ସିଧାସଳଖ RT-qPCR କିଟ୍ II |
କିଟ୍ ବର୍ଣ୍ଣନା:
◮ସିଧାସଳଖ RT-qPCR କିଟ୍, ଫୋରେଜେନ୍ ଦ୍ developing ାରା ବିକଶିତ ଫୋରେସି ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍ ଏବଂ ଫୋରେସି HS Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଅନନ୍ୟ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବଫର୍ ସହିତ ଏହି କିଟ୍କୁ ଦୃ strong ପ୍ରତିରୋଧ ଏବଂ ସୁସଙ୍ଗତତା ସହିତ ତିଆରି କରିଥାଏ ଏବଂ ଏହା ସିଧାସଳଖ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରିପାରିବ |ଏହି କିଟ୍ COVID-19 ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଚିହ୍ନଟ କିଟ୍ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ପାଥୋଜେନିକ୍ ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଚିହ୍ନଟ କିଟ୍ ବିକାଶ ପାଇଁ ଆବେଦନ କରିପାରିବ |
ବର୍ଣ୍ଣନା
ସିଧାସଳଖ RT-qPCR କିଟ୍ ପୃଥକ ଭାବରେ ପ୍ୟାକେଜ୍ ହୋଇଥିବା RT-qPCR ବଫର୍, ଉଚ୍ଚ ଦକ୍ଷ ଫୋରେସି HS Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ ପ୍ରଦାନ କରେ |ଏବଂ ଫୋରେସି ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍ (MMLV),ସରଳ ଯାଞ୍ଚ ମଧ୍ୟରେ ବ୍ୟାକ୍-ଏଣ୍ଡ୍ କିଟ୍ ଏବଂ ସିଷ୍ଟମ୍ ଆଡଜଷ୍ଟମେଣ୍ଟ୍ ସୃଷ୍ଟି ପାଇଁ ଏହାକୁ ସୁବିଧାଜନକ କରିବା |
ସିଧାସଳଖ RT-qPCR କିଟ୍, ଫୋରେଜେନ୍ ଦ୍ developing ାରା ବିକଶିତ ଫୋରେସି ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍ ଏବଂ ଫୋରେସି HS Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ ବ୍ୟବହାର କରି ଅନନ୍ୟ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବଫର୍ ସହିତ ଏହି କିଟ୍କୁ ଦୃ strong ପ୍ରତିରୋଧ ଏବଂ ସୁସଙ୍ଗତତା ସହିତ ତିଆରି କରିଥାଏ ଏବଂ ଏହା ସିଧାସଳଖ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଭାବରେ ବ୍ୟବହାର କରିପାରିବ |ଏହି କିଟ୍ COVID-19 ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଚିହ୍ନଟ କିଟ୍ ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ପାଥୋଜେନିକ୍ ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଚିହ୍ନଟ କିଟ୍ ବିକାଶ ପାଇଁ ଆବେଦନ କରିପାରିବ |
ସହଜ ଏବଂ ଦ୍ରୁତ ବ୍ୟବହାର କରି ଏହି କିଟ୍ ସିଧାସଳଖ IVD ଉତ୍ପାଦର ଉପାଦାନ ହୋଇପାରେ |ପୁନର୍ବାର ବିକାଶ ନକରି ଏହା କେବଳ ସହଜ ଯାଞ୍ଚ ଆବଶ୍ୟକ କରେ |
ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟକରଣ
500T, 50,000T
କିଟ୍ ଉପାଦାନଗୁଡ଼ିକ |
| କିଟ୍ ବିଷୟବସ୍ତୁ | (20 μL ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| 500 ଟି | 50,000 T | |
| ଫୋରେସି ଆରଚିରସ୍ଥାୟୀ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍ | (200 U /μL) | 50 μL× 1 | 1 ମି× 5 |
| ଫୋରେସି HS Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ | (5 U /μL) | 100 μL× 1 | 1 ମି× 10 |
| 2 × ସିଧାସଳଖ RT-qPCR |ବଫର୍ | | 1 mL × 5 | 500 mL × 1 |
| ନିର୍ଦ୍ଦେଶ | 1 | 1 |
ଅପରେଟିଂ ଷ୍ଟେପସ୍
ଉ: ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ଏବଂ ରିଜେଣ୍ଟ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ |
1. ପ୍ରସ୍ତୁତ RNA ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ (RNA ଟେମ୍ପଲେଟ୍ ବାହାର ଏବଂ ଶୁଦ୍ଧ କରିବା ପାଇଁ ଫୋରେଜେନ୍ ଟୋଟାଲ୍ RNA ଆଇସୋଲେସନ୍ କିଟ୍ ସିରିଜ୍ କିଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି) କିମ୍ବା ନମୁନା କ୍ରାକିଂ ଉତ୍ପାଦ (ଫୋରେଜେନ୍ ଲାଇସିସ୍ ସିଷ୍ଟମ୍ ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ପରାମର୍ଶ ଦିଆଯାଇଛି), ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରାଇମର୍ (10 μM) ଏବଂ ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ପ୍ରଯୁଜ୍ୟ ଉପଯୋଗୀ ସାମଗ୍ରୀ, ଉପକରଣ |
2. 2 × ସିଧାସଳଖ RT-qPCR ବଫର୍, RNase-free ddH2O ଏବଂ 20 × ROX ରେଫରେନ୍ସ ରଙ୍ଗ (ଯଦି ଏହା ଆବଶ୍ୟକ ହୁଏ) ବରଫ ସହିତ ବାକ୍ସରେ ରଖନ୍ତୁ, ଏହିଗୁଡିକ ପ୍ରାକୃତିକ ଭାବରେ ତରଳିଯାଏ ଏବଂ ଧୀରେ ଧୀରେ ମିଶ୍ରିତ ହୁଏ |
ବି: RT-qPCR ସିଷ୍ଟମ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ |
ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସିଷ୍ଟମର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ବଫରର ଅଧା ଭଲ୍ୟୁମ୍ ପାଆନ୍ତୁ (ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, ଯଦି ସିଷ୍ଟମର ଭଲ୍ୟୁମ୍ 20 μL, ତେବେ ଏହାକୁ 10 μL 2 × ସିଧାସଳଖ RT-qPCR ବଫର୍ ପାଇବା ଆବଶ୍ୟକ |). ପାଇଁଅନୁରୂପ ପରିମାଣର ଏନଜାଇମ୍ |, ଆମେ ଏହା ପରାମର୍ଶ କରୁ |M-MLV ： 10-30 U / 20 μL ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ |,ତାକଡିଏନ୍ଏ ପଲିମେରେଜ୍ |：1-2 U / 20 μL ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀ |ଏହା ଆମର ପରାମର୍ଶ, ତୁମେ ଏହାକୁ ପରୀକ୍ଷା ଏବଂ ଆଡଜଷ୍ଟ କରିବା ଉଚିତ୍ |), RNA ଟେମ୍ପଲେଟ୍, ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ପ୍ରୋବ୍ସ ଯୋଡନ୍ତୁ, ଏବଂ RNase-Free ddH ଯୋଡନ୍ତୁ |2O ରୁ 20 μLRT-qPCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରସ୍ତୁତି ନିମ୍ନ ସାରଣୀ 1 କୁ ସୂଚିତ କରାଯାଇପାରେ |
ସାରଣୀ 1: RT-qPCR ସିଷ୍ଟମ୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ |
| ଉପାଦାନ | | ଭଲ୍ୟୁମ୍ | ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତା | |
| 2 × ସିଧାସଳଖ RT-qPCR ବଫର୍ | | 10 μL | 1 × |
| ଫୋରେସି ରିଭର୍ସ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପଟେଜ୍ (MMLV) | 10-30 U | |
| ଫୋରେସି HS Taq DNA ପଲିମେରେଜ୍ | | 1-2 U | |
| ଅଗ୍ରଗାମୀ ପ୍ରାଥମିକ (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ଓଲଟା ପ୍ରାଇମର୍ (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ଅନୁସନ୍ଧାନ (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| ଟେମ୍ପଲେଟ୍ (RNA କିମ୍ବା Lysate) | X μL | |
| 20 × ROX ସନ୍ଦର୍ଭ ରଙ୍ଗ | | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | | |
| ସମୁଦାୟ ଭଲ୍ୟୁମ୍ | 20 μL |
ଟିପନ୍ତୁ: ଫରୱାର୍ଡ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ରିଭର୍ସ ପ୍ରାଇମର୍ ହେଉଛି ଟାର୍ଗେଟ୍ ଜିନ୍ ର ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରାଇମର୍ |QPCR ର ସିଷ୍ଟମ ବ୍ୟବହାରିକ ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ଏବଂ PCR ମଡେଲ ଅନୁଯାୟୀ ଆଡଜଷ୍ଟ ହୋଇପାରେ |ଅଧିକାଂଶ ପ୍ରାଥମିକମାନଙ୍କର ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତା ପାଇଁ ଆମେ 400nM କୁ ସୁପାରିଶ କରୁ |ପ୍ରସ୍ତୁତ ଏକାଗ୍ରତା ଏବଂ ସୁପାରିଶ କରାଯାଇଥିବା ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତା ଅନୁଯାୟୀ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରାଇମର୍ ଏବଂ ପ୍ରୋବଗୁଡ଼ିକର ଭଲ୍ୟୁମ୍ ଆଡଜଷ୍ଟ କରନ୍ତୁ |
1 *: ବିଭିନ୍ନ ପରିମାଣିକ PCR ଯନ୍ତ୍ର ଅନୁଯାୟୀ ROX ରେଫରେନ୍ସ ରଙ୍ଗର ଉପଯୁକ୍ତ ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତା ଚୟନ କରନ୍ତୁ |ସାଧାରଣ ପରିମାଣିକ PCR ଯନ୍ତ୍ରଗୁଡ଼ିକର ସର୍ବୋଚ୍ଚ ROX ସନ୍ଦର୍ଭ ରଙ୍ଗର ଏକାଗ୍ରତା ନିମ୍ନ ସାରଣୀରେ ପ୍ରଦର୍ଶିତ ହୋଇଛି:
| ପରିମାଣିକ PCR ଉପକରଣଗୁଡ଼ିକ | | ROX ରେଫରେନ୍ସ ରଙ୍ଗର ଅନ୍ତିମ ଏକାଗ୍ରତା | |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT / ପ୍ରଥମ ପଦକ୍ଷେପ,ଇତ୍ୟାଦି | 1 × (ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, 20 μL ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀରେ 1μl 20 × ROX ରେଫରେନ୍ସ ରଙ୍ଗ ଯୋଡନ୍ତୁ) |
| ABI 7500, 7500 ଦ୍ରୁତ, ଷ୍ଟ୍ରାଟେଜେନ୍ Mx3000P, Mx3005P ଏବଂ Mx4000, ଇତ୍ୟାଦି | | 0.5 × (ଉଦାହରଣ ସ୍ୱରୂପ, 20 μL ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପ୍ରଣାଳୀରେ 0.5μl 20 × ROX ରେଫରେନ୍ସ ରଙ୍ଗ ଯୋଡନ୍ତୁ) |
| ରୋଚେ PCR ଯନ୍ତ୍ର, ବାୟୋ-ରେଡ୍ PCR ଯନ୍ତ୍ର, ଏପେଣ୍ଡୋର୍ଫ ପରିମାଣିକ PCR ଉପକରଣ, ଇତ୍ୟାଦି | | ROX ରେଫରେନ୍ସ ରଙ୍ଗ ବିନା | |
ସଂରକ୍ଷଣ ଏବଂ ସେଲଫ୍ ଲାଇଫ୍ |
କିଟ୍ -20 ± 5 at ରେ ଗଚ୍ଛିତ ହେବା ଉଚିତ |ଏହାକୁ ତୁରନ୍ତ -20 ℃ ଥର୍ମୋଷ୍ଟାଟିକ୍ ରେଫ୍ରିଜରେଟରରେ ସଂରକ୍ଷଣ କରାଯିବା ଉଚିତ |ଯଦି ଏହା ଉପଯୁକ୍ତ ଅବସ୍ଥାରେ ଗଚ୍ଛିତ ହୁଏ ତେବେ ବ valid ଧତା ଅବଧି 2 ବର୍ଷ ଅଟେ |
