରଟି ମିକ୍ସ |ଏବଂ2 × ସିଧାସଳଖ qPCR ମିକ୍ସ- SYBR |ବାକ୍ସରେ ପ୍ରଦତ୍ତ ଶୀଘ୍ର ଏବଂପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଭାବରେ ପ୍ରକୃତ-ସମୟ ପରିମାଣ ପ୍ରାପ୍ତ କରନ୍ତୁ |PCR ଫଳାଫଳ |
5 × ସିଧାସଳଖ ଆରଟି ମିକ୍ସ ଏବଂ 2 × ସିଧାସଳଖ qPCR ମିକ୍ସ-ଟାକମ୍ୟାନ୍ଙ୍କର ଦୃ strong ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ସହନଶୀଳତା ଅଛି, ଏବଂ ଦକ୍ଷତାର ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବିସ୍ତାର ପାଇଁ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ପରୀକ୍ଷଣ କରିବାକୁ ନମୁନାର ଲାଇସେଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରିପାରିବେ |ରେଜେଣ୍ଟରେ RNA ପାଇଁ ଉଚ୍ଚ ସ୍ନେହ ସହିତ ଫୋରେଜେନ୍ ଅନନ୍ୟ ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍, ଏବଂ ହଟ୍ D- Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍, dNTP, MgCl ଧାରଣ କରେ |2 , ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବଫର୍, PCR ଅପ୍ଟିମାଇଜର୍ ଏବଂ ଷ୍ଟାବିଲାଇଜର୍, ଏବଂ ନମୁନାକୁ ଶୀଘ୍ର, ସହଜ ଏବଂ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ଚିହ୍ନଟ କରିବା ପାଇଁ ଲାଇସିସ୍ ବଫର୍ ସହିତ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ ଏବଂ ଏହାର ଉଚ୍ଚ ସମ୍ବେଦନଶୀଳତା, ଦୃ strong ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଏବଂ ଉତ୍ତମ ସ୍ଥିରତାର ଗୁଣ ରହିଛି |
କିଟ୍ 96-ସୁସଜ୍ଜିତ କୋଷଗୁଡ଼ିକର ମାଇକ୍ରୋ-ସିଷ୍ଟମ୍ ଲାଇସିସ୍ ପାଇଁ ଉଦ୍ଦିଷ୍ଟ, ଏବଂ ଏହାର ଭଲ ସମାନତା ଏବଂ ସ୍ଥିରତା ଅଛି;କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡିକ 96 ଲାଇସିସ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା, 96 ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଏବଂ 96 × 2 qPCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଦାନ କରିଥାଏ, ଯାହା 96-କୂଅ କୋଷ ପ୍ଲେଟକୁ ଏକ ଥର ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ପୂରଣ କରିପାରିବ, ବାରମ୍ବାର ଖୋଲିବା, ଫ୍ରିଜ୍ ଏବଂ ଥୋଇବା ଏବଂ ପୁନ ag କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତାର ଅବକ୍ଷୟ ହେତୁ ପ୍ରଦୂଷଣକୁ ଏଡାଇ ଦେଇପାରେ |
କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
କିଟ୍ ରଚନା | ( 50 μL ଲାଇସିସ୍ ସିଷ୍ଟମ୍ / ୨ |0 μLRT ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ / 20μL qPCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ |) | DRT-03021 | ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ | | |
96T | |||
ଭାଗI | ବଫର୍ |CL | 5 ମି.ଲି. | କକ୍ଷଲିସିସ୍ |
ଫରେଗେନ୍ |ପ୍ରୋଟେଜ୍ ପ୍ଲସ୍ II | 100 μL | ||
ବଫର୍ |ST | 500 μL | ||
ଭାଗ II | DNA |ଇରେଜର | 100 μL | |
5 × ସିଧାସଳଖ ଆରଟି ମିକ୍ସ | | 400 μL | RT | |
2 × ସିଧାସଳଖ qPCR ମିଶ୍ରଣ |-ଟାକମାନ | | 1 ମିL × 2 | qPCR | |
50 × ROX ସନ୍ଦର୍ଭ ରଙ୍ଗ | | 400µL | ||
RNase- ମାଗଣା |ddH2 O | 1.7 ମି |
| |
Manual | 1 ଖଣ୍ଡ | 1 ସେବା |
*: ଲାଇସିସ୍ ରିଜେଣ୍ଟ୍ ଡିଏନ୍ଏ ଏରେଜର କିଟ୍ ର ଦ୍ୱିତୀୟ ଭାଗରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ;ସେଲ୍ ଲାଇସିସ୍, ଆରଟିଓ, ଏବଂ qPCR ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ ପୃଥକ ଭାବରେ କ୍ରୟ କରାଯାଇପାରିବ |
ବ Features ଶିଷ୍ଟ୍ୟ ଏବଂ ସୁବିଧା
■ସରଳ ଏବଂ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ: ସେଲ୍ ସିଧାସଳଖ ଆରଟିଓ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ସହିତ, RNA ନମୁନାକୁ ମାତ୍ର 7 ମିନିଟରେ ମିଳିପାରିବ |
10 ନମୁନା ଚାହିଦା ଛୋଟ, ଯେହେତୁ 10 ଟି କୋଷ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇପାରିବ |
■ ଉଚ୍ଚ ଥ୍ରୋପପୁଟ: ଏହା 384, 96, 24, 12, 6-କୂଅ ପ୍ଲେଟରେ ସଂସ୍କୃତ କୋଷଗୁଡ଼ିକରେ ଶୀଘ୍ର RNA ଚିହ୍ନଟ କରିପାରିବ |
■ ଡିଏନ୍ଏ ଇରେଜର ଶୀଘ୍ର ମୁକ୍ତ ହୋଇଥିବା ଜେନୋମଗୁଡ଼ିକୁ ଅପସାରଣ କରିପାରିବ, ପରବର୍ତ୍ତୀ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଫଳାଫଳ ଉପରେ ଏହାର ପ୍ରଭାବକୁ ବହୁ ମାତ୍ରାରେ ହ୍ରାସ କରିପାରିବ |
RT ଅପ୍ଟିମାଇଜଡ୍ RT ଏବଂ qPCR ସିଷ୍ଟମ୍ ଦୁଇ-ଷ୍ଟେପ୍ RT-PCR ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ କୁ ଅଧିକ କ୍ରିୟାଶୀଳ ଏବଂ PCR କୁ ଅଧିକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ କରିଥାଏ ଏବଂ RT-qPCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରତିରୋଧକ ପାଇଁ ଅଧିକ ପ୍ରତିରୋଧୀ କରିଥାଏ |
କିଟ୍ ପ୍ରୟୋଗ |
ପ୍ରୟୋଗର ପରିସର: ସଂସ୍କୃତ କକ୍ଷ |
- ନମୁନା ଲାଇସିସ୍ ଦ୍ୱାରା ପ୍ରକାଶିତ RNA: କେବଳ ଏହି କିଟ୍ ର RT-qPCR ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପାଇଁ ପ୍ରଯୁଜ୍ୟ |
- କିଟ୍ ନିମ୍ନଲିଖିତ ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରିବ: ଜିନ୍ ଏକ୍ସପ୍ରେସନ୍ ଆନାଲିସିସ୍, siRNA- ମଧ୍ୟସ୍ଥ ଜିନ୍ ସିଲିଂ ପ୍ରଭାବର ଯାଞ୍ଚ, ଡ୍ରଗ୍ ସ୍କ୍ରିନିଂ ଇତ୍ୟାଦି |
ସଂରକ୍ଷଣ ଏବଂ ସେଲଫ୍ ଲାଇଫ୍ |
ଏହି କିଟ୍ ର ପ୍ରଥମ ଭାଗ 4 ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହେବା ଉଚିତ୍ |℃;ଭାଗ II -20 at ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହେବା ଉଚିତ |
ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ରୋଟେଜ୍ ପ୍ଲସ୍ II କୁ 4 ରେ ସଂରକ୍ଷଣ କରାଯିବା ଉଚିତ୍ |℃, -20 at ରେ ଫ୍ରିଜ୍ କରନ୍ତୁ ନାହିଁ |
Reagent 2×ସିଧାସଳଖ qPCR ମିକ୍ସ-ଟାକମାନ -20 ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହେବା ଉଚିତ |℃ଅନ୍ଧକାରରେ;ଯଦି ବାରମ୍ବାର ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ, ଏହା 4 ରେ ମଧ୍ୟ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇପାରେ |Short ସ୍ୱଳ୍ପକାଳୀନ ସଂରକ୍ଷଣ ପାଇଁ (୧୦ ଦିନ ମଧ୍ୟରେ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ) |
ପ୍ରକୃତ ସମୟ PCR ପ୍ରାଥମିକ ଡିଜାଇନ୍ ନୀତି |
ଫରୱାର୍ଡ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ରିଭର୍ସ ପ୍ରାଇମର୍ |
ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପାଇଁ, ପ୍ରାଇମର୍ ଡିଜାଇନ୍ ବହୁତ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ |ପ୍ରାଥମିକଗୁଡିକ PCR ବିସ୍ତାରର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ସହିତ ଜଡିତ, ଏବଂ ନିମ୍ନଲିଖିତ ନୀତିଗୁଡିକ ସହିତ ଡିଜାଇନ୍ କରାଯାଇପାରିବ:
- ପ୍ରାଥମିକ ଲମ୍ବ: 18-30bp
- GC ବିଷୟବସ୍ତୁ: 40-60% |
- Tm ମୂଲ୍ୟ: ପ୍ରାଇମର୍ ଡିଜାଇନ୍ ସଫ୍ଟୱେର୍, ଯେପରିକି ପ୍ରାଇମର୍ 5, ପ୍ରାଇମରର Tm ମୂଲ୍ୟ ଦେଇପାରେ |ଅପଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ଏବଂ ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପ୍ରାଇମର୍ ଗୁଡିକର Tm ମୂଲ୍ୟ ଯଥାସମ୍ଭବ ନିକଟତର ହେବା ଉଚିତ |Tm ଗଣନା ସୂତ୍ର ମଧ୍ୟ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ: Tm = 4 ° C (G + C) + 2 ° C (A + T) |PCR କାର୍ଯ୍ୟ କରିବାବେଳେ, 5 ° C ର ପ୍ରାଥମିକ Tm ମୂଲ୍ୟରୁ ଏକ ତାପମାତ୍ରା ସାଧାରଣତ the ଆନ୍ଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରା ଭାବରେ ମନୋନୀତ ହୁଏ (ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରାର ଅନୁରୂପ ବୃଦ୍ଧି PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟାର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା ବ increase ାଇପାରେ) |
- ପ୍ରାଥମିକ ଏବଂ PCR ଉତ୍ପାଦଗୁଡିକ:
- ଡିଜାଇନ୍ ପ୍ରାଇମର୍ PCR ବିସ୍ତାରଣ ଉତ୍ପାଦର ଦ length ର୍ଘ୍ୟ ବିଶେଷତ 100 100-150bp ଅଟେ |
- ଟେମ୍ପଲେଟର ଦ୍ secondary ିତୀୟ ଗଠନମୂଳକ କ୍ଷେତ୍ରରେ ଡିଜାଇନ୍ ପ୍ରାଇମର୍ ଗୁଡିକ ଯଥାସମ୍ଭବ ଏଡାଇବା ଉଚିତ୍ |
- ଅପଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ଏବଂ ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପ୍ରାଇମର୍ ଗୁଡିକର 3 ′ ଶେଷ ମଧ୍ୟରେ 2 କିମ୍ବା ଅଧିକ ସଂପୃକ୍ତ ଆଧାର ଗଠନରୁ ଦୂରେଇ ରୁହନ୍ତୁ |
- ପ୍ରାଥମିକ 3 ′ ଟର୍ମିନାଲ୍ ବେସ୍ କ୍ରମାଗତ 3 ଅତିରିକ୍ତ G କିମ୍ବା C ସହିତ ଉପସ୍ଥିତ ହୋଇପାରିବ ନାହିଁ |
- ପ୍ରାଥମିକମାନେ ନିଜେ ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟାରୀ ଗଠନ କରିପାରିବେ ନାହିଁ, ନଚେତ୍ ଏକ ହେୟାରପିନ ଗଠନ ହେବ, ଯାହା PCR ଏମ୍ପଲିଫିକେସନ୍ କୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିବ |
- ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମରେ ATCG କୁ ଯଥାସମ୍ଭବ ସମାନ ଭାବରେ ବଣ୍ଟନ କରାଯିବା ଉଚିତ ଏବଂ 3 ′ ଟର୍ମିନାଲ୍ ଆଧାରକୁ T ଭାବରେ ଏଡାଇବା ଉଚିତ୍ |
ପରିଶିଷ୍ଠ1 : Cell DirectRT-qPCR | କିଟ୍ କମ୍ପୋନେନ୍ |t ସପ୍ଲିମେଣ୍ଟ ପ୍ୟାକ୍ |
1. ଲାଇସିସ୍ ସମାଧାନକୁ ସେଲ୍ କରନ୍ତୁ |
ସେଲ୍ ଲାଇସିସ୍ ସମାଧାନ | | |||
କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | (24-ଭଲ ଲାଇସିସ୍ ସିଷ୍ଟମ୍ / ଭଲ) | DRT-01011-A1 | | DRT-01011-A2 | | |
100 ଟି | 500 ଟି | ||
ଭାଗମୁଁ | ବଫର୍ CL | 20 ମି.ଲି. | 100 ମି.ଲି. |
ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ରୋଟେଜ୍ ପ୍ଲସ୍ II | | 400 μl | 1 ମିଲି × 2 | |
ବଫର୍ ଏସ | 1 ମିଲି × 2 | ୧୦ ମି.ଲି. | |
ଭାଗII | DNA ଏରେଜର | | 400 μl | 1 ମିଲି × 2 |
ଆରଟି ମିକ୍ସ | | |
କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | (20 μl ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ) | DRT-01011-B1 | |
200 ଟି | |
5 × ସିଧାସଳଖ ଆରଟି ମିକ୍ସ | | 800 μl |
RNase-free ddH2O | 1.7 ମିଲି × 2 |
qPCR ମିଶ୍ରଣ | | ||
କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ | (20 μl ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 ଟି | 1000 ଟି | |
2 × ସିଧାସଳଖ qPCR ମିକ୍ସ-ଟାକମ୍ୟାନ୍ | | 1 ମିଲି × 2 | 1.7 ମିଲି × 6 |
20 × ROX ସନ୍ଦର୍ଭ ରଙ୍ଗ | | 40 μl | 200 μl |
RNase-free ddH2O | 1.7 ମିଲି | ୧୦ ମି.ଲି. |
ନିର୍ଦ୍ଦେଶନାମା: