ସିଧାସଳଖ RT-qPCR କିଟ୍ |
ବର୍ଣ୍ଣନା
ସିଧାସଳଖ RT-qPCR କିଟ୍ ପୃଥକ ଭାବରେ ପ୍ୟାକେଜ୍ ହୋଇଥିବା RT-qPCR ବଫର୍ ଏବଂ ଉଚ୍ଚ ଦକ୍ଷ ଏନଜାଇମ୍ ପ୍ରଦାନ କରେ |ମିଶ୍ରଣ (Taq 、 M-MLV 、 RI) back ବ୍ୟାକ୍-ଏଣ୍ଡ କିଟ୍ ଏବଂ ସିଷ୍ଟମ୍ ତିଆରି ପାଇଁ ଏହା ସୁବିଧାଜନକ |ସରଳ ଯାଞ୍ଚ ମଧ୍ୟରେ ଆଡଜଷ୍ଟେସନ୍
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ
500T, 50,000T
କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
କିଟ୍ ବିଷୟବସ୍ତୁ | (20 μL ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
500 ଟି | 50,000 T | |
ସିଧାସଳଖ ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ | | 500 μL× 1 | 50 ମି.ଲି.× 1 |
2 × ସିଧାସଳଖ RT-qPCR ବଫର୍ | | 1 ମି× 5 | 500 ମି.ଲି.× 1 |
ନିର୍ଦ୍ଦେଶ | 1 | 1 |
ଅପରେଟିଂ ଷ୍ଟେପସ୍
ପୁନ ag ପ୍ରସ୍ତୁତି ପୂର୍ବରୁ, କିଟ୍ ରେ ଥିବା ସମସ୍ତ ରେଜେଣ୍ଟଗୁଡିକ ରୁମ୍ ତାପମାତ୍ରାରେ ଥୋଇ ଦିଆଯିବା ଉଚିତ୍ ଏବଂ ଧୀରେ ଧୀରେ ମିଶ୍ରିତ ହେବା ଉଚିତ |
A: ପ୍ରସ୍ତୁତ କର | of ଟେମ୍ପଲେଟ୍ | ଏବଂ reagent
1. ପ୍ରସ୍ତୁତ RNA ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ (RNA ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ବାହାର ଏବଂ ଶୁଦ୍ଧ କରିବା ପାଇଁ ଫୋରେଜେନ୍ ଟୋଟାଲ୍ RNA ଆଇସୋଲେସନ୍ କିଟ୍ ସିରିଜ୍ କିଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି) କିମ୍ବା ନମୁନା କ୍ରାକିଂ ଉତ୍ପାଦ (ଫୋରେଜେନ୍ ଲାଇସିସ୍ ସିଷ୍ଟମ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି), ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରାଇମର୍ (10 μM) ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ପ୍ରଯୁଜ୍ୟ ଉପଯୋଗୀ ସାମଗ୍ରୀ, ଉପକରଣ |
2. 2 × ସିଧାସଳଖ RT-qPCR ବଫର୍, RNase- ମୁକ୍ତ ddH2O ଏବଂ 20 × ROX ରେଫରେନ୍ସ ରଙ୍ଗ ରଖନ୍ତୁ (ଯଦି ଏହା ହୁଏ |'ବରଫ ସହିତ ବାକ୍ସରେ, ଏହିଗୁଡିକ ପ୍ରାକୃତିକ ଭାବରେ ତରଳିଯାଏ ଏବଂ ଧୀରେ ଧୀରେ ମିଶ୍ରିତ ହୁଏ |
B: ପ୍ରସ୍ତୁତ କର | of RT-qPCR | ସିଷ୍ଟମ୍
ସାରଣୀ 1 : ପ୍ରସ୍ତୁତ କର | of RT-qPCR | system
ଉପାଦାନ | | ଭଲ୍ୟୁମ୍ | ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତା | |
2 × ସିଧାସଳଖ RT-qPCR ବଫର୍ | | 10 μL | 1 × |
ସିଧାସଳଖ ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ | | ୧μL | |
ଅଗ୍ରଗାମୀ ପ୍ରାଥମିକ (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
ଓଲଟା ପ୍ରାଇମର୍ (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
ଅନୁସନ୍ଧାନ (4 μM) | ୧μL | 200nM |
ଟେମ୍ପଲେଟ୍ (RNA କିମ୍ବା Lysate) | X μL | |
20 × ROX ସନ୍ଦର୍ଭ ରଙ୍ଗ | | - | 1* |
RNase-FreeddH2O | | (6.4-X) μL | | |
ସମୁଦାୟ ଭଲ୍ୟୁମ୍ | 20μL |
C: ସେଟ୍ କରନ୍ତୁ | the RT-qPC |R ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରୋଗ୍ରାମ୍
ସାରଣୀ 2 : RT-qPCR | reaction ପ୍ରୋଗ୍ରାମ୍ ସେଟିଂ (ପାଇଁ ଉଦାହରଣ |: ଦୁଇଟି-ପଦାଙ୍କ ପଦ୍ଧତି)
ପଦାଙ୍କ | ତାପମାତ୍ରା | ସମୟ | ଚକ୍ରଗୁଡିକ | ବିଷୟବସ୍ତୁ | |
1 | 50 ℃ | 15 ମିନିଟ୍ | 1* | 1 | ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ | |
2 | 95 ℃ | 1 ମିନିଟ୍ | 1 | ପୂର୍ବ-ବିଭାଜନ | | |
3 | 95 ℃ | 10 ସେକେଣ୍ଡ୍ | 40-45 | ଅବନତି | |
60 ℃ | 30 ସେକେଣ୍ଡ୍ 2 * | ଆନ୍ନାଲ୍ / ଏକ୍ସଟେନ୍ସନ୍ | |
ସଂରକ୍ଷଣ ଏବଂ ସେଲଫ୍ ଲାଇଫ୍ |
-କିଟ୍ -20 ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହେବା ଉଚିତ୍ |± 5℃।ବ valid ଧତା ଅବଧି ହେଉଛି 12 ମାସ |
ବାରମ୍ବାର ଫ୍ରିଜ୍-ଥ୍ ଚକ୍ର (<5 ଚକ୍ର) ଠାରୁ ଦୂରେଇ ରୁହନ୍ତୁ |