ସମସ୍ୟା ବିଶ୍ଳେଷଣ ଗାଇଡ୍ |

The following is an analysis of the problems that may be encountered in the extraction of plant genomic DNA, hoping to be helpful to your experiments. In addition, for other experimental or technical problems other than operation instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us: 028-83360257 or E-mali: Tech@foregene.com.

କମ୍ ଅମଳ କିମ୍ବା DNA ନାହିଁ |

ସାଧାରଣତ many ଅନେକ କାରଣ ଅଛି ଯାହା ଜେନୋମିକ୍ DNA ର ଅମଳ ଉପରେ ପ୍ରଭାବ ପକାଇଥାଏ, ନମୁନାର ଉତ୍ସ, ନମୁନାର ବୟସ, ନମୁନାର ସଂରକ୍ଷଣ ଅବସ୍ଥା ଏବଂ କାର୍ଯ୍ୟ |

ଉତ୍ତୋଳନ ସମୟରେ ଜେନୋମିକ୍ DNA ମିଳିପାରିଲା ନାହିଁ |

1. ଟିସୁ ନମୁନାଗୁଡିକ ଭୁଲ୍ ଭାବରେ ଗଚ୍ଛିତ କିମ୍ବା ଅଧିକ ସମୟ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଗଚ୍ଛିତ ହୁଏ, ଫଳସ୍ୱରୂପ ଜେନୋମିକ୍ DNA ର ଅବକ୍ଷୟ ହୁଏ |

ସୁପାରିଶ: ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନ କିମ୍ବା -20 ରେ ଟିସୁ ନମୁନା ଗଚ୍ଛିତ କରନ୍ତୁ |°C;ଜେନୋମିକ୍ DNA ନିଷ୍କାସନ ପାଇଁ ନୂତନ ସଂଗୃହିତ ନମୁନା ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରନ୍ତୁ |

2. ଅତ୍ୟଧିକ କମ୍ ନମୁନା ପରିମାଣ ସଂପୃକ୍ତ ଜେନୋମିକ୍ DNA ବାହାର କରିନପାରେ |

ପରାମର୍ଶ: ଟିସୁ ନମୁନା ପାଇଁ ଯାହା ଦୀର୍ଘ ସମୟ ଧରି ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇ ରହିଥିଲା ​​କିମ୍ବା ଜେନୋମିକ୍ DNA ଅବକ୍ଷୟ ହୋଇଥଲା, ଯଥେଷ୍ଟ ଜେନୋମିକ୍ DNA ବାହାର କରିବା ପାଇଁ ଟିସୁ ନମୁନା ପରିମାଣ ଉପଯୁକ୍ତ ଭାବରେ ବୃଦ୍ଧି କରାଯାଇପାରିବ |ଡିଏନ୍ଏ ଆବଶ୍ୟକତା ଅନୁଯାୟୀ ନମୁନାର ପରିମାଣ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରାଯାଇପାରେ, କିନ୍ତୁ ତାଜା ନମୁନା 100mg ରୁ ଅଧିକ ହେବା ଉଚିତ୍ ନୁହେଁ ଏବଂ ଶୁଖିଲା ନମୁନା 30mg ରୁ ଅଧିକ ହେବା ଉଚିତ୍ ନୁହେଁ |

3. ନମୁନା ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନ ସହିତ ଭୂମି ନୁହେଁ କିମ୍ବା ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନ ପରେ ଅଧିକ ସମୟ ରଖାଯାଏ |

ପରାମର୍ଶ: ଡିଏନ୍ଏ ଉତ୍ତୋଳନ ସମୟରେ, ନମୁନାଟି କାନ୍ଥ କାନ୍ଥ ଭାଙ୍ଗିବା ପାଇଁ ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନ୍ ସହିତ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୂମି ହେବା ଆବଶ୍ୟକ;ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ପରେ, ଦୟାକରି ନମୁନା ପାଉଡରକୁ 65 ରେ ଗରମ ହୋଇଥିବା PL1 କୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କରନ୍ତୁ |°ଯଥାଶୀଘ୍ର C (ଗ୍ରାଉଣ୍ଡ ପାଉଡର ତରଳିବା ପରେ ଜେନୋମିକ୍ DNA ଶୀଘ୍ର ଖରାପ ହେବାକୁ ଲାଗିବ) |

4. ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ରୋଟେଜ୍ ର ଅନୁପଯୁକ୍ତ ସଂରକ୍ଷଣ ଫଳାଫଳ ହ୍ରାସ କିମ୍ବା ନିଷ୍କ୍ରିୟ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପରେ ପରିଣତ ହୁଏ |

ସୁପାରିଶ: ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ରୋଟେଜ୍ ର ଷ୍ଟୋରେଜ୍ ଅବସ୍ଥା ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ କିମ୍ବା ଏନଜାଇମାଟିକ୍ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇସିସ୍ ପାଇଁ ଏହାକୁ ଏକ ନୂଆ ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ରୋଟେଜ୍ ସହିତ ବଦଳାନ୍ତୁ |

5. କିଟ୍ ଭୁଲ୍ ଭାବରେ ଗଚ୍ଛିତ କିମ୍ବା ଅଧିକ ସମୟ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଗଚ୍ଛିତ ହୋଇ ରହିଥାଏ, ଯାହା କିଟରେ କିଛି ଉପାଦାନ ବିଫଳ ହୋଇଯାଏ |

ସୁପାରିଶ: ସମ୍ପୃକ୍ତ ଅପରେସନ୍ ପାଇଁ ଏକ ନୂତନ ଉଦ୍ଭିଦ ଜେନୋମିକ୍ DNA ନିଷ୍କାସନ କିଟ୍ କ୍ରୟ କରନ୍ତୁ |

6. କିଟ୍ ର ଅନୁପଯୁକ୍ତ ବ୍ୟବହାର |

ପରାମର୍ଶ: ଉଦ୍ଭିଦ ଜେନୋମିକ୍ DNA ର ଉତ୍ତୋଳନ ଏବଂ ଶୁଦ୍ଧତା ପାଇଁ ନମୁନା ପାଇଁ ଉତ୍ସର୍ଗୀକୃତ ଏକ ଉଦ୍ଭିଦ DNA ବିଚ୍ଛିନ୍ନ କିଟ୍ କ୍ରୟ କରନ୍ତୁ |

7. ଏକ ଯୋଗ ନକରି ବଫର୍ WB |nhydrous ଇଥାନଲ୍ |

ସୁପାରିଶ: ବଫର୍ ଡବ୍ଲୁବିରେ ସଂପୂର୍ଣ୍ଣ ଇଥାନଲ୍ର ସଠିକ୍ ପରିମାଣ ଯୋଡିବାକୁ ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ |

8. ସଠିକ୍ ଭାବରେ ସିଲିକା ମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଉପରେ ପକାଯାଇ ନଥିଲା |

ପରାମର୍ଶ: 65 ରେ ପୂର୍ବ-ଉତ୍ତପ୍ତ ଇଲୁଏଣ୍ଟ୍ ଯୋଡନ୍ତୁ |℃ସିଲିକା ଜେଲ୍ ମେମ୍ବ୍ରାନ୍ର ମଧ୍ୟଭାଗକୁ ଡ୍ରପୱାଇସ୍, ଏବଂ ଏହାକୁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ 5 ମିନିଟ୍ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଛାଡିଦିଅ |

ସ୍ୱଳ୍ପ ଅମଳର ଜେନୋମିକ୍ DNA ପାଇବା ପାଇଁ ନିଷ୍କାସନ |

1. ନମୁନାଟି ଭୁଲ ଭାବରେ ଗଚ୍ଛିତ କିମ୍ବା ଅଧିକ ସମୟ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଗଚ୍ଛିତ ହୁଏ, ଫଳସ୍ୱରୂପ ଜେନୋମିକ୍ DNA ର ଅବକ୍ଷୟ ହୁଏ |

ସୁପାରିଶ: -20 ରେ ଟିସୁ ନମୁନା ଗଚ୍ଛିତ କରନ୍ତୁ |℃;ଜେନୋମିକ୍ DNA ନିଷ୍କାସନ ପାଇଁ ନୂତନ ସଂଗୃହିତ ଟିସୁ ନମୁନା ବ୍ୟବହାର କରିବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରନ୍ତୁ |

2. ଯଦି ଟିସୁ ନମୁନାଗୁଡିକର ପରିମାଣ ବହୁତ କମ୍, ବାହାର କରାଯାଇଥିବା ଜେନୋମିକ୍ DNA କମ୍ ହେବ |

ପରାମର୍ଶ: କେତେକ ଉଦ୍ଭିଦ ନମୁନା ଜଳରେ ଭରପୂର ଅଟେ, ଯେପରିକି ଜଳଜାତୀୟ ଉଦ୍ଭିଦ ଯେପରିକି ଶ ga ଳୀ ଇତ୍ୟାଦି, ଏହାର ମାତ୍ରା ଉପଯୁକ୍ତ ଭାବରେ ବୃଦ୍ଧି କରାଯାଇପାରେ କିମ୍ବା ଅପରେସନ୍ ପୂର୍ବରୁ ପାଣି ଟିକେ ଡିହାଇଡ୍ରେସନ୍ ହୋଇପାରେ |

3. ନମୁନାଗୁଡିକ ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନ ସହିତ ଭଲ ଭାବରେ ଭୂମି ହୋଇନଥିଲା କିମ୍ବା ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ପରେ ଅଧିକ ସମୟ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ଛାଡି ଦିଆଯାଇଥିଲା |

ପରାମର୍ଶ: ତରଳ ନାଇଟ୍ରୋଜେନ୍ ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ଯଥେଷ୍ଟ ହେବା ଆବଶ୍ୟକ, ଏବଂ ନମୁନା କୋଷର କାନ୍ଥକୁ ଯଥାସମ୍ଭବ ଭାଙ୍ଗିବା ଉଚିତ୍;ଗ୍ରାଇଣ୍ଡିଂ ପରେ ତୁରନ୍ତ, ନମୁନା ପାଉଡରକୁ 65 କୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତର କରାଯିବା ଉଚିତ |℃ପରବର୍ତ୍ତୀ ପଦକ୍ଷେପ ପାଇଁ ଗରମ ବଫର୍ PL1 |

4. ସଠିକ୍ କିଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରୁନାହିଁ |

ପରାମର୍ଶ: ଉଦ୍ଭିଦ ଜେନୋମିକ୍ DNA ବାହାର ଏବଂ ଶୁଦ୍ଧ କରିବା ପାଇଁ ଏକ ଉତ୍ସର୍ଗୀକୃତ ଉଦ୍ଭିଦ DNA ବିଚ୍ଛିନ୍ନ କିଟ୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ |

5. ଫରେଜେନ୍ ପ୍ରୋଟେଜ୍ ର ଅନୁପଯୁକ୍ତ ସଂରକ୍ଷଣ ଫଳାଫଳ ହ୍ରାସ କିମ୍ବା ନିଷ୍କ୍ରିୟ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପରେ ପରିଣତ ହୁଏ |

ସୁପାରିଶ: ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ରୋଟେଜ୍ ର ଷ୍ଟୋରେଜ୍ ଅବସ୍ଥା ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ କିମ୍ବା ଏନଜାଇମାଟିକ୍ ହାଇଡ୍ରୋଲାଇସିସ୍ ପାଇଁ ଏହାକୁ ଏକ ନୂଆ ଫୋରେଜେନ୍ ପ୍ରୋଟେଜ୍ ସହିତ ବଦଳାନ୍ତୁ |

6. ଉତ୍ତମ ସମସ୍ୟା |

ସୁପାରିଶ: ଦୟାକରି ବଫର୍ EB ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ;ଯଦି ddH ବ୍ୟବହାର କରୁଛନ୍ତି₂O କିମ୍ବା ଅନ୍ୟାନ୍ୟ ଉପାଦାନ, ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ ଯେ ଏଲିଏଣ୍ଟର pH 7.0-8.5 ମଧ୍ୟରେ ଅଛି |

7. ଏଲିଏଣ୍ଟ୍ ସଠିକ୍ ଭାବରେ ଡ୍ରପ୍ ହୋଇନାହିଁ |

ପରାମର୍ଶ: ଦୟାକରି ସିଲିକା ମେମ୍ବ୍ରାନ୍ର ମଧ୍ୟଭାଗରେ ଏଲିଟେସନ୍ ଡ୍ରପ୍ ଯୋଡନ୍ତୁ ଏବଂ ଏଲିଟେସନ୍ ଦକ୍ଷତା ବ to ାଇବାକୁ 5 ମିନିଟ୍ ପାଇଁ କୋଠରୀ ତାପମାତ୍ରାରେ ଛାଡିଦିଅନ୍ତୁ |

8. ଅଭିଜିତ ଭଲ୍ୟୁମ୍ ବହୁତ ଛୋଟ ଅଟେ |

ପରାମର୍ଶ: ଦୟାକରି ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ ଜେନୋମିକ୍ DNA ବିଲୋପ ପାଇଁ ଏଲିଏଣ୍ଟ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ, ଅତି କମରେ 100 ରୁ କମ୍ ନୁହେଁ |μl.

କମ୍ ଶୁଦ୍ଧତା ସହିତ ଜେନୋମିକ୍ DNA ବାହାର କରାଯାଇଛି |

ଜେନୋମିକ୍ DNA ର ନିମ୍ନ ଶୁଦ୍ଧତା ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ ପରୀକ୍ଷଣର ବିଫଳତା କିମ୍ବା ଖରାପ ପ୍ରଭାବକୁ ଆଣିବ, ଯେପରିକି: ଏନଜାଇମ୍ କଟାଯାଇପାରିବ ନାହିଁ, ଏବଂ ଟାର୍ଗେଟ୍ ଜିନ୍ ଖଣ୍ଡ PCR ଦ୍ୱାରା ମିଳିପାରିବ ନାହିଁ |

1. ବିବିଧ ପ୍ରୋଟିନ୍ ପ୍ରଦୂଷଣ, RNA ପ୍ରଦୂଷଣ |

ବିଶ୍ଳେଷଣ: ସ୍ତମ୍ଭ ଧୋଇବା ପାଇଁ ବଫର୍ PW ବ୍ୟବହୃତ ହେଲା ନାହିଁ;ସଠିକ୍ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ ବେଗରେ ସ୍ତମ୍ଭ ଧୋଇବା ପାଇଁ ବଫର୍ PW ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇନଥିଲା |

ପରାମର୍ଶ: ସୁପର୍ନେଟାଣ୍ଟ ସ୍ତମ୍ଭ ଦେଇ ଗଲାବେଳେ ଅଲ ern କିକ ଶକ୍ତିରେ କ ip ଣସି ବୃଷ୍ଟିପାତ ନହେବାକୁ ଚେଷ୍ଟା କରନ୍ତୁ;ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ ବଫର୍ PW ସହିତ ଶୁଦ୍ଧକରଣ ସ୍ତମ୍ଭ ଧୋଇବାକୁ ନିଶ୍ଚିତ ହୁଅନ୍ତୁ, ଏବଂ ଏହି ପଦକ୍ଷେପକୁ ଛାଡି ଦିଆଯାଇପାରିବ ନାହିଁ |

2. ଅପରିଷ୍କାର ଆୟନ ପ୍ରଦୂଷଣ |

ବିଶ୍ଳେଷଣ: ବଫର୍ ଡବ୍ଲୁବି ଧୋଇବା ସ୍ତମ୍ଭକୁ ଛାଡି ଦିଆଗଲା କିମ୍ବା କେବଳ ଥରେ ଧୋଇଗଲା, ଫଳସ୍ୱରୂପ ଅବଶିଷ୍ଟ ଆୟନିକ୍ ପ୍ରଦୂଷଣ ହେଲା |

ସୁପାରିଶ: ଅବଶିଷ୍ଟ ଆୟନକୁ ଯଥାସମ୍ଭବ ଅପସାରଣ କରିବାକୁ ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ ବଫର୍ ଡବ୍ଲୁବି ସହିତ ଦୁଇଥର ଧୋଇବାକୁ ନିଶ୍ଚିତ ହୁଅନ୍ତୁ |

3. RNase ପ୍ରଦୂଷଣ |

ବିଶ୍ଳେଷଣ: ବଫରରେ ଏକ୍ସୋଜେନସ୍ RNase ଯୋଡା ଯାଇଛି;ବଫର୍ PW ରେ ଭୁଲ୍ ଧୋଇବା କାର୍ଯ୍ୟ ଅବଶିଷ୍ଟ RNase ସୃଷ୍ଟି କରିବ ଏବଂ ଡାଉନ୍ଷ୍ଟ୍ରିମ୍ RNA ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ କାର୍ଯ୍ୟକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରିବ, ଯେପରିକି ଭିଟ୍ରୋ ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପସନ୍ |

ପରାମର୍ଶ: ଫୋରେଜେନ୍ ସିରିଜ୍ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟିକ୍ ଏସିଡ୍ ନିଷ୍କାସନ କିଟ୍ ଅତିରିକ୍ତ RNase ବିନା RNA ଅପସାରଣ କରିପାରିବ, ଏବଂ ଉଦ୍ଭିଦ DNA ବିଚ୍ଛିନ୍ନ କିଟ୍ ରେ ଥିବା ସମସ୍ତ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକ RNase ଆବଶ୍ୟକ କରନ୍ତି ନାହିଁ |ନିର୍ଦ୍ଦେଶ ଅନୁଯାୟୀ ବଫର୍ PW ସହିତ ଶୁଦ୍ଧକରଣ ସ୍ତମ୍ଭ ଧୋଇବାକୁ ନିଶ୍ଚିତ ହୁଅନ୍ତୁ, ଏବଂ ଏହି ପଦକ୍ଷେପକୁ ଛାଡି ଦିଆଯାଇପାରିବ ନାହିଁ |

4. ଇଥାନଲ୍ ଅବଶିଷ୍ଟାଂଶ |

ବିଶ୍ଳେଷଣ: ବଫର୍ ଡବ୍ଲୁବି ସହିତ ଶୁଦ୍ଧକରଣ ସ୍ତମ୍ଭ ଧୋଇବା ପରେ କ empty ଣସି ଖାଲି ଟ୍ୟୁବ୍ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ କରାଯାଇନଥିଲା |

ସୁପାରିଶ: ଉପଯୁକ୍ତ ଖାଲି ଟ୍ୟୁବ୍ ସେଣ୍ଟ୍ରିଫୁଗେସନ୍ ପାଇଁ ନିର୍ଦ୍ଦେଶାବଳୀ ଅନୁସରଣ କରନ୍ତୁ |

ନିର୍ଦ୍ଦେଶନାମା:

ଉଦ୍ଭିଦ DNA ବିଚ୍ଛିନ୍ନ କିଟ୍ ନିର୍ଦ୍ଦେଶନାମା |