ଫୋରେସି ଟ୍ୟାକ୍ ଡିଏନ୍ଏ ପଲିମେରେଜ୍ |
ବର୍ଣ୍ଣନା
ଫୋରେସି ଟ୍ୟାକ୍ ଡିଏନ୍ଏ ପଲିମେରେଜ୍ ହେଉଛି ଏକ ନୂତନ ଟ୍ୟାକ୍ ଏନଜାଇମ୍ ଯାହା ଜିନ୍ ରେକମ୍ବିନେସନ୍ ଟେକ୍ନୋଲୋଜି ଦ୍ Es ାରା ଇଚେରିଚିଆ କୋଲି ଇଞ୍ଜିନିୟରିଂ ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆରେ ପ୍ରକାଶିତ |ଏନଜାଇମର ନିଜେ ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ହଟ-ଷ୍ଟାର୍ଟ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଅଛି ଏବଂ ଏହା ପାରମ୍ପାରିକ PCR ଏବଂ qPCR ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇପାରେ |ଏହାର 5 '→ 3' DNA ପଲିମେରେଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଏବଂ 5 '→ 3' ଏକ୍ସୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଅଛି, କିନ୍ତୁ କ 3 ଣସି 3 '→ 5' ଏକ୍ସୋନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ନାହିଁ |
କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
ଉପାଦାନ | | IM-01011 | IM-01012 | IM-01013 |
ଫୋରେସି ଟ୍ୟାକ୍ ଡିଏନ୍ଏ ପଲିମେରେଜ୍ |(5 U / μL) | 5000 U (1 mL) | 50 KU (10 mL) | 500 KU (100 mL) |
2, ଟ୍ୟାକ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବଫର୍ | | 25 mL × 5 | 250 mL × 5 | 500 mL × 25 |
ବ Features ଶିଷ୍ଟ୍ୟ ଏବଂ ସୁବିଧା
- ଉଚ୍ଚ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟତା: ଏନଜାଇମର ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ହଟ-ଷ୍ଟାର୍ଟ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଅଛି |
- ଦ୍ରୁତ ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍: 10 ସେକେଣ୍ଡ୍ / କେବି |
- ଅତ୍ୟଧିକ ଆଡାପ୍ଟେବଲ୍ ଟେମ୍ପଲେଟ୍: ଜିସି ଉଚ୍ଚ ମୂଲ୍ୟ, ବିଭିନ୍ନ କଷ୍ଟସାଧ୍ୟରୁ ବ pl ଼ାଇବା DNA ଟେମ୍ପଲେଟ୍ କୁ ଦକ୍ଷତାର ସହିତ ବ pl ାଇବା ପାଇଁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ |
- ଶକ୍ତିଶାଳୀ ବିଶ୍ୱସ୍ତତା: ସାଧାରଣ ଟ୍ୟାକ୍ ଏନଜାଇମ୍ 6 ଥର |
- ଶକ୍ତିଶାଳୀ ତାପଜ ସ୍ଥିରତା: ଏହାକୁ ଏକ ସପ୍ତାହ ପାଇଁ 37 ° C ରେ ରଖାଯାଇପାରିବ ଏବଂ 90% ରୁ ଅଧିକ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ବଜାୟ ରଖିବ |
କିଟ୍ ପ୍ରୟୋଗ |
ବିଭିନ୍ନ PCR / qPCR ସିଷ୍ଟମ୍ ଏବଂ ସିଧାସଳଖ PCR ସିଷ୍ଟମ୍ |
DNA ଖଣ୍ଡଗୁଡ଼ିକର PCR ବିସ୍ତାର |
DNA ଲେବେଲିଂ |
DNA କ୍ରମ |
PCR A- ଲାଞ୍ଜ |
U ସଂଜ୍ଞା
1U: 10 nmol deoxynucleotides କୁ ଏସିଡ୍-ଅବିସ୍ମରଣୀୟ ପଦାର୍ଥରେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରିବା ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ ଏନଜାଇମର ପରିମାଣ 74 ° C ରେ 30 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ସକ୍ରିୟ ସଲମାନ ଶୁକ୍ରାଣୁ DNA ବ୍ୟବହାର କରି ଟେମ୍ପଲେଟ୍ / ପ୍ରାଇମର୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରେ |
ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଅବସ୍ଥା
ତାପମାତ୍ରା | ସମୟ | ଚକ୍ର |
37 ° C | 5 ମିନିଟ୍ | 1 |
94 ° C | 5 ମିନିଟ୍ | 1 |
94 ° C | 10 ସେକେଣ୍ଡ୍ | 35 |
60 ° C | 10 ସେକେଣ୍ଡ୍ | |
72 ° C | 20 ସେକେଣ୍ଡ / kb | |
72 ° C | 2 ମିନିଟ୍ | | 1 |
ଭଣ୍ଡାର
2 ବର୍ଷ ପାଇଁ -20 ± 5 ° C କିମ୍ବା ଦୀର୍ଘକାଳୀନ ସଂରକ୍ଷଣ ପାଇଁ -80 ° C ରେ |
କ No ଣସି ବିସ୍ତାର ସଙ୍କେତ ନାହିଁ |
1. କିଟ୍ ରେ ଥିବା Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ ଅନୁପଯୁକ୍ତ ଷ୍ଟୋରେଜ୍ କିମ୍ବା କିଟ୍ ଅବଧି ସମାପ୍ତ ହେତୁ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ହରାଇଥାଏ |
ସୁପାରିଶ: କିଟ୍ ର ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ;PCR ସିଷ୍ଟମରେ ଉପଯୁକ୍ତ ପରିମାଣର Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ ଯୋଡନ୍ତୁ କିମ୍ବା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ଏକ ନୂତନ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR କିଟ୍ କ୍ରୟ କରନ୍ତୁ |
2. ଡିଏନ୍ଏ ଟେମ୍ପଲେଟରେ ଟ୍ୟାକ୍ ଡିଏନ୍ଏ ପଲିମେରେଜ୍ ର ଅନେକ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଅଛି |
ପରାମର୍ଶ: ଟେମ୍ପଲେଟକୁ ପୁନ ur ନିର୍ମାଣ କରନ୍ତୁ କିମ୍ବା ବ୍ୟବହୃତ ଟେମ୍ପଲେଟର ପରିମାଣକୁ ହ୍ରାସ କରନ୍ତୁ |
3. Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ଉପଯୁକ୍ତ ନୁହେଁ |
ସୁପାରିଶ: ଆମେ ପ୍ରଦାନ କରୁଥିବା 2 × ପ୍ରକୃତ PCR ମିଶ୍ରଣର Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ହେଉଛି 3.5 ମି।ତଥାପି, କିଛି ବିଶେଷ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପାଇଁ, Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ଅଧିକ ହୋଇପାରେ |ତେଣୁ, ଆପଣ Mg2 + ଏକାଗ୍ରତାକୁ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ କରିବାକୁ ସିଧାସଳଖ MgCl2 ଯୋଗ କରିପାରିବେ |ଅପ୍ଟିମାଇଜେସନ୍ ପାଇଁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଥର Mg2 + 0.5mM ବୃଦ୍ଧି କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |
4. PCR ବିସ୍ତାର ଅବସ୍ଥା ଉପଯୁକ୍ତ ନୁହେଁ, ଏବଂ ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମ କିମ୍ବା ଏକାଗ୍ରତା ଅନୁପଯୁକ୍ତ |
ପରାମର୍ଶ: ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମର ସଠିକତାକୁ ନିଶ୍ଚିତ କର ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଖରାପ ହୋଇନାହିଁ;ଯଦି ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ସିଗ୍ନାଲ୍ ଭଲ ନୁହେଁ, ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରାକୁ ହ୍ରାସ କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରନ୍ତୁ ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଏକାଗ୍ରତାକୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ସଜାଡନ୍ତୁ |
5. ଟେମ୍ପଲେଟର ପରିମାଣ ବହୁତ କମ୍ କିମ୍ବା ଅଧିକ |
ସୁପାରିଶ: ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ର line ଖିକୀକରଣ ଗ୍ରେଡିଏଣ୍ଟ୍ ଦିଲ୍ୟୁସନ୍ କାର୍ଯ୍ୟ କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ସର୍ବୋତ୍ତମ PCR ପ୍ରଭାବ ସହିତ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଏକାଗ୍ରତା ଚୟନ କରନ୍ତୁ |
NTC ର ଅତ୍ୟଧିକ ଫ୍ଲୋରୋସେନ୍ସ ମୂଲ୍ୟ ଅଛି |
ଅପରେସନ୍ ସମୟରେ ଘଟିଥିବା ରେଜେଣ୍ଟ୍ ପ୍ରଦୂଷଣ |
ସୁପାରିଶ: ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ନୂତନ ରେଜେଣ୍ଟସ୍ ସହିତ ବଦଳାନ୍ତୁ |
2. PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ପ୍ରସ୍ତୁତି ସମୟରେ ପ୍ରଦୂଷଣ ଘଟିଥିଲା |
ସୁପାରିଶ: ଅପରେସନ୍ ସମୟରେ ଆବଶ୍ୟକ ପ୍ରତିରକ୍ଷା ପଦକ୍ଷେପ ନିଅନ୍ତୁ, ଯେପରିକି: ଲାଟେକ୍ସ ଗ୍ଲୋଭସ୍ ପିନ୍ଧିବା, ଏକ ଫିଲ୍ଟର୍ ସହିତ ପାଇପେଟ୍ ଟିପ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବା ଇତ୍ୟାଦି |
3. ପ୍ରାଇମର୍ଗୁଡ଼ିକ ଅବକ୍ଷୟ ହୋଇଛି, ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ଗୁଡ଼ିକର ଅବକ୍ଷୟ ଅଣ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବୃଦ୍ଧି ଘଟାଇବ |
ପରାମର୍ଶ: ପ୍ରାଥମିକଗୁଡିକ ଖରାପ ହୋଇଛି କି ନାହିଁ ତାହା ଜାଣିବା ପାଇଁ SDS-PAGE ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ ଏବଂ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ସେମାନଙ୍କୁ ନୂତନ ପ୍ରାଇମର୍ ସହିତ ବଦଳାନ୍ତୁ |
ପ୍ରାଇମର୍ ଡାଇମର୍ କିମ୍ବା ଅଣ-ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବିସ୍ତାର |
1. Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ଉପଯୁକ୍ତ ନୁହେଁ |
ସୁପାରିଶ: ଆମେ ପ୍ରଦାନ କରୁଥିବା 2 × ପ୍ରକୃତ PCR EasyTM ମିଶ୍ରଣର Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ହେଉଛି 3.5 ମି।ତଥାପି, କିଛି ବିଶେଷ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପାଇଁ, Mg2 + ଏକାଗ୍ରତା ଅଧିକ ହୋଇପାରେ |ତେଣୁ, ଆପଣ Mg2 + ଏକାଗ୍ରତାକୁ ଅପ୍ଟିମାଇଜ୍ କରିବାକୁ ସିଧାସଳଖ MgCl2 ଯୋଗ କରିପାରିବେ |ଅପ୍ଟିମାଇଜେସନ୍ ପାଇଁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଥର Mg2 + 0.5mM ବୃଦ୍ଧି କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି |
2. PCR ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରା ବହୁତ କମ୍ ଅଟେ |
ପରାମର୍ଶ: PCR ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରାକୁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଥର 1 ℃ କିମ୍ବା 2 by ବୃଦ୍ଧି କରନ୍ତୁ |
3. PCR ଉତ୍ପାଦ ବହୁତ ଲମ୍ବା ଅଟେ |
ସୁପାରିଶ: ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ଉତ୍ପାଦର ଦ length ର୍ଘ୍ୟ 100-150bp ମଧ୍ୟରେ ହେବା ଉଚିତ, 500bp ରୁ ଅଧିକ ନୁହେଁ |
4. ପ୍ରାଇମର୍ଗୁଡ଼ିକ ଅବକ୍ଷୟ ହୋଇଛି, ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ଗୁଡ଼ିକର ଅବକ୍ଷୟ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବିସ୍ତାରର ରୂପ ଧାରଣ କରିବ |
ପରାମର୍ଶ: ପ୍ରାଥମିକଗୁଡିକ ଖରାପ ହୋଇଛି କି ନାହିଁ ତାହା ଜାଣିବା ପାଇଁ SDS-PAGE ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଫୋରେସିସ୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ ଏବଂ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ସେମାନଙ୍କୁ ନୂତନ ପ୍ରାଇମର୍ ସହିତ ବଦଳାନ୍ତୁ |
5. PCR ସିଷ୍ଟମ୍ ଅନୁପଯୁକ୍ତ, କିମ୍ବା ସିଷ୍ଟମ୍ ବହୁତ ଛୋଟ |
ପରାମର୍ଶ: PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ବହୁତ ଛୋଟ, ଚିହ୍ନଟ ସଠିକତା ହ୍ରାସ କରିବ |ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପରୀକ୍ଷଣକୁ ପୁନ run ଚଲାଇବା ପାଇଁ ପରିମାଣିକ PCR ଯନ୍ତ୍ର ଦ୍ୱାରା ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଥିବା ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ବ୍ୟବହାର କରିବା ସର୍ବୋତ୍ତମ |
ପରିମାଣିକ ମୂଲ୍ୟଗୁଡ଼ିକର ଖରାପ ପୁନରାବୃତ୍ତି |
1. ଯନ୍ତ୍ରଟି ତ୍ରୁଟିପୂର୍ଣ୍ଣ ଅଟେ |
ପରାମର୍ଶ: ଯନ୍ତ୍ରର ପ୍ରତ୍ୟେକ PCR ଛିଦ୍ର ମଧ୍ୟରେ ତ୍ରୁଟି ହୋଇପାରେ, ଫଳସ୍ୱରୂପ ତାପମାତ୍ରା ପରିଚାଳନା କିମ୍ବା ଚିହ୍ନଟ ସମୟରେ ଖରାପ ପୁନ oduc ପ୍ରବୃତ୍ତି |ଦୟାକରି ସଂପୃକ୍ତ ଯନ୍ତ୍ରର ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ ଯାଞ୍ଚ କରନ୍ତୁ |
2. ନମୁନା ଶୁଦ୍ଧତା ଭଲ ନୁହେଁ |
ସୁପାରିଶ: ଅଶୁଦ୍ଧ ନମୁନାଗୁଡିକ ପରୀକ୍ଷଣର ଖରାପ ପୁନ oduc ପ୍ରବୃତ୍ତି ଆଣିବ, ଯେଉଁଥିରେ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଗୁଡିକର ଶୁଦ୍ଧତା ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ |ଟେମ୍ପଲେଟକୁ ପୁନ ur ନିର୍ମାଣ କରିବା ସର୍ବୋତ୍ତମ, ଏବଂ ପ୍ରାଥମିକଗୁଡିକ SDS-PAGE ଦ୍ୱାରା ସର୍ବୋତ୍ତମ ଭାବରେ ଶୁଦ୍ଧ ହୋଇଛି |
3. PCR ସିଷ୍ଟମ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତି ଏବଂ ସଂରକ୍ଷଣ ସମୟ ବହୁତ ଲମ୍ବା ଅଟେ |
ପରାମର୍ଶ: ପ୍ରସ୍ତୁତି ପରେ ତୁରନ୍ତ PCR ପରୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ସିଷ୍ଟମ୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ଏହାକୁ ଅଧିକ ସମୟ ପାଇଁ ଛାଡି ଦିଅନ୍ତୁ ନାହିଁ |
4. PCR ବିସ୍ତାର ଅବସ୍ଥା ଉପଯୁକ୍ତ ନୁହେଁ, ଏବଂ ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମ କିମ୍ବା ଏକାଗ୍ରତା ଅନୁପଯୁକ୍ତ |
ପରାମର୍ଶ: ପ୍ରାଥମିକ କ୍ରମର ସଠିକତାକୁ ନିଶ୍ଚିତ କର ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଖରାପ ହୋଇନାହିଁ;ଯଦି ଆମ୍ପ୍ଲାଇଫେସନ୍ ସିଗ୍ନାଲ୍ ଭଲ ନୁହେଁ, ଆନ୍ନାଲିଙ୍ଗ୍ ତାପମାତ୍ରାକୁ ହ୍ରାସ କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରନ୍ତୁ ଏବଂ ପ୍ରାଇମର୍ ଏକାଗ୍ରତାକୁ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ସଜାଡନ୍ତୁ |
5. PCR ସିଷ୍ଟମ୍ ଅନୁପଯୁକ୍ତ, କିମ୍ବା ସିଷ୍ଟମ୍ ବହୁତ ଛୋଟ |
ପରାମର୍ଶ: PCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ବହୁତ ଛୋଟ, ଚିହ୍ନଟ ସଠିକତା ହ୍ରାସ କରିବ |ରିଅଲ୍ ଟାଇମ୍ PCR ପରୀକ୍ଷଣକୁ ପୁନ run ଚଲାଇବା ପାଇଁ ପରିମାଣିକ PCR ଯନ୍ତ୍ର ଦ୍ୱାରା ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଥିବା ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ ବ୍ୟବହାର କରିବା ସର୍ବୋତ୍ତମ |