A260 / A230 ର ନିମ୍ନ ଅନୁପାତ ସାଧାରଣତ 23 230nm ରେ ସର୍ବାଧିକ ଅବଶୋଷଣ ତରଙ୍ଗଦ eng ର୍ଘ୍ୟ ସହିତ ଅପରିଷ୍କାର କାରଣରୁ ହୋଇଥାଏ |ଆସନ୍ତୁ ଦେଖିବା ଏହି ଅପରିଷ୍କାରଗୁଡିକ କ’ଣ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରେ:
-
ସାଧାରଣ ପ୍ରଦୂଷକ |
ଅବଶୋଷଣ ତରଙ୍ଗଦ eng ର୍ଘ୍ୟ |
ଅନୁପାତ ପ୍ରଭାବ
ପ୍ରୋଟିନ୍ |
~ 230nm ଏବଂ 280nm |
A ର ଏକକାଳୀନ ହ୍ରାସ |260/A 280ଏବଂ A।260/A 280ଅନୁପାତ
ଗୁଆନାଡିନ୍ ଲୁଣ |
220-240 nm
A କୁ ହ୍ରାସ କରନ୍ତୁ |260/A 280ଅନୁପାତ
Hen େଙ୍କାନାଳ |
~ 270nm
-
ଟ୍ରାଇଜୋଲ୍
~ 230nm ଏବଂ 270nm |
A କୁ ହ୍ରାସ କରନ୍ତୁ |260/A 280ଅନୁପାତ
EDTA
~ 230nm
A କୁ ହ୍ରାସ କରନ୍ତୁ |260/A 280ଅନୁପାତ
ଇଥାନଲ୍ |
230-240 nm
A କୁ ହ୍ରାସ କରନ୍ତୁ |260/A 280ଅନୁପାତ
ସାଧାରଣ ପ୍ରଦୂଷଣର ଅବଶୋଷଣ ତରଙ୍ଗଦ eng ର୍ଘ୍ୟ ଏବଂ ବିପରୀତ ମୂଲ୍ୟ |
Pରୋଟେନ୍ ପ୍ରଦୂଷଣ |
ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଉତ୍ତୋଳନ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ପ୍ରୋଟିନ୍ ପ୍ରଦୂଷଣକୁ ସାଧାରଣ ପ୍ରଦୂଷଣ ଭାବରେ ବିବେଚନା କରାଯାଇପାରେ |ଉପର ଜଳୀୟ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଏବଂ ତଳ ମଧ୍ୟରେ ପ୍ରୋଟିନ୍ ବିଦ୍ୟମାନ |ଜ organic ବିକ |ପର୍ଯ୍ୟାୟପ୍ରଦୂଷଣ ଏକ ସମୟରେ A260 / A280 ଏବଂ A260 / A230 ଅନୁପାତକୁ ହ୍ରାସ କରିବ ଏବଂ A260 / A230 ଅନୁପାତ A260 / A280 ଅନୁପାତଠାରୁ ଅଧିକ ସ୍ପଷ୍ଟ ଭାବରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ ହେବ |
ପରବର୍ତ୍ତୀ ସମୟରେଓଲଟା ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ |or qPCR ପ୍ରତିକ୍ରିୟା |, ପ୍ରୋଟିନ୍ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ ଏନଜାଇମ୍ କାର୍ଯ୍ୟରେ ବାଧା ସୃଷ୍ଟି କରିପାରେ |।ପ୍ରୋଟିନ୍ ପ୍ରଦୂଷଣକୁ ଏଡ଼ାଇବା ପାଇଁ ସର୍ବୋତ୍ତମ ଉପାୟ ହେଉଛି ଅଲ ern କିକ ଆକାଂକ୍ଷା କରିବା ସମୟରେ “ଅଧିକରୁ କମ୍, ଅଳ୍ପ ଥର ଅନେକ ଥର” ସିଦ୍ଧାନ୍ତକୁ ମନେରଖିବା |
2. ଗୁଆନାଡିନିୟମ୍ ପ୍ରଦୂଷଣ |
ହାଇଡ୍ରୋକ୍ଲୋରିଡ୍ (GuHCl) ଏବଂ ଗୁଆନାଡାଇନ୍ ଥିଓକିଆନେଟ୍ (GTC) ପ୍ରୋଟିନଗୁଡିକର ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ, ଯାହା ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ଉତ୍ତୋଳନ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ଶୀଘ୍ର କୋଷର ମେମ୍ବ୍ରାନକୁ ନଷ୍ଟ କରିପାରେ, ଯାହା ପ୍ରୋଟିନ୍ ଡେନାଟରେସନ୍ ଏବଂ ବୃଷ୍ଟିପାତ କରିଥାଏ |GuHCl ଏବଂ GTC ର ଅବଶୋଷଣ ତରଙ୍ଗଦ eng ର୍ଘ୍ୟ 220-240 nm ମଧ୍ୟରେ, ଏବଂଅବଶିଷ୍ଟ ଗୁଆନାଡିନିୟମ୍ ଲୁଣ A260 / A230 ଅନୁପାତକୁ ହ୍ରାସ କରିବ |।ଯଦିଓ ଅବଶିଷ୍ଟ ଗୁଆନାଡିନିୟମ୍ ଲୁଣ ଅନୁପାତ ହ୍ରାସ କରିବ,ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପରୀକ୍ଷଣ ଉପରେ ଏହାର ପ୍ରଭାବ ପ୍ରକୃତରେ ଅଳ୍ପ ଅଟେ |.
3. ଟ୍ରାଇଜୋଲ ପ୍ରଦୂଷଣ |
ଟ୍ରାଇଜୋଲର ମୁଖ୍ୟ ଉପାଦାନ ହେଉଛି ଫେନୋଲ |ଫେନୋଲର ମୁଖ୍ୟ କାର୍ଯ୍ୟ ହେଉଛି କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ ଲାଇସ୍ କରିବା ଏବଂ କୋଷରେ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଏବଂ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ପଦାର୍ଥ ମୁକ୍ତ କରିବା |ଯଦିଓ ଫେନୋଲ୍ ପ୍ରୋଟିନକୁ ପ୍ରଭାବଶାଳୀ ଭାବରେ ଅଲଗା କରିପାରେ, ଏହା RNase କାର୍ଯ୍ୟକଳାପକୁ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ରୂପେ ପ୍ରତିରୋଧ କରିପାରିବ ନାହିଁ |ତେଣୁ, ଏଣ୍ଡୋଜେନସ୍ ଏବଂ ଏକ୍ସୋଜେନସ୍ RNase କୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିବା ପାଇଁ ଟ୍ରାଇଜୋଲରେ 8-ହାଇଡ୍ରକ୍ସାଇକ୍ଇନୋଲାଇନ୍, ଗୁଆନାଡାଇନ୍ ଆଇସୋଥାଇଓସିୟାନେଟ୍, mer- ମର୍କାପ୍ଟୋଥାନୋଲ୍ ଇତ୍ୟାଦି ଯୋଗ କରାଯାଇଥାଏ |
ସେଲ୍ୟୁଲାର୍ RNA ବାହାର କରିବାବେଳେ, ଟ୍ରାଇଜୋଲ୍ ଶୀଘ୍ର କୋଷଗୁଡିକୁ ଲାଇସ୍ କରିପାରେ ଏବଂ କୋଷରୁ ମୁକ୍ତ ହୋଇଥିବା ନ୍ୟୁକ୍ଲିଜ୍ କୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରିପାରିବ ଏବଂ ଅବଶିଷ୍ଟ ଟ୍ରାଇଜୋଲ୍ A260 / A230 ଅନୁପାତକୁ ଯଥେଷ୍ଟ ହ୍ରାସ କରିବ |
ପ୍ରକ୍ରିୟାକରଣ ପ୍ରଣାଳୀ: ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗିଂ କରିବାବେଳେ, ଏହା ମନେ ରଖିବାକୁ ହେବ ଯେ ଟ୍ରାଇଜୋଲରେ ଥିବା ଫେନୋଲ 4 ° ଏବଂ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ଜଳ ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ ସହଜରେ ଦ୍ରବୀଭୂତ ହୁଏ |
4. ଇଥାନଲ ଅବଶିଷ୍ଟ |
ଅନ୍ତିମ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ଇଥାନଲ୍ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ ଯେତେବେଳେ ଡିଏନ୍ଏ ସହିତ ବାନ୍ଧି ହୋଇପାରେ ଲୁଣ ଆୟନଗୁଡିକ ଦ୍ରବଣ କରେ |ସର୍ବୋଚ୍ଚ ଅବଶୋଷଣ ତରଙ୍ଗଦ eng ର୍ଘ୍ୟ |ଅବଶୋଷଣ ଶିଖରଇଥାନଲ୍ ମଧ୍ୟ 230-240 nm ରେ ଅଛି, ଯାହା |A260 / A230 ର ଅନୁପାତ ମଧ୍ୟ ହ୍ରାସ କରିବ |.
ଇଥାନଲ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶକୁ ଏଡାଇବା ପ୍ରଣାଳୀ ଚୂଡ଼ାନ୍ତ ବିଲୋପ ସମୟରେ ଦୁଇଥର ପୁନରାବୃତ୍ତି ହୋଇପାରେ |ଫ୍ୟୁମ୍ ହୁଡ୍ |ଦୁଇ ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ଇଥାନଲ୍ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ବାଷ୍ପୀଭୂତ ହେବାକୁ ଅନୁମତି ଦେବା ପାଇଁ ବଫର୍ ଯୋଗ କରିବା ପୂର୍ବରୁ |
ତଥାପି, ଏହା ଜାଣିବା ଉଚିତ ଯେ ଏହି ଅନୁପାତ କେବଳ RNA ଗୁଣର ଏକ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ ସୂଚକାଙ୍କ |ଯଦି ଉପରୋକ୍ତ କାର୍ଯ୍ୟଗୁଡିକ କଠୋର ଭାବରେ ନିୟନ୍ତ୍ରିତ ହୁଏ, ଅନୁପାତ ଏବଂ ମାନକ ପରିସର ମଧ୍ୟରେ ବିଚ୍ୟୁତି ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପରୀକ୍ଷଣ ଉପରେ ବିଶେଷ ପ୍ରଭାବ ପକାଇବ ନାହିଁ |
ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଉତ୍ପାଦ:
ପଶୁ ସମୁଦାୟ RNA ବିଚ୍ଛିନ୍ନ କିଟ୍ |
ଉଦ୍ଭିଦ ସମୁଦାୟ RNA ବିଚ୍ଛିନ୍ନ କିଟ୍ |
ସେଲ୍ ଟୋଟାଲ୍ RNA ବିଚ୍ଛିନ୍ନ କିଟ୍ |
ଉଦ୍ଭିଦ ସମୁଦାୟ RNA ବିଚ୍ଛିନ୍ନ କିଟ୍ ପ୍ଲସ୍ |
ପୋଷ୍ଟ ସମୟ: ଫେବୃଆରୀ -10-2023 |