ForeDirect RT-qPCR କିଟ୍ |
କିଟ୍ ବର୍ଣ୍ଣନା:
◮RNA ଶୁଦ୍ଧ ପ୍ରକ୍ରିୟା ବିନା ସ୍ ab ାବ୍ ସଂଗ୍ରହରୁ RNA ସିଧାସଳଖ ରିଅଲ୍-ଟାଇମ୍ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ପାଇଁ |ଏହି କିଟ୍ ଏକ ଘଣ୍ଟା ମଧ୍ୟରେ qRT-PCR ଚକ୍ର ସମାପ୍ତ କରେ |ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ ହେଉଛି ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍, ହଟ୍-ଷ୍ଟାର୍ଟ ଟ୍ୟାକ୍ DNA ପଲିମେରେଜ୍, RNase ଇନହିବିଟରର ଏକ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ ମିଶ୍ରଣ |ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବଫର୍ ସମସ୍ତ ଆବଶ୍ୟକୀୟ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକୁ ଧାରଣ କରିଥାଏ, ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ ବଫର୍ ଉପାଦାନଗୁଡିକ, Mg |2+, dUTP, ଏବଂ dNTPs |
ବର୍ଣ୍ଣନା
ForeDirect RT-qPCR କିଟ୍ RNA ଶୁଦ୍ଧ ପ୍ରକ୍ରିୟା ବିନା ସ୍ୱାବ୍ ସଂଗ୍ରହରୁ RNA ସିଧାସଳଖ ରିଅଲ୍-ଟାଇମ୍ ଏମ୍ପ୍ଲାଇସିସ୍ ପାଇଁ ଡିଜାଇନ୍ ହୋଇଛି |ଏହି କିଟ୍ ଏକ ଘଣ୍ଟା ମଧ୍ୟରେ qRT-PCR ଚକ୍ର ସମାପ୍ତ କରେ |ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ ହେଉଛି ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍, ହଟ୍-ଷ୍ଟାର୍ଟ ଟ୍ୟାକ୍ DNA ପଲିମେରେଜ୍, RNase ଇନହିବିଟରର ଏକ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ ମିଶ୍ରଣ |ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବଫର୍ ସମସ୍ତ ଆବଶ୍ୟକୀୟ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକୁ ଧାରଣ କରିଥାଏ, ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ ବଫର୍ ଉପାଦାନଗୁଡିକ, Mg |2+, dUTP, ଏବଂ dNTPs |
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ
100T
କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
| ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ରିଲିଜ୍ ଏଜେଣ୍ଟ | |
| RNA ରକ୍ଷକ | |
| 2 × RT-qPCR ବଫର୍ | |
| ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ (Taq & M-MLV) |
| ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ |
PCR ପ୍ରୟୋଗ |
1. ଥରେ PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଟ୍ୟୁବ୍ ଗୁଡିକ ସଂକ୍ଷେପରେ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗ୍ ହୋଇଗଲେ, ସେମାନଙ୍କୁ ଏମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ଯନ୍ତ୍ରର ନମୁନା ଟ୍ୟାଙ୍କରେ ରଖନ୍ତୁ |
2. ଥର୍ମାଲ୍ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ |
| ପଦାଙ୍କ | ତାପମାତ୍ରା | ସମୟ | ଚକ୍ରଗୁଡିକ | |
| 1 | ଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ | | 50 ℃ | 15 ମିନିଟ୍ | 1 |
| 2 | ପୂର୍ବ-ବିଭାଜନ | | 95 ℃ | 1 ମିନିଟ୍ | 1 |
| 3 | ଅବନତି | 95 ℃ | 10 ସେକେଣ୍ଡ୍ | | 42 |
| 4 | ଆନ୍ନାଲ୍ / ଏକ୍ସଟେନ୍ସନ୍ | | 60 ℃ | 30 ସେକେଣ୍ଡ୍ | | |
ଧ୍ୟାନ ଦିଅନ୍ତୁ:ପ୍ରତ୍ୟେକ ଚକ୍ରର ବିସ୍ତାର ପଦକ୍ଷେପ ପରେ ତୁରନ୍ତ ଫ୍ଲୋରୋସେଣ୍ଟ୍ ସିଗ୍ନାଲ୍ ଚିହ୍ନଟ ହେଲା |
3. ସେଟିଂ ପରେ, ଫାଇଲ୍ ସେଭ୍ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରୋଗ୍ରାମ୍ ଚଲାନ୍ତୁ |
ଅପରେଟିଂ ଷ୍ଟେପସ୍
ପୁନ ag ପ୍ରସ୍ତୁତି ପୂର୍ବରୁ, କିଟ୍ ରେ ଥିବା ସମସ୍ତ ରେଜେଣ୍ଟଗୁଡିକ ରୁମ୍ ତାପମାତ୍ରାରେ ଥୋଇ ଦିଆଯିବା ଉଚିତ୍ ଏବଂ ଧୀରେ ଧୀରେ ମିଶ୍ରିତ ହେବା ଉଚିତ |
ପୁନ ag ପ୍ରସ୍ତୁତି |
1. ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ରିଲିଜ୍ ମିଶ୍ରଣ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ |
| ଉପାଦାନ | | ନମୁନା କିମ୍ବା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ପ୍ରତି ଭଲ୍ୟୁମ୍ | |
| ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଏସିଡ୍ ରିଲିଜ୍ ଏଜେଣ୍ଟ | | 5μL |
| RNA ରକ୍ଷକ | | 0.5 μL |
2. ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ମିଶ୍ରଣ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ |
| ଉପାଦାନ | | ନମୁନା କିମ୍ବା ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ପ୍ରତି ଭଲ୍ୟୁମ୍ | |
| 2 × RT-qPCR ବଫର୍ | | 15 μL |
| ଏନଜାଇମ୍ ମିଶ୍ରଣ (Taq & M-MLV) | 1.5 μL |
| ପ୍ରାଥମିକ ଏବଂ ଅନୁସନ୍ଧାନ | | 1μL |
ସଂରକ୍ଷଣ ଏବଂ ସେଲଫ୍ ଲାଇଫ୍ |
-କିଟ୍ -20 ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହେବା ଉଚିତ୍ |± 5℃।ବ valid ଧତା ଅବଧି ହେଉଛି 12 ମାସ |
ବାରମ୍ବାର ଫ୍ରିଜ୍-ଥ୍ ଚକ୍ର (<5 ଚକ୍ର) ଠାରୁ ଦୂରେଇ ରୁହନ୍ତୁ |
